复方双丁散浸提液与青、链霉素对奶牛乳房炎药敏试验
2020-10-11李佳祺
李佳祺
(河南省新乡市人民公园 453000)
1 方法
1.1 病料采取
选取马赵营村和杨窑两处奶牛场共5 头患病奶牛,对患乳区乳头严格消毒,待干后,每个乳头先弃去前3 把奶,采取患病乳区共5 份奶样(5ml/乳区)至无菌管内并进行标号,立即送至实验室进行检验[1]。
1.2 病原菌分离培养及鉴定
用接种环取病料于鲜血肉汤中培养24h,挑取典型菌落涂片,革兰氏染色,镜检。根据菌体形态、溶血情况及革兰氏染色特性初步判定细菌类属。并将其进一步纯化培养。纯培养后镜检无杂菌者保存于试管斜面培养基内。
1.3 复方双丁散浸提液的制备
按配方中一定比例取中药蒲公英、二花、连翘、紫花地丁、王不留行、丝瓜络等共340g,浸泡、加热、蒸馏取滤液将剩余药液配成340ml。
此时药液浓度为1g/ml,分别取80、40、20ml 药液,将其浓缩成10ml 药液,制成8、4、2 倍药液待用。
1.4 药敏试验
1.4.1 细菌计数
将菌液分别稀释106、107、108倍,另备一试管中盛有9ml灭菌生理盐水,作为空白对照。
培养24h 左右后应立即计数每个平板上的菌落数。按30~300 个菌落计数规则计算平板的菌落数。
不同稀释浓度细菌计数结果,见表1。
由表1 可知,于37℃温箱中培养24h 后,菌液计数结果大致为5.0×107个/ml。
2 试验结果
2.1 分离培养鉴定结果
表1 细菌计数结果
经革兰氏染色,镜检,细菌的形态观察从中成功分离培养出葡萄球菌2 株、链球菌1 株、大肠杆菌3 株。
2.2 药敏试验
各菌株药敏试验结果,见表2。
培养24h 后观察时,青、链霉素抑菌效果明显,且多为高敏,而复方双丁散多为高敏、中敏效果;在培养48h 观察后,链霉素抑菌圈中长有新的菌落,而复方双丁散不同浓度的抑菌效果均有增加。
3 分析讨论
3.1 复方双丁散浸提液与青、链霉素药敏试验比较
从临床型奶样的细菌分离情况来看,葡萄球菌,链球菌和大肠杆菌是该奶牛场奶牛乳房炎的主要病原菌[2]。从本文的药敏试验结果中可以看出,复方双丁散浸提液对奶牛乳房炎病原菌有很好的抑菌作用,而青、链霉素的耐药性相比中药制剂抑菌圈相对较小。
3.2 复方双丁散功效分析
本试验根据奶牛乳房炎的发病机理和中药药性选取具有清热解毒、抗菌消炎、活血化瘀、消肿散结的12 种中药材组成复方制剂。
主药蒲公英和紫花地丁性味甘平、微苦寒、具有清热解毒、尿通淋、消肿散结的功效,是治乳痈之要药;金银花性味甘寒、疏散风热、连翘性苦微寒、消痈散结。这3 种药物结合在一起可以增强整个组方的疗效。
3.3 抗生素的耐药性问题
由表2 可以看出,青、链霉素普遍比中药抑菌圈小,且该病例在发病后用抗生素治疗,病情没有好转迹象,这很可能与病原菌对抗生素产生耐药性有关。
在培养24h 观察,抗生素抑菌效果明显,而复方双丁散只有部分高敏、中敏效果;在培养48h 观察后,链霉素抑菌圈中长有新的菌落,而复方双丁散不同浓度的抑菌效果均有增加[3]。这很可能也与抗生素产生耐药性有关,而中药药效较慢,24h未达到最高抑菌效果。
4 结论
本试验表明,复方双丁散浸提液对乳房炎常见3 种病原菌抑菌效果比青、链霉素明显,且药效持久,可以进一步进行临床治疗试验。