盐酸氨溴索胶囊体外溶出度试验和生物等效性研究

毕德忠

摘 要 目的：研究盐酸氨溴索胶囊的体外溶出度试验和生物等效性相关性。方法：测定自制制剂在不同溶出介质中的累积溶出度，并进行生物等效性研究，考察处方工艺的合理性和溶出曲线的相似性。结果：经过处方和工艺优化后制得的自制制剂能够符合既定质量标准要求，空腹和餐后生物等效性与参比制剂一致。结论：盐酸氨溴索胶囊体内外试验呈现与参比制剂一致性，建立的制剂新工艺可适应工业化生产。

关键词 盐酸氨溴索 处方工艺 溶出曲线 临床试验

中图分类号：R974.1； R945 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2020）15-0086-04

In vitro dissolution test and bioequivalence study of ambroxol hydrochloride capsules

BI Dezhong*

（Shanghai Xinyi Tianping Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 201108， China）

ABSTRACT Objective： To study the correlation between in vitro dissolution and bioequivalence of ambroxol hydrochloride capsules. Methods： The cumulative dissolution of the home-made preparation in different dissolution media was determined and the bioequivalence was studied to investigate the rationality of the prescription process and the similarity of the dissolution profile. Results： Home-made preparations prepared after the optimization of prescription and process were able to meet the requirements of the established quality standards and the fasting and postprandial bioequivalence was consistent with the reference preparation. Conclusion： Home-made ambroxol hydrochloride capsules showed consistency with the reference formulation in vitro and in vivo， and the new formulation process established can be adapted to industrial production.

KEY WORDS ambroxol hydrochloride； formulation process； dissolution profile； clinical trial

盐酸氨溴索为盐酸溴己新的体内活性代谢物，是新一代黏痰溶解剂，临床用于伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的各種急慢性呼吸道疾病的祛痰治疗，特别是对慢性支气管炎的祛痰治疗，可显著改善排痰和呼吸状况[1]。盐酸氨溴索可提高肺部功能指标，病人的咳嗽、呼吸不能、肺部啰音等症状也有明显好转，它比N-乙酰半胱氨酸和盐酸溴己新等起效快[2]。

盐酸氨溴索在常见呼吸道疾病的化痰和排痰治疗中应用广泛，近年来的研究又发现大剂量盐酸氨溴索具有特殊的肺部保护功能，在慢性阻塞性肺疾病、呼吸窘迫综合征尤其是新生儿呼吸窘迫综合征等严重肺部疾病的治疗以及危重患者术后肺部并发症的预防中取得了较好的疗效[3]。

目前，2015年版《中国药典》收载的盐酸氨溴索剂型有口服溶液、片剂、注射液、胶囊、缓释胶囊和糖浆6种。现今临床使用较多是盐酸氨溴索片，对盐酸氨溴索胶囊及其他剂型的药学及临床研究相对较少。本研究采用经过完整溶出度方法学试验后的标准，对参比制剂和产业化自制品进行了不同溶出介质的研究，同时进行了人体餐前、餐后生物等效性试验，结果表明盐酸氨溴索胶囊和参比制剂具有相同的疗效。

1 材料和方法

1.1 试药和试剂

盐酸氨溴索（山东罗欣药业集团股份有限公司）；乳糖（上海华茂药业有限公司）；预胶化淀粉（上海卡乐康包衣技术有限公司）；聚维酮K30（BASF公司）；硬脂酸镁（海盐六和药业有限公司）；盐酸氨溴索胶囊（上海信谊天平药业有限公司）；盐酸氨溴索片参比制剂（Sanofi-Aventis France公司）；盐酸氨溴索对照品（批号100599-201604，中国食品药品检定研究院）。

盐酸、醋酸钠、磷酸二氢钾、氢氧化钠、磷酸、乙腈（国药集团化学试剂有限公司）。

1.2 仪器

1200 series高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；FADT-801RC溶出度仪（上海富科思公司）；XPE205电子天平（梅特勒公司）；HLSG220B湿法混合制粒机（北京航空制造工程研究所）；FL-120沸腾干燥机（重庆广厦干燥设备工程公司）；NJP2200全自动硬胶囊填充机（浙江飞云科技有限公司）。

1.3 累积溶出度测定

根据国内外盐酸氨溴索制剂溶出曲线测定方法[4-7]，以及完整的方法学研究结果，确定溶出曲线测试条件：按照中国药典2015年版四部溶出度与释放度测定法第一法（0931），采用0.1 mol/L盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐溶液、pH 6.8磷酸盐溶液和水四种介质进行溶出度试验，按照f2相似因子法或15 min溶出度应均大于85%进行判定。

1.4 HPLC测定

色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（4.6 mm× 250 mm，5 mm）；流动相为0.01 mol/L磷酸氢二铵（用磷酸调节pH 7.0）-乙腈（50∶50）；检测波长248 nm；流速1.0 ml/min；柱温25 ℃；进样体积20 ml。对照品溶液浓度为0.033 mg/ml，按外标法以峰面积计算含量。

1.5 处方和工艺筛选

1.5.1 原料药的理化特性确认

本品为口服固体制剂，湿法制粒工艺中涉及到高温高湿条件，对可能影响制剂质量的原药特性进行确认，结合相关试验对本品溶解度、PKa、粒度分布和晶型等进行确认。

1.5.2 辅料选择

参考参比制剂说明书、原辅料相容性试验及公司实际生产经验，确定采用稀释剂乳糖、崩解剂预胶化淀粉和粘合剂聚维酮K30为主要辅料，并以参比制剂的溶出曲线为评价指标进行处方筛选与考察。

