实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA和乙肝病毒标志物的价值

滕振平

【摘 要】目的：应用RT-PCR法检测HBV-DNA、HBV-M，分析其应用价值。方法：选取2018年1月-2019年12月，在我院治疗的70例乙肝患者，所有患者均应用RT-PCR法检测HBV-DNA、HBV-M。结果：不同HBV-M模式下的RT-RCR阳性率分别为95.83%、66.67%、33.33%、0、75%，其中，检测大三阳的RT-RCR阳性率最高，差异明显（P<0.05）;大三阳的HBV—DNA水平最高，明显高于其他模式（P<0.05）。结论：RT-PCR法可提高HBV检测阳性率，可作为临床治疗及预后评估提供指导。

【关键词】乙肝;DNA;RT-RCR法

【中图分类号】R446      【文献标识码】 A 【文章编号】1002-8714（2020）08-0112-01

乙肝病毒DNA（HBV-DNA）及乙肝病毒标志物（HBV-M）是目前诊断乙肝的重要指标，血清学检验虽然能够判断HBV-DNA性质，但无法定量检验。实时荧光PCR检验（RT-PCR）可实现相对量化，为HBV复制的临床判断提供依据。本文将应用RT-PCR法检测HBV-DNA、HBV-M，分析其应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取2018年1月-2019年12月，在我院治疗的70例乙肝患者，所有患者均已确诊为乙肝，近期内未接受抗病毒治疗，自愿入组配合研究。其中，男性43例，女性27例，年龄23～59岁，平均（36.78±4.34）岁。

1.2方法

所有患者均于采集空腹静脉血5ml，离心分离后送实验室检测，定性检测采取ELISA法，检测顺序为HBsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb、HbcAb，严格按照试剂盒说明书完成检测。定量检测采取RT-PCR 法，使用仪器为达安DA7600检测仪。取血清样本200μL，与DNA提取液450μL混合，使用温育器预热，温度100℃，时间10min。随后使用冰冻离心机离心操作，转速1200，操作5 min，取上层清液20μL置入PCR管，使用仪器检测。

1.3评价标准

分析不同HBV-M模式下检测情况以及HBV-DNA含量分布。

1.4统计学方法

采取SPSS22.0进行数据处理，计数资料、计量资料常采取（%）、（-x±s）表示，采取X2、t检验。P<0.05表示差异，有统计学意义。

2 结果

2.1不同HBV-M模式下检测情况

大三阳的RT-RCR阳性率最高，明显高于其他模式（P<0.05），见表1。

2.2不同模式HBV—DNA含量分布

大三阳的HBV—DNA水平最高，明显高于其他模式（P<0.05），见表2。

3 讨论

乙型肝炎是一种高发的传染病，据相关统计，全世界范围内，每年死于乙肝的患者在100万以上，慢性乙肝携带者约为10%，且在急性乙肝患者中，20%以上可转为慢性乙肝，并逐渐发展为肝硬化、肝癌[1]。为改善患者预后，早期准确诊断非常重要，但由于乙肝类型相对复杂，因此很难准确判断HBV感染复制情况，漏诊风险较高。研究发现，在ELISA检测的同时，联合应用RT-PCR法检测，可提高诊断准确率[2]。

在本次研究中，不同HBV-M模式下的RT-RCR阳性率分别为95.83%、66.67%、33.33%、0、75%，其中，檢测大三阳的RT-RCR阳性率最高（P<0.05），且大三阳的HBV—DNA水平最高，明显高于其他模式（P<0.05），提示RT-RCR检测可反映HBV—DNA水平，同时可联合ELISA，对HBV-M类型进行判断，两者联合应用，对临床诊疗及用药具有重要意义。RT-RCR是一种病原学检测技术，可直接反映HBV—DNA水平，具有较高的灵敏度及特异度，可反映病毒的传染性及复制状况。但由于非复制状态下，RT-RCR的反映较弱，因此，联合ELISA检测准确度更高。

综上所述，RT-PCR法可提高HBV检测阳性率，可作为临床治疗及预后评估提供指导。

参考文献

[1] 姚兆基.实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA和乙肝病毒标志物的价值[J].内蒙古医学杂志，2017，49（4）：485-486.

[2] 陈艳.实时荧光PCR检验用于乙肝病毒DNA检测的临床价值[J].临床研究，2018，26（10）：146-148.