安罗替尼对晚期NSCLC患者免疫功能的影响

肖 锋，肖茂良，李孝君

（湖南中医药高等专科学校附属第一医院，株洲 412000）

肿瘤血管生成是恶性肿瘤生长、复发和转移的关键环节。抗血管生成治疗可以抑制肿瘤毛细血管生成，使肿瘤血管及微环境正常化，诱导肿瘤细胞凋亡。抗血管治疗在晚期NSCLC治疗中具有重要作用，不仅通过抑制肿瘤血管生成起到抗肿瘤作用，还可以通过调节机体免疫细胞，起到增强机体免疫功能作用［1-3］。盐酸安罗替尼是国内自主研发的多靶点的酪氨酸激酶受体抑制剂，对VEGFR1/2/3、FGFR1/2 /3 等血管形成激酶具有明显的抑制作用，具有抗肿瘤血管生成作用。恶性肿瘤患者常伴免疫功能低下，机体的免疫功能在肿瘤的发生、发展及预后中起着重要的作用，提高免疫功能有助于提高肿瘤患者生存质量。目前尚无关于安罗替尼对晚期NSCLC患者免疫功能研究。本研究通过检测安罗替尼治疗前后肺癌患者T淋巴细胞和Th1，Th2 型细胞因子水平进行检测，探究安罗替尼对晚期NSCLC患者免疫功能及生活质量影响。

1 资料与方法

1.1 一般临床资料本研究纳入本院于2018年9月～2019年10月收治的晚期NSCLC患者共62例，随机将患者分为治疗组（32例）和对照组（30例），治疗组男18例，女14 例；年龄56～72岁，平均年龄（62.41±8.87）岁；腺癌23例，鳞癌9例，IIIb期8例，IV期24例。对照组男17例，女13例；年龄55～70岁，平均年龄（61.23±6.69）岁；腺癌20 例，鳞癌10例，Ⅲb期7例，Ⅳ期23例。两组患者疾病分期、年龄段等基线资料无统计意义（P＞0.05），见表1。

1.2 纳入和排除标准纳入标准：①经病理学或组织学确诊为Ⅲb或Ⅳ期NSCLC；②既往至少接受过两种系统性化疗方案治疗进展或复发的晚期NSCLC患者；③预计生存期超过6 月。排除标准：①基因检测证实EGFR、ALK突变阳性，但未使用靶向药物治疗的患者；②安罗替尼禁忌症如中央型、大空洞的肺鳞癌，高度咯血风险的 NSCLC 患者。

本项目经湖南省直中医院医院伦理委员会批准。所有患者在研究前已签署知情同意书。

1.3 分组和治疗方法

表1 两组一般临床资料

治疗组患者口服安罗替尼12mg/次，1次/d；连续用药2周停1周，并根据病情给予对症支持治疗；对照组患者仅给予对症支持治疗。两组患者均连续治疗3周后评价疗效。

1.4 观察指标及方法

1.4.1 T细胞亚群检测分别抽取2组患者治疗前1天，治疗后3周外周静脉血3～5mL，采用流式细胞仪测定 CD3 +、CD4 +、CD8 +、CD4 + /CD8 + 、NK 细胞，观察细胞免疫功能变化。

1.4.2 细胞因子检测分别抽取2组患者治疗前1天，治疗后3周外周静脉血3～5mL，应用酶联吸附实验测定血清INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10，水平变化。

1.4.3 生命质量评价采用生命质量评估（Quality of life，QOL）量表评价患者治疗后生命质量，QOL 量表由食欲、精神及体力、睡眠、疼痛家庭理解与照顾、社会支持、活动能力、治疗的不良反应等12 项指标组成。每项计1～5 分。分级标准：满分60分，极差：得分≤20；差：21～30 分；一般：31～40 分；较好：41～50 分；良好：51～60 分［4］。

1.5 统计学处理本次研究中的统计学数据均采用SPSS 22.0 软件进行处理，计量资料以均数±标准差表示，组间差异采用t检验进行分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后免疫指标比较两组患者治疗前 CD3+、CD4 +、CD4 + /CD8 +、NK细胞无明显差异（P＞0.05）；治疗后，治疗组的 CD3+、CD4 +、CD4 +/CD8 +、NK 细胞较治疗前明显升高，且明显高于对照组（P＜0.05），CD8+则明显较治疗前减低，明显低于对照组（P＜0.05），表 2。

表2 两组患者治疗前后免疫指标比较

2.2 两组患者治疗前后Th1/Th2细胞因子比较治疗前，两组患者Th1细胞因子 IFN-γ、IL-2及Th2细胞因子IL-4、IL-10水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，治疗组 IFN-γ、IL-2水平较治疗前明显升高，且明显高于对照组（P＜0.05），IL-4、IL-10水平较治疗前明显下降，且明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），结果见表3。