1.5.3 制粒正交试验设计

制剂工艺采用国内较为常用的湿法制粒工艺，即三相搅拌制粒和沸腾干燥工艺。为确保产业化过程中装量差异和含量均匀度符合药典规定，需进行搅拌速度、制粒速度和加浆量三者关系的进一步试验。具体操作为按照正交设计要求，加入原辅料后，按照各工艺因素水平要求（表1），开启搅拌开关，加入粘合剂后，开启制粒开关进行制粒，获得合适的湿颗粒。

1.6 生物等效性试验

以指定的盐酸氨溴索片为参比制剂、自制盐酸氨溴索胶囊为受试制剂，通过单中心、随机、开放、单次给药、两周期和双交叉临床研究方法来评价两种制剂的人体生物等效性[8-9]，总共计划入组48例受试者（空腹和餐后各24例）。根据相关指导原则[10-12]以及参比制剂与自制制剂的药品说明书的相关内容，采用液质色谱联用检测法测定血浆中氨溴索的药物浓度。

2 结果

2.1 处方和工艺筛选

2.1.1 原料药的理化特性确认

盐酸氨溴索BCS分类为Ⅰ类，PKa为8.03，在水中略溶解，在pH 1.0～8.0范围内其溶解度为17～30 mg/ml，无明显pH依赖性。按最大规格30 mg计算，属于高溶解性药物。基于相关试验及特性，盐酸氨溴索原料药的粒径分布在74～245 mm对制剂无直接影响。经X射线-粉末衍射测定，确认本品原料药晶型与参比制剂完全一致，且多批次原料药晶型相同。通过影响因素试验，确认原料药晶型具有良好的稳定性，在制剂生产过程中不会发生晶型变化。

2.1.2 辅料选择

乳糖在本品中用作稀释剂，其粒度分布可能对制剂的含量均匀度与溶出产生影响，通过试验发现于粒径245 mm粉碎后的乳糖，对制剂含量均匀度与溶出无较大影响；预胶化淀粉采用直接内加法，聚维酮K30水溶液作为粘合剂时，加入速度不宜过快；考虑到硬脂酸镁具有较强疏水性的特点，对用量在0.25%～1.0%范围内进行了溶出度研究，结果表明该用量范围对溶出度影响不明显，同时硬脂酸镁用量在0.5%时，颗粒流动性已可满足胶囊灌装的需要，故拟定硬脂酸镁的用量为0.5%。

2.1.3 制粒工艺

以与参比制剂溶出曲线相似性为目标，同时为确保产业化过程中装量差异和含量均匀度符合药典规定，产业化过程中进行了搅拌速度、制粒速度和加浆量的正交试验。正交试验初步溶出度（pH 6.8磷酸鹽缓冲溶液）结果显示，当采用2.5%的聚维酮K30浆液、搅拌转速设定为120 r/min、制粒转速设定为1 400 r/min的样品溶出度与原研制剂最为接近。粘合剂用量在7.5%时，制粒得的颗粒偏湿，对溶出度有较大影响（表2）。

综合上述试验结果，确定A3B1C3为最佳方案，新处方为乳糖（稀释剂）、预胶化淀粉（崩解剂）、聚维酮K30（粘合剂浆液浓度为2.5%）、硬脂酸镁（润滑剂）。确定的新工艺采用三相湿法制粒（搅拌转速：120 r/min；切割转速：1 400 r/min）进行制备三批样品（批号：Z180501、Z180502、Z180503），质量评价表明均符合相关质量标准要求（表3）。

2.2 自制和参比制剂累积溶出曲线比较

5 min时间点自制制剂在四种介质中的累积溶出度均略低于参比制剂，原因是自制制剂为胶囊剂，胶囊壳的溶解需约2～3 min，相对参比片剂的快速崩解有一定延迟；但15 min时两者在四种介质中的累积溶出度均大于85%（图1）。根据有关要求[13]，判定自制和参比制剂体外溶出行为相似。

2.3 生物等效试验

在空腹条件下共筛选68例受试者，入选24例受试者，23例参与研究给药，1例受试者未参与给药。23例受试者完成两个周期给药研究。

在餐后条件下共筛选68例受试者，入选24例受试者参与给药研究，2例受试者在第2周期入住当天自行退出研究，共22例受试者完成两个周期给药研究。

结果表明，口服氨溴索胶囊与参比制剂在空腹和餐后给药时具有生物等效性（表4～5，图2）。

3 讨论

采用经过优化的处方和工艺制备的三批样品，从根本上改善了原处方中采用淀粉浆为粘合剂制得颗粒，对产品溶出曲线的影响，改变了原质量标准中采用单一介质、单一时间溶出度测定法，来判断产品溶出行为的优劣，对改进的样品进行了多种溶出介质的全面研究，并通过体内生物利用度进行了验证。后续还将对制剂处方和工艺进一步进行深入研究，提高自制品与参比制剂在空腹生物等效性试验中Cmax值的接近程度。未来上市后的产品也可采用溶出曲线来评价工艺执行和偏离程度，以进一步保证人民用药安全和用药有效。

参考文献

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[3] 杨静， 宋超. 盐酸氨溴索的临床合理使用[J]. 中国药房， 2012， 23（28）： 2683-2685.

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[12] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典2015年版四部[M]. 北京： 中国医药科技出版社， 2015： 363-368.

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