高纯氯苯甘醚含量的高效液相色谱法研究

皇甫慧君，任蕊，李丛妮,曹晨茜，2

(1.陕西省石油化工研究设计院，陕西 西安 710054；2.陕西省石油精细化学品重点实验室,陕西 西安 710054)

氯苯甘醚(chlorphenesin，CAS 104-29-0)、化学名称3-对氯苯氧基-1,2-丙二醇、氯苯甘油醚、氯酚醚、3-(4-氯苯氧基)-1,2-丙烷二醇、3-(4-氯苯氧基)-1,2-丙二醇[1]。一般常用作杀菌剂、防霉剂，广泛应用于医药、日化、精细化工产品中。在医药方面，氯苯甘醚相关制剂是抑制IgE介导的组胺释放的抗原相关的免疫抑制剂，同时氯苯甘醚也属于抗真菌药物，适用于抗真菌、细菌等。作为日化产品杀菌剂，常用于牙膏、洗发、护发、护肤、洗涤剂、香皂、肥皂产品中[1]。精细化工产品中也经常选用氯苯甘醚作为防霉剂使用。

氯苯甘醚制备工艺简单，一般基于威廉姆逊醚合成方法进行[2-3]，氯苯甘醚在化妆品中的应用研究较为广泛，分析方法多针对化妆品及日化产品中低含量组分进行研究[4-7]，对高纯氯苯甘醚含量分析方法的研究较少，本文研究出一种高纯氯苯甘醚含量的高效液相色谱分析方法，对氯苯甘醚原料生产厂家以及日化生产厂家的质量控制有一定指导意义。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

氯苯甘醚(纯度99.7%)，分析纯；氯苯甘醚样品，自制；甲醇，色谱纯；纯水。

WATERS 2695 HPLC UV检测器，带自动进样器；METTLERTOLEDO XP504电子天平；DP-360超声波溶解仪。

1.2 溶液的配制

1.2.1 标准储备溶液配制 准确称取氯苯甘醚0.100 0 g至100 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇超声溶解，放至室温后定容至100 mL，摇匀，标准储备溶液浓度为1 mg/mL。

1.2.2 系列标准溶液配制 用移液管分别量取0,2,4,6,8,10 mL标准储备溶液于50 mL容量瓶中，甲醇定容至50 mL，摇匀。配制标准溶液浓度分别为0,0.04,0.08，0.12,0.16,0.2 mg/mL。

1.2.3 样品溶液配制 称取氯苯甘醚样品0.100 0 g至100 mL 容量瓶中，加入20 mL甲醇溶液超声溶解，放至室温后定容至100 mL,摇匀。

1.3 色谱条件

UV检测器，230 nm；色谱柱为waters C18(5 μm,4.6 mm×150 mm);流动相为CH3OH∶H2O=60∶40(v/v)，流速1.0 mL/min,柱温35 ℃，进样量2 μL。

2 结果与讨论

2.1 实验条件优化与选择[8]

2.1.1 检测器及检测波长的选择 通过用紫外检测器对氯苯苷醚溶液进行扫描，在230,280 nm均出现明显吸收峰，230 nm响应值高于280 nm响应值，故选择230 nm作为检测波长。

2.1.2 流动相的选择 选取常用极性溶液甲醇和水作为流动相，分别选取CH3OH∶H2O比例70∶30,60∶40,50∶50,40∶60,30∶70进行进样分析。结果表明，在流动相CH3OH∶H2O比例为60∶40和50∶50时，峰型较尖锐，峰宽较窄，峰型较好，但60∶40时保留时间较短，出峰较快(见图1)。为提高检测效率，故选择CH3OH∶H2O比例为60∶40作为流动相。

图1 氯苯甘醚液相色谱图

2.1.3 柱温和流速的选择 在UV检测器，230 nm,CH3OH∶H2O=60∶40条件下，分别选取柱温25,35,45 ℃对样品进样，所得图形峰型变化不大，保留时间变化不大。以节能为原则，考虑到环境温度的影响，故选取35 ℃作为测量柱温。

流速1.0 mL/min时，氯苯甘醚即可较快出峰，保留时间较短，峰型较好，故选取流速1.0 mL/min。

2.2 方法验证

2.2.1 线性相关性 以浓度分别为0,0.04,0.08，0.12,0.16,0.20 mg/mL的系列标准溶液在上述色谱条件下进样，分别以标准溶液浓度和所测峰面积为x轴和y轴，绘制标准曲线，见图2。

由图2 可知，所得线性回归方程为y=3E+07x-65 117,R2=0.995 3。且在0～0.2 mg/mL浓度范围内，氯苯甘醚峰面积与浓度线性关系良好。

图2 线性关系曲线

2.2.2 加标回收率 取氯苯甘醚样品溶液6份，分别加入氯苯甘醚浓度为1.029 mg/mL的标准液0.5，1,2,3,4,5,6 mL，按前述色谱条件，对各加标溶液进样，按照式(1)计算加标回收率，结果见表1。

表1 加标回收率

×100%

(1)

式中c2——加标后所测试样浓度，mg/mL；

v0——加标液体积,mL；

c1——试样浓度，mg/mL；

m0——加标量,mg。

由表1可知，各试样加标回收率均在95%～105%内，符合加标回收率误差范围，准确度较高。

2.2.3 精密度 依据上述标准曲线测氯苯甘醚样品纯度，利用样品纯度计算标准偏差与相对标准偏差[9]，结果见表2。

表2 精密度测定结果

(2)

(3)

由表2可知，标准偏差为0.032 13，相对标准偏差为0.324‰，相对标准偏差较小，表明该方法精密度较高。

3 结论

使用高效液相色谱对高纯氯苯甘醚进行含量分析时，在UV检测器，230 nm，C18色谱柱，流动相为CH3OH∶H2O=60∶40，流速1.0 mL/min,柱温35 ℃条件时，氯苯甘醚浓度在0～0.2 mg/mL范围内，线性关系良好，加标回收率在95%～105%范围内,相对标准偏差在0.324‰，对氯苯甘醚进行分析准确度较高，精密度较好。