实时荧光核酸恒温扩增技术检测泌尿生殖道生殖支原体感染的临床效果*

钟继生，曾 云，张丽雅

广东省惠州市第二妇幼保健院检验科，广东惠州 516001

生殖支原体是一种体积极其微小且需要存在于人类和动物体内的寄生微生物，它可以进行自我复制、繁殖。生殖支原体感染可引发多种泌尿疾病，其中前列腺炎、宫颈炎、子宫内膜炎、盆腔炎、尿道炎、男女性不育都可由生殖支原体感染所引起[1-3]。由于生殖支原体对体外培养的环境要求较高，适合生活在37 ℃左右的无氧培养皿中，若培养皿中的环境不符合生殖支原体繁殖生长，其结合会缺乏特异性和灵敏性[4-6]。实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)检测是一种可以将实时荧光检测与核酸恒温扩增技术相结合的检测方法，这种方法具有灵敏度高、特异度强等优点，在泌尿生殖道、呼吸道病原体及肠道病毒检测中应用比较广泛[7-9]。本文特选取在男科、妇科、性病科采用SAT检测进行泌尿生殖道生殖支原体感染的5 189例患者，观察其临床效果，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2019年1-12月在男科、妇科、性病科进行泌尿生殖道生殖支原体感染检查的患者5 189例为研究对象。其中采集女性患者标本2 561例，年龄16～71岁，平均(36.89±10.28)岁；男性患者标本2 628例，年龄18～74岁，平均(39.12±11.23)岁。在5 189例患者中，采集尿液标本患者3 162例，采集分泌物标本患者1 967例，采集尿液和分泌物共同标本的患者60例。将标本采用SAT检测是否患有生殖支原体感染，同时进行沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲脲原体等病原体的检测。

1.2标本采集及处理 采集尿液标本：将患者睡醒后清晨的首次尿液或者长时间憋尿的首次尿500 μL,与500 μL尿液保存液混合保存成标本，并做好记录。采集分泌物标本：医护人员选取干净的医用棉签放入男性尿道1 ～2 cm或女性宫颈口中旋转1周,停留10 s后取出;将拭子头放入1 mL生理盐水中浸泡，贴管壁挤干后取出;取0.5 mL浸泡液加入0.5 mL尿样保存液混匀作为待测标本,并做好记录。标本处理按照试剂盒说明书操作(凯普生物科技有限公司提供)。

1.3标本检测 尿液及分泌物标本的支原体感染、沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲脲原体均采用SAT法检测,荧光PCR仪为ABI7500型,支原体感染、沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲脲原体核酸检测试剂盒均购自上海仁度生物科技有限公司。按照试剂盒和仪器操作说明书进行操作,扩增条件为42 ℃ 1 min,40个循环，荧光素通道设定为FAM,dt值≤35判断为阳性，对于分泌物和尿液检查结果不一致时，以阳性结果为最终结果。

2 结 果

2.1男、女患者支原体感染情况比较 在男科、妇科、性病科进行泌尿生殖道生殖支原体感染检查的5 189例患者中，有267例患者检查结果呈阳性，阳性率为5.14%。男性患者阳性率为7.19%(189/2 628),女性患者阳性率为3.05%(78/2 561)，男性患者阳性率明显高于女性患者，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2不同标本的检测结果比较 在5 189例患者中，采集尿液标本患者3 162例，检查结果为阳性192例，阳性率为6.07%；采集分泌物标本患者1 967例，检查结果为阳性74例，阳性率为3.76%；采集尿液和分泌物共同标本60例，所有检测结果均一致，其中阳性患者1例，一致性为100%。

2.3支原体感染合并其他病原体情况 在267例检查结果呈阳性的支原体感染患者中，男性患者189例，其中有121例为单纯支原体感染患者，女性患者78例，其中有19例为单纯支原体感染患者，男性单纯支原体感染率大于女性(P<0.05)。支原体与解脲脲原体合并感染率最高，且女性感染率高于男性，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 支原体感染合并其他病原体情况[n(%)]

2.4支原体感染在不同年龄段比较 在267例支原体感染的患者中，年龄≤20岁的患者感染率最高，其次是>20～30岁年龄段，随着年龄的增长，支原体感染率也随之降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 支原体感染在不同年龄段的比较

3 讨 论

支原体感染主要是通过性行为进行传播，少数还可通过母婴传播。本次研究选择在门诊就诊进行生殖支原体感染检查的患者为研究对象。

经研究表明，在男科、妇科、性病科进行泌尿生殖道生殖支原体感染检查的5 189例患者中，有267例患者检查结果呈阳性，阳性率为5.14%，其中男性患者阳性率为7.19%,女性患者的阳性率为3.05%，男性患者阳性率明显高于女性患者；在5 189例患者中，采集尿液标本的患者阳性率为6.07%，采集分泌物的患者阳性率为3.76%，采集尿液和分泌物共同标本患者一致性为100%。在267例检查结果呈阳性的支原体感染患者中，男性单纯支原体感染率大于女性。支原体与解脲脲原体合并感染率最高，且女性感染率高于男性。在支原体感染的患者中，年龄≤20岁的患者感染率最高，随着年龄的增长，支原体感染率也随之降低。以上结果说明在患者体内解脲脲原体的感染率高于其他病原体的感染率，在女性患者体内受解脲脲原体感染的可能性较大。解脲脲原体可分为非致病性菌群和致病性菌群两种。随着年龄的不断增长，受支原体感染的感染率也逐渐下降，受支原体感染强度最大的年龄在≤30岁的患者体内，由于患者年龄越低性活跃度越高，受感染的程度也随之增加，随着年龄的增长，性活跃度随之降低，感染的可能性也随之降低，说明生殖支原体感染的传播主要是通过性行为进行传播，与性行为的活动频率有着密切的关系[10-11]。

综上所述，采用SAT检测泌尿生殖道生殖支原体感染的一致性较高，有较好的临床效果，值得广泛推广。