广西地区反复呼吸道感染儿童维生素A、E水平及其与免疫功能的相关性分析

杨晓祥 覃敏 庞夏玲 陈洁琳 冯燕华 谭杰 莫荣浩 黄丽莲 李英乔 江蕙芸

反复呼吸道感染（recurrent respiratory infection，RRI）是一种常见的儿童呼吸系统疾病，占我国呼吸道感染患儿的30%，近年来其发病率呈上升趋势[1]。RRI发病机制复杂，加上儿童对呼吸道病原微生物的抵抗力较差，易导致治疗后复发或发生肾炎、脓毒血症、心肌炎等疾病，严重危害儿童的身心健康，给社会和家庭带来经济和心理负担[2]。除致病微生物感染外，RRI与维生素A、E等脂溶性维生素缺乏也密切相关。维生素A、E缺乏会影响机体免疫力，而免疫力降低会增加疾病发生风险[3-4]。WHO报告全世界至少有2.5亿名儿童面临这种风险，严重的维生素A缺乏症仍然是许多发展中国家的主要公共卫生问题之一[5]。本研究检测了广西地区RRI患儿维生素A、E水平及免疫功能指标，并与健康体检儿童进行对照，以探讨RRI患儿维生素A、E水平变化及其与免疫功能的相关性，为RRI的临床治疗和预防提供依据。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2017年1月至2019年12月就诊于广西壮族自治区妇幼保健院并诊断为RRI的268例患儿为观察组，男 192例，女 76例；年龄（3.11±1.97）岁。选择本院同期体检的134例健康儿童为对照组，男101例，女 33 例；年龄（3.20±1.87）岁。纳入标准：（1）年龄在6 个月～14 岁；（2）符合 RRI诊断标准；（3）身高、体重发育在同年龄同性别儿童正常值范围内。排除标准：（1）合并其他先天性脏器发育畸形；（2）合并免疫缺陷；（3）早产儿；（4）中重度营养不良、重度贫血；（5）合并肿瘤、结核；（6）有重大手术史。两组儿童性别、年龄比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。本研究经医院伦理委员会审查通过，所有儿童的家属签署知情同意书。

1.2 实验室检测 （1）维生素A、E水平检测：采集外周静脉血2 ml于真空干燥管，室温避光保存，1 h后3 500 r/min离心10 min分离血清，将血清转移至1.5 ml EP管，4℃避光保存送检。使用高效液相色谱仪（Agilent 1260型，美国安捷伦公司）、采用高效液相色谱法检测血清维生素A、E水平。（2）IgG、IgA和IgM水平检测：采集外周静脉血3 ml于真空干燥管，3 000 r/min离心10 min分离血清，应用免疫比浊法检测血清IgG、IgA和IgM水平，仪器为美国罗氏公司COBAS 8000全自动生化分析仪，试剂为北京利德曼生化股份有限公司，IgG、IgA和IgM检测试剂批号为17073003、17073011、17073007。（3）T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞检测：采集外周静脉血2 ml于EDTA抗凝管，轻轻混匀数次，采用贝克曼公司FC500流式细胞分析仪进行T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞检测，试剂为仪器配套试剂，CD3+、CD4+、CD8+检测试剂批号为lot7580183F、CD19+、NK 检测试剂批号为 lot7536238，检测结果以百分比报告。

1.3 诊断标准 （1）RRI的诊断参考文献[6]：1年内发生上、下呼吸道感染的次数频繁，超出正常范围。0～2岁反复上呼吸道感染≥7次/年，或反复气管支气管炎≥3次/年，或反复肺炎≥2次/年；3～5岁反复上呼吸道感染≥6次/年，或反复气管支气管炎≥2次/年，或反复肺炎≥2次/年；6～14岁反复上呼吸道感染≥5次/年，或反复气管支气管炎≥2次/年，或反复肺炎≥2次/年。（2）维生素营养状况分级标准参考文献[7]：①维生素A分级标准：0.3～0.5 mg/L为正常，0.2～＜0.3 mg/L为可疑亚临床缺乏，＜0.2 mg/L为亚临床缺乏，＜0.1 mg/L同时伴有干眼病为临床缺乏；②维生素E分级标准：＜5 mg/L为缺乏，5～7 mg/L 为不足，＞7～20 mg/L 为正常，＞20 mg/L 为过量。

1.4 统计学处理 采用SPSS 19.0统计软件。呈正态分布的计量资料用表示，两组比较采用两独立样本t检验；等级资料组间比较采用秩和检验。RRI患儿维生素A、E水平与免疫功能指标的相关性分析采用Spearman秩相关。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组儿童血清维生素A、E水平比较 观察组维生素 A、E 水平分别（0.32±0.09）、（8.27±2.76）mg/L，低于对照组的（0.35±0.08）、（9.08±2.52）mg/L，差异均有统计学意义（t=3.639、2.843，均 P＜0.05）。两组患者维生素A、E营养状况比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

