食品及饲料中动物源性成分检测方法及标准概述

□ 刘彦泓 大连市检验检测认证技术服务中心

随着人们生活水平的不断提高，越来越多的肉类制品被摆上了餐桌。为了利益最大化，有不发商贩掺假销售，更有甚者把不可食用动物的肉添加到商品中出售，严重损害消费者利益。同时，动物源性饲料中违规掺杂禁用成分的情况也很严重。如果动物源性饲料细菌超标或者违法添加了禁用物质，就有可能使饲养的禽畜生病，甚至导致食用者患病。为了保障人们的食品安全，保障动物源性饲料的质量安全，对肉类食品及饲料进行动物源性鉴定是非常必要的。

1 动物源性成分检测技术研究进展

有资料表明20世纪80年代，国外学者开始研究肉的种属鉴定检测，到目前为止国内外均由很多相关报道。其中国内外动物源性成分检验方法主要有两种：核酸检测和蛋白质检测。核酸检测方法主要包括普通PCR、实时荧光PCR、数字PCR、环介导等温扩增（LAMP）、重组酶介导链替换核酸扩增法（RAA法）、试纸片法、基因芯片检测、膜芯片法、液相芯片法、显微镜法与二代测序等。每一种检测方法都有各自的特点及优势，可以从不同方面反映材料的真实情况。在实际检测工作中，由于食品或原材料的加工方法不同，还应根据样品的不同加工方式选择适用的检测方法进行检测。众多的研究资料表明最为快速准确的方法是PCR方法[1]，其中探针法实时荧光PCR检测的准确性和便捷性在所有的检测方法中最为突出，对检测设备和检测人员的要求也不高，容易掌握。目前现行有效的检测方法中以实时荧光PCR方法最多。

2 现行动物源性成分检测标准方法

目前，我国已发布的现行有效的动物源性成分检测方法主要有：国家标准18项（表1），行业标准35项（表2），地方标准及其他标准20项（表3）。其中以PCR和实时荧光PCR检测方法为主。这些标准方法可以检测出不同种类的动物源性成分，适用范围也各不相同，检测人员可以根据需求自主选择。目前颁布的这些标准方法基本涵盖了常见的动物源性成分，可以检测日常食品及饲料中可能会遇到的肉源性种类。

表1 动物源性成分检测方法（国家标准）

表2 动物源性成分检测方法（行业标准）

表3 动物源性成分检测方法（地方标准及其他标准）

3 讨论与建议

目前我国现行的动物源性成分的检测方法以普通PCR方法和实时荧光PCR检测方法为主。对于动物源性检测，最常采用的就是PCR检测方法。实时荧光PCR检测的优势就是灵敏度高，能够减少工作量、缩短检测时间[2]，因此目前发布的检测标准方法以实时荧光PCR检测方法为主。由于食品及饲料在加工过程中可能经过高温或油炸等处理，样品的总DNA结构被破坏，因此检测时一般选择短片段进行鉴定检测[3—4]。在日常检测时，容易形成气溶胶污染环境，导致实验结果出现假阳性。为避免出现气溶胶污染，需要检测人员特别注意质量控制，做好阴性、阳性、空白对照。3种对照应该至少2个平行，并且空白对照应该包括样品DNA提取空白对照和PCR过程空白对照，任何一个对照结果不正常均需要重新实验。同时也要特别注意实验室的日常清洁，有条件的实验室可将摆放PCR扩增仪的房间设计成负压实验室，有效避免高浓度的气溶胶泄漏。另外在实验过程中实验人员应时刻注意避免溶剂喷溅、气溶胶等造成的污染。