地榆洗剂冷湿敷对急性湿疹模型皮损组织CGRP含量及组织炎症的影响

王一鑫 贾淑琳 吴静 王随天 杨嘉裕 赵雅梅

【摘要】 目的 探讨地榆洗剂冷湿敷对急性湿疹模型皮损组织降钙素基因相关肽（CGRP）含量及组织炎症的影响。方法 采取2， 4-二硝基氯苯法建立60只豚鼠急性湿疹模型， 根据用药方案不同分为观察组与对照组， 各30只。观察组使用地榆洗剂冷湿敷治疗， 对照组使用3%硼酸洗液湿敷。比较两组的疗效、皮损变化以及治疗前后的炎性细胞计数变化、皮损组织CGRP含量变化。结果 观察组治疗总有效率为90.00%， 明显高于对照组的66.67%， 差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后， 观察组红斑、丘疹、表皮脱落、苔藓化评分分别为（0.78±0.32）、（0.35±0.10）、（0.72±0.27）、（0.32±0.08）分， 明显低于对照组的（1.75±0.39）、（1.67±0.41）、（1.42±0.33）、（1.50±0.27）分， 差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后， 观察组单核细胞计数、多形核细胞计数、淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞计数分别为（18.11±1.21）、（38.32±3.65）、（41.49±20.62）、（35.31±12.96）×109/L， 明顯低于对照组的（39.43±1.35）、（61.68±3.92）、（79.68±20.27）、（53.78±16.59）×109/L， 差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后， 观察组皮损组织CGRP含量为（141.36±9.87）ng/L， 对照组皮损组织CGRP含量为（197.28±10.37）ng/L， 两组皮损组织CGRP含量均较治疗前降低且观察组低于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 地榆洗剂冷湿敷对急性湿疹模型有良好的治疗效果， 能有效减轻皮损症状， 抑制皮损内炎症反应， 提高皮损内CGRP含量， 具有积极的临床意义。

【关键词】 急性湿疹模型;地榆洗剂;冷湿敷;皮损组织降钙素基因相关肽含量;组织炎症

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.21.092

湿疹是一种常见皮肤病， 其发病机制尚未明确， 发病与生活环境、遗传、自身免疫、工作压力等密切相关， 常反复发作， 较难治愈。急性湿疹皮损特点为明显红斑、不同程度水肿、丘疹、水疱、糜烂、渗出， 常以数种形态同时存在[1]。中医认为， 本病的发病有内因、外因两方面， 外感风、湿、热、毒等邪气， 内由禀赋不足、脏腑功能失衡， 内外合邪导致发病。由于湿邪是发病的首要病因， 因此， 治疗的关键在于祛湿。根据外用药物使用原则， 西医在急性湿疹的外治方面， 皮损渗出明显的最常用硼酸洗液湿敷， 用药相对局限， 红斑、丘疹为主的可外用糖皮质激素软膏等。临床研究显示[2]， 炎症反应在本病的发生发展过程中有重要作用， 对病情的进展其促进作用。CGRP是一种感觉神经元释放肽类物质， 有显著抗炎效果， 能够抑制T淋巴细胞的增殖， 并抑制炎性因子的释放， 调节炎症反应[3]。本研究选用豚鼠急性湿疹模型， 给予地榆洗剂冷湿敷， 分析对皮损组织CGRP含量及组织炎症的影响， 以此评估疗效， 现具体汇报如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 采取2， 4-二硝基氯苯法建立60只豚鼠急性湿疹模型， 根据用药方案不同分为观察组与对照组， 各30只。观察组雌雄比1∶1， 体重250～350 g;对照组雌雄比1∶1， 体重250～350 g。所有豚鼠均由动物实验中心提供， 实验过程中严格遵守动物实验的3 R原则。

1. 2 方法

1. 2. 1 动物模型建立方法 将60只豚鼠在实验前1天在腹部剃毛， 大小约2.5 cm×2.5 cm， 涂抹5%的2， 4-二硝基氯苯溶液50 μl， 第2天再强化涂抹1次， 第3天在右耳背部剪毛， 并涂抹5%的2， 4-二硝基氯苯溶液10 μl， 之后每隔3 d激发1次， 共激发4次， 使耳部皮肤出现弥漫性水肿性红斑、伴散在丘疹， 有鳞屑、血痂等形成， 视为急性湿疹造模成功[4]。

1. 2. 2 治疗方法 两组均于末次激发1 d后进行给药治疗， 连续治疗20 d后处死豚鼠。对照组使用3%硼酸洗液湿敷， 30 min/次， 2 次/d。观察组使用地榆洗剂， 药物组成：地榆、马齿觅、苦参、黄柏各30 g， 煎煮后浓缩备用， 用药前用蒸馏水稀释成3%浓度后用无菌纱布浸湿湿敷皮损处， 用胶带固定， 冷湿敷30 min/次， 2 次/d。在停药24 h内用颈椎脱臼法处死豚鼠， 剪下右耳， 检测各项指标。