2.2 两组儿童免疫功能指标比较 在细胞免疫指标方面，观察组 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+均低于对照组，CD8+高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；而NK细胞比例差异无统计学意义（P＞0.05）。在体液免疫指标方面，观察组IgG、IgA水平低于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；而IgM水平差异无统计学意义（P＞0.05），见表 2。

2.3 RRI患儿维生素A、E正常与缺乏者免疫功能指标比较 RRI患儿维生素A正常145例，缺乏123例；维生素E正常83例，缺乏16例。维生素A正常患儿CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和 IgG、IgA 水平均明显高于维生素A缺乏者，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；而CD8+、CD19+、NK细胞比例和IgM水平比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。维生素E正常与缺乏患儿各项免疫功能指标比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表 3。

2.4 RRI患儿维生素A、E与免疫功能指标的相关性RRI患儿维生素 A、E 水平与 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和IgG、IgA 水平均呈正相关（均 P＜0.05），与 CD8+、CD19+、NK细胞比例和IgM水平均未见相关性（均P＞0.05），见表4。

3 讨论

RRI的发病与多种因素有关，目前普遍认为呼吸道解剖结构异常，维生素A、E缺乏以及免疫功能下降是主要因素[3-4]。维生素A、E是人体必需的脂溶性维生素，不仅能促进机体合成Ig，加快新陈代谢；也能保护皮肤，避免黏膜受到致病微生物的侵害[8]。维生素A、E对维持机体生理功能和生长发育等具有重要作用，维生素A、E充足能维持机体细胞和体液免疫功能处于正常状态，增强机体抗感染的能力，有效预防RRI的发生[9-10]。

目前全球范围内，维生素A都存在不同程度的缺乏。在流行地区，缺乏维生素A的儿童存在患严重呼吸道感染疾病的风险，且频繁患病[11]。维生素A水平降低或缺乏易引起呼吸道黏膜上皮细胞生长受限以及IgA分泌减少，从而影响黏膜的完整性和免疫功能，减弱呼吸道黏膜抗感染、抗病毒的能力，导致局部气道免疫功能紊乱，因此易发生呼吸道感染[12]。本研究结果显示，RRI患儿血清维生素A水平及正常率均低于健康儿童，与相关文献报道一致[13-15]，这表明机体维生素A水平降低与RRI有关。同时还发现RRI患儿细胞免疫指标 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+和体液免疫指标 IgG、IgA水平明显低于健康儿童，且维生素A水平与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和IgG、IgA水平呈正相关。分析原因，可能是维生素A中的视黄醛决定了T细胞分化为辅助T细胞或调解T细胞，维生素A水平降低或缺乏会导致T细胞亚群发生变化；同时视黄醛也影响B淋巴细胞的发育和增殖，导致体液免疫功能降低或紊乱[16]。因此，维生素A不仅影响患儿细胞免疫，还会影响体液免疫。

表1 两组儿童维生素A、E营养状况比较[例（%）]

表2 两组儿童免疫功能指标比较

表3 RRI患儿维生素A、E正常与缺乏者免疫功能指标比较

表4 RRI患儿维生素A、E与免疫功能指标的相关性

维生素E具有抗氧化作用，能抑制免疫损伤，维持机体免疫功能正常；而维生素E缺乏会增加机体免疫细胞氧化性，降低C3活性，引起细胞及体液免疫功能下降，从而导致机体抵抗力下降，对病原微生物的易感性增加[17]。Zhang等[18]研究表明，RRI患儿维生素E水平低于健康儿童。本研究发现RRI患儿与健康儿童维生素E水平均处于正常范围，但RRI患儿维生素E水平低于健康儿童，而维生素E不足、缺乏和过量的比例均高于健康儿童，与国内外报道相似[18]。进一步分析发现，RRI患儿维生素E正常与缺乏者各项免疫功能指标差异均无统计学意义，这可能与维生素缺乏患儿例数较少，或同时具有维生素A缺乏有关，具体原因仍需进一步研究证实。此外，本研究发现维生素E水平与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和 IgG、IgA 水平呈正相关，与 CD8+、CD19+、NK细胞比例和IgM水平均未见相关性，与李政等[15]报道的四川地区7个月～12岁RRI患儿研究结果相近；但与董崇娟等[13]报道山东地区6岁以下RRI患儿的研究结果不同，该研究表明维生素E水平与IgM水平具有一定的相关性，与CD4+、CD8+和IgA、IgG水平均无关，这可能与地区、研究对象年龄不同等有关。Moeini等[19]研究结果显示，适当补充维生素E可提高机体免疫功能。因此，有必要了解RRI患儿体内维生素E水平，治疗时根据情况适当补充维生素E。

综上所述，广西地区RRI患儿血清维生素A、E水平及免疫功能指标均降低，两者具有相关性。因此，在RRI儿童治疗过程中有必要了解维生素A、E水平及免疫功能指标，有针对性地补充维生素，指导儿童合理膳食，增强其机体免疫功能，避免RRI发生。