巴彦淖尔地区中老年心脑血管疾病患者载脂蛋白E 和SLCO1B1 基因多态性分布

何伟 李婷 梁昆 丁健茹 刘昊庭

随着人民生活水平的提高，心脑血管疾病已成为危害我国居民健康的主要疾病［1］。他汀类药物是临床广泛应用的一种降脂药，也是治疗高脂血症的首选药物，但其疗效表现出明显的个体差异，这部分差异可归因于患者个体基因的遗传与变异。SLCO1B1 基因和载脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）基因是近年来相关研究的热点。药物转运蛋白人类有机阴离子转运多肽1B1（organic anion transporting polypeptide 1B1，OATP1B1）主要存在于肝脏，可将他汀类药物由血液转运至肝细胞，其编码基因为SLCO1B1。部分患者按常规剂量使用他汀类药物后会导致肝功能受损［2］或引起肌肉毒性，出现肌无力或肌肉疼痛，若肌病发现不及时，严重者可导致横纹肌溶解和急性肾衰竭。其根本原因在于几乎所有他汀类药物都是OATP1B1 的底物，SLCO1B1 的基因多态性可能改变OATP1B1 的转运功能，对他汀类药物血药浓度、疗效和不良反应均有不同程度的影响［3］。ApoE 是一种血浆蛋白，参与三酰甘油（triglyceride，TG）、胆固醇的转运等脂质代谢过程,而ApoE 是动脉粥样硬化性血管病和高脂血症的易感基因，会影响他汀类药物的疗效［4］。目前尚无关于巴彦淖尔地区ApoE 和SLCO1B1 基因型与表型的综合分析。通过基因多态性检测可预测他汀类药物的代谢速率、类型和药物敏感程度，辅助临床合理调整药物剂量。本研究对有不同他汀类药物疗效和肌病风险的心脑血管疾病患者进行分类统计，以期提高临床诊断及治疗水平，报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2018年9月—2019年12月本院门诊及住院行他汀类药物治疗的中老年心脑血管疾病患者115例作为研究对象，其中男性81例，女性34例；年龄44～83岁，平均（61.57±10.57）岁；所有入选者均为巴彦淖尔地区的汉族人群，无血缘关系和异族通婚史。本研究符合医学伦理学标准，经本单位伦理批准（审批号：20190211）。

1.2 仪器与试剂 Fascan 48E 多通道荧光定量分析仪和测序反应通用试剂盒SNP-U4 均由西安天隆科技有限公司提供。

1.3 研究方法

1.3.1 所有患者行他汀类药物治疗前采集空腹静脉血2～3 mL。根据试剂盒说明书将全血标本涡旋混匀，取外周全血标本10 μL 加入通用样本稀释液中，涡旋混匀5 s，室温静置5 min。依次在检测孔内加入2 μL 稀释好的外周全血样本和阴、阳性质控品。37 ℃温浴3 min 后6 000 r/min（离心半径为6.75 cm）离心40 s，将8 联管再次涡旋3 s 混匀，6 000 r/min离心5 s。根据需要在仪器软件上设置样本及质控位置，将上述反应管放置在Fascan 48E 分析仪上进行检测，判读结果。

1.3.2 测定所有患者血脂水平实验室指标〔TG、总胆固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、极低密度脂蛋白胆固醇（very low density lipoprotein cholesterol，VLDL-C）〕。

1.4 统计学方法 使用SPSS 20.0 统计软件分析数据。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用独立样本t 检验或方差分析；非正态分布的计量资料以中位数（四分位数）〔M（QL，QU）〕表示，采用非参数检验；计数资料以例（率）表示，采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ApoE 基因型分布情况 共检测到6 种ApoE 基因型：E2/E2、E2/E3、E2/E4、E3/E3、E3/E4、E4/E4，基因型频率分别为0.87%、6.09%、2.60%、62.61%、26.96%、0.87%。E2、E3、E4 等位基因频率分别为5.22%、79.13%、15.65%。见表1。

表1 巴彦淖尔地区115例中老年心脑血管疾病患者ApoE 基因型分布

2.2 SLCO1B1 基因型分布情况 SLCO1B1 基因型：*1a/*1a、*1a/*1b、*1b/*1b、*1a/*5、*1a/*15、*1b/*15、*5/*5、*5/*15、*15/*15，基因型频率分别为5.22%、31.30%、40.00%、0、6.09%、16.52%、0、0、0.87%。*1a、*1b、*5、*15 等位基因频率分别为23.91%、63.91%、0、12.18%。见表2。

表2 巴彦淖尔地区115例中老年心脑血管疾病患者SLCO1B1 基因型分布

2.3 ApoE 3 种基因表型患者一般资料比较 ApoE 是LDL-C受体和LDL-C受体相关蛋白（LDL-L receptor related protein，LRP）的主要配体，在脂质运输中起重要作用。ApoE 基因可分为3 种亚型，分别是ApoE2、ApoE3 和ApoE4型，对应他汀类药物降脂疗效良好、降脂疗效正常和降脂疗效降低，增加阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）风险［5］。ApoE 3 种基因表型患者的性别、年龄、TG、TC、HDL-C、VLDL-C 水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）；LDL-C 水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 巴彦淖尔地区ApoE 3 种基因表型心脑血管疾病患者的一般资料比较