表3 治疗前后2组患者Th1、Th2细胞因子比较

2.3 两组患者治疗前后 QOL 评分比较治疗前两组患者QOL评分无显著差异，P＞0.05；治疗后，观察组QOL评分显著高于治疗前，对照组治疗后QOL评分也显著高于治疗前，观察组QOL评分显著高于对照组（P＜0.05），见表4。

表4 两组患者QOL评分比较

3 讨论

非小细胞肺癌是死亡率最高的恶性肿瘤之一，晚期NSCLC患者在化疗以及TKi药物治疗进展后无有效治疗方法，抗血管治疗一定程度上可以延长这部分患者生存期和生活质量。目前研究表明，抗血管药物不仅具有抗血管生成，抑制肿瘤生长作用，还具有调节机体免疫功能作用。VEGF是一种高度特异的促血管内皮细胞生长的因子，不仅在肿瘤血管生成中扮演了重要角色，而且在肿瘤免疫逃逸的多个环节中发挥重要作用。 研究表明，VEGF 影响DC细胞成熟，减弱机体免疫细胞抗肿瘤作用［1］，而且可通过诱导成熟树突状细胞（dendritic cell，DC）表达PD-L1，从而影响DC递呈抗原的功能［2］。临床试验提示抗 VEGF 治疗通过提高成熟 DC 数目及功能，从而增强抗肿瘤免疫效应［5］。李星宇等［6］研究表明，血管内皮抑素有效升高小鼠肿瘤组织内成熟DC，明显减缓肿瘤生长，有效逆转了肿瘤微环境的免疫抑制。

T淋巴细胞及其亚群、NK细胞在机体抗肿瘤免疫中起到主要作用。CD3+是成熟的 T 淋巴细胞，是细胞免疫的主要活性细胞，根据细胞分化抗原，又可以分为CD4+ 和 CD8+ 两个亚群，CD4+是诱导性/辅助性T 细胞，CD8+是抑制性/细胞毒性T细胞。在机体功能正常时，CD4+ 和 CD8+ 保持动态平衡，共同维持机体的免疫功能，而肿瘤患者的免疫功能受抑制，通常表现为 CD4+/CD8+比值降低［7］。测定CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋，能直接反映患者的细胞免疫水平。刘元伟等［8］的研究发现阿帕替尼有助于提高肝癌患者CD3+，CD4 +的表达水平。与上述研究类似，本研究也表明，安罗替尼治疗后，患者的 CD3+、CD4 +、CD4 + /CD8 +、NK细胞较治疗前明显升高，且明显高于对照组，而抑制性CD8+T细胞则明显减低，提示安罗替尼抗血管治疗后，患者免疫功能得到了改善了，增强了抗肿瘤免疫效应。

在肿瘤的发生、发展过程中，CD4+ 可被激活分化为不同亚群，主要发展为Th1和Th2两大类。Th1 细胞可分泌 IFN-γ、 IL-2 等细胞因子，可以增强杀伤细胞的细胞的毒性作用，介导细胞免疫应答［9］；Th2 细胞可分泌 IL-4、 IL-10 等细胞因子，促进抗体的产生，介导体液免疫应答［10］。Th1细胞因子有助于杀死肿瘤细胞，而Th2细胞因子则可能抑制DC细胞功能，减弱抗肿瘤免疫效应。在肿瘤患者中，常出现Th1 细胞因子水平较低，而 Th2 细胞因子水平较高，医学上称这一现象为Th1/Th2 偏移，而Th1/Th2型细胞因子失衡可影响肿瘤治疗以及预后［11，12］。本研究结果提示IL-2，IFN-γ等Th1细胞因子较安罗替尼治疗前升高，而Th2细胞因子IL-4、 IL-10较安罗替尼前明显降低。此外，一项研究也表明阿帕替尼改善肺癌患者Th1/Th2 偏移，也与我们研究类似［13］。上述结果表明，安罗替尼等抗血管药物治疗后患者Th1/Th2 偏移得到改善，免疫功能增强。

晚期肿瘤患者治疗中，生活质量是重要评价指标，QOL量表是评价癌症患者生活质量的一种良好的评价工具，得分越高提示生活质量越好。结果表明，安罗替尼治疗晚期NSCLC后QOL评分较前有显著提高，提示安罗替尼不仅改善患者免疫功能，也明显改善患者生存质量。

综上，研究表明，安罗替尼可明显改善晚期NSCLC患者的免疫抑制状态，促进CD4+，NK淋巴细胞亚群及Th1 型细胞因子的分泌，具有积极的抗肿瘤治疗作用，但是本研究仅仅为初步研究，样本量小，难免存在选择偏倚，下一步需要继续扩大样本量，进行多中心研究。