1. 3 观察指标及判定标准 ①根据皮损评分减分率判断疗效：临床痊愈：皮损完全消失， 皮损积分减分率≥95%;显效：皮损大部分消失， 皮损积分减分率70%～94%;有效：皮损小部分消失， 皮损积分减分率40%～69%;无效：皮损无明显改善， 皮损积分减分率<40%[5]。总有效率=（临床痊愈+显效+有效）/总例数×100%。②采用湿疹面积及严重度指数皮损评分法评估症状变化， 包括红斑、丘疹、表皮脱落和苔藓化4项， 每项0～3分， 共4个等级， 0分为无症状， 1分为轻度， 2分为中度， 3分为重度[6]。③测定皮损组织中炎症因子水平， 取耳中部组织块， 石蜡包埋切片， 常规苏木素-伊红染色， 在显微镜下用微尺以单盲法计算每平方毫米单核细胞计数、多形核细胞计数、淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞计数， 取平均值[7]。④测定皮损组织中CGRP含量， 取耳中部组织块， 按比例加入冷冰醋酸液， 在100℃水浴中煮10 min， 之后制成匀浆， 离心后滴入酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒， 使用酶标仪测定。

1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组临床疗效比较 观察组治疗总有效率为90.00%， 明显高于对照组的66.67%， 差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 两组治疗前后皮损评分比较 治疗前， 两组红斑、丘疹、表皮脱落、苔藓化评分比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后， 观察组红斑、丘疹、表皮脱落、苔藓化评分分别为（0.78±0.32）、（0.35±0.10）、（0.72±0.27）、（0.32±0.08）分， 明显低于对照组的（1.75±0.39）、（1.67±0.41）、（1.42±0.33）、（1.50±0.27）分， 差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2. 3 两组治疗前后组织炎症反应比较 治疗前， 两组单核细胞计数、多形核细胞计数、淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞计数比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后， 观察组单核细胞计数、多形核细胞计数、淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞计数分别为（18.11±1.21）、（38.32±3.65）、（41.49±20.62）、（35.31±12.96）×109/L， 明显低于对照组的（39.43±1.35）、（61.68±3.92）、（79.68±20.27）、（53.78±16.59）×109/L， 差異有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2. 4 两组治疗前后皮损组织CGRP含量比较 治疗前， 两组皮损组织CGRP含量比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后， 观察组皮损组织CGRP含量为（141.36±9.87）ng/L， 对照组皮损组织CGRP含量为（197.28±10.37）ng/L， 两组皮损组织CGRP含量均较治疗前降低且观察组低于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。见表4。

3 讨论

中医并无急性湿疹病名， 一般将其归为“湿疮”、“浸淫疮”等范畴， 由素体禀赋不耐， 又感受湿热外邪， 两邪相搏于肌肤， 导致肌肤气血不和、腠理不舒， 患处皮肤红肿热痛， 发为本病。又因湿性重浊黏滞， 若未得到及时治疗， 可使病情缠绵不愈， 反复发作， 较难治愈[7， 8]。因此， 本病的主要病因病机为湿热外侵， 治疗当以清热利湿为主。

遵循中医的“外治之理， 即内治之理， 外治之药， 即内治之药。”的理论， 本研究选用地榆洗剂进行局部治疗， 使用冷湿敷的方法， 增强清热之力[9]。方中以地榆为君药， 具有凉血止血、杀菌消炎、止痛止痒之效;现代药理显示， 其内含有草酸钙， 经高温煎煮后可形成可溶性钙盐， 抑制毛细血管渗出， 同时还含有鞣质， 能在皮损表面形成保护膜， 促进炎症的吸收， 避免外界环境的影响， 加快皮损修复和愈合[10]。苦参、黄柏为臣药， 能增强清热解毒、燥湿止痒之力， 具有良好的消炎杀菌效果， 苦参碱能减少过敏介质的释放， 抑制皮肤的过敏反应并减轻皮损处炎症反应;马齿觅为佐药， 能清热、解毒、消肿， 也有良好的抗菌消炎效果， 能抑制毛细血管通透性， 减少炎性渗出。全方共奏清热、利湿、祛风、止痒、消肿等功效。

西医理论认为本病是由体内外激发因子引发的皮肤变态反应。机体接触过敏原后， 记忆T淋巴细胞促使机体发生致敏反应， 当再次接触过敏源后， 毒性的记忆T淋巴细胞从体内游走到体表， 导致皮肤局部发生炎症反应[11]。同时T淋巴细胞诱导其他细胞发生炎症反应， 促使肥大细胞的增生分化。在多种炎症细胞的作用下， 毛细血管扩张， 局部发生红肿热痛和渗出。

CGRP在体内广泛存在， T淋巴细胞上存在CGRP受体， CGRP能增加细胞内CAMP水平， 抑制自然杀伤细胞的活性， 同时可调节巨噬细胞对激活因子的反应， 还可传递抗原， 具有潜在的免疫调控作用。临床研究显示[12]， 湿疹患者体内的CGRP水平明显低于健康人， 疾病加重期更低， 而疾病缓解期有所升高。这说明CGRP与机体炎症反应呈反比， 能够抑制炎症反应， 调节机体免疫。

本研究结果显示， 观察组治疗总有效率为90.00%， 明显高于对照组的66.67%， 差异有统计学意义（P<0.05）。

治疗后， 观察组红斑、丘疹、表皮脱落、苔藓化评分明显低于对照组， 差异有统计学意义（P<0.05）。观察组单核细胞计数、多形核细胞计数、淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞计数明显低于对照组， 差异有统计学意义（P<0.05）。两组皮损组织CGRP含量均较治疗前降低且观察组低于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。充分证明地榆洗剂冷湿敷对急性湿疹模型有确切的治疗作用， 显著降低了炎症反应程度， 升高了皮损组织CGRP含量。

综上所述， 地榆洗剂冷湿敷对急性湿疹模型皮损组织CGRP含量及组织炎症有积极的影响， 通过抑制炎症、调节免疫达到提升疗效、缓解症状的目的， 值得在临床推广使用。

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[收稿日期：2020-02-24]