2.4 SLCO1B1 3 种基因表型患者的一般资料比较根据他汀类药物不良反应和肌病风险等［6］，可分为Ⅰ类（正常肌病风险）、Ⅱ类（中度肌病风险）和Ⅲ类（重度肌病风险）3 种表型。由于重度肌病风险组仅1例患者，故与中度肌病风险组合并进行统计学分析。SLCO1B1 3 种基因表型患者的性别、年龄、血脂指标比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表4。

表4 巴彦淖尔地区SLCO1B1 3 种基因表型心脑血管疾病患者的一般资料比较

2.5 不同地区行他汀类药物代谢基因检测人群的ApoE 和SLCO1B1 基因型分布频率比较 巴彦淖尔地区人群ApoE和SLCO1B1基因型分布频率与沈阳、重庆地区比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）；巴彦淖尔地区ApoE 基因型分布频率与武汉及周边地区比较差异有统计学意义（P＜0.05），SLCO1B1 基因型分布频率与武汉及周边地区比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表5。

表5 不同地区行他汀类药物代谢基因检测人群的ApoE 和SLCO1B1 基因型分布频率比较

3 讨论

基因多态性研究近年来逐渐兴起，可为多种疾病的个体化用药提供参考［10］。他汀类药物作为较全面的一线调脂用药，不仅能强效降低TC 和LDL-C，而且能在一定程度上降低TG，升高HDL-C，具有稳定斑块等效果［11］。ApoE 基因会影响ApoE 的合成，参与胆固醇和磷脂的再分布和动员，ApoE 基因多态性与他汀类药物疗效密切相关。E2/E2、E2/E3 基因型是长寿基因型，此类型患者发生AD、脑梗死和冠心病的风险较低。E2/E4、E3/E3 基因型是野生基因型，即正常基因型。ApoE 等位基因E4 是最危险的基因［12］，携带该等位基因的E3/E4、E4/E4 基因型是危险基因型，视网膜色素变性、心脑血管疾病患病风险较高［13］。本研究显示，E3 等位基因频率最高，E2 等位基因频率最低，E4 介于二者之间；ApoE4 等位基因和降脂疗效降低组分布频率均较低，说明巴彦淖尔地区心脑血管疾病患者可选用他汀类药物进行相关治疗。SLCO1B1 基因编码的蛋白主要参与药物转运，负责将血液中的药物转运到肝脏直接发挥药效或转化为有活性的物质。若该基因发生突变，可导致他汀等药物转运至肝细胞的数量减少，引起血药浓度上升，造成高剂量使用他汀类药物的突变型患者发生横纹肌溶解和肾功能衰竭等不良反应。目前对SLCO1B1 基因5 号外显子c.521 T＞C 的研究最为充分［14］。巴彦淖尔地区心血管疾病患者服用他汀类药物后出现不同程度肌病风险比例从高到低依次为正常肌病风险、中度肌病风险和重度肌病风险。从SLCO1B1 基因水平可看出巴彦淖尔地区大多数行他汀类药物治疗的患者肌病风险正常，小部分可能会有中度风险，重度风险极少。陈敏等［8］研究显示，ApoE 基因不同药物疗效组与SLCO1B1基因不同肌病风险组整体分布均匀，无显著差异。

本研究纳入115例行他汀类药物治疗的中老年心血管疾病患者，ApoE 和SLCO1B1 基因检测结果表明，不同SLCO1B1 基因表型患者的性别、年龄、血脂水平分布比较差异无统计学意义，与既往相关文献［15-16］一致。不同ApoE 基因表型患者的性别、年龄、TG、TC、HDL-C、VLDL-C 水平比较差异无统计学意义，但LDL-C 水平比较差异有统计学意义。本地区他汀类药物不同降脂疗效组间的LDL-C 水平存在差异，可能与患者本身遗传因素以及样本量较少有关。巴彦淖尔地区行基因检测人群ApoE 和SLCO1B1 基因型与沈阳、重庆地区比较差异无统计学意义；巴彦淖尔地区ApoE 基因型与武汉及周边地区比较差异有统计学意义，SLCO1B1 基因型与武汉及周边地区比较差异无统计学意义，表明ApoE 基因可能存在地区差异，建议患者服用他汀类药物前进行基因检测。

综上所述，目前药物治疗处于传统经验用药向个性化用药转变的阶段。通过基因检测对患者进行遗传学分析，明确不同人群的基因差异，初步制订用药方案，并通过血药浓度监测等手段调整和修正给药方案，有助于做到真正的个性化用药。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突