Gli-1蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义

吴 刚

（四川大家医学检验中心病理科，四川 成都 610000）

宫颈癌是发生于女性生殖道的恶性肿瘤，其发病率仅次于乳腺癌。关于乳腺癌的发病机制较为复杂，病毒感染、性行为过早、多产多孕、吸烟等都可以是其病因，但是高危人乳头瘤病毒（HPVs）持续感染是其最重要的独立危险因素之一。然而此类病毒在入侵人体后可停留在表皮和粘膜组织中而不产生相关的病毒血症，因而高危HPVs感染早期通常没有明显症状，而在患者发现时往往已经进入宫颈癌中晚期[1]。同时单纯的HPVs感染并不会直接导致，其他多种因素的共同作用才是宫颈癌发生和发展的原因[2]。本病主要采用手术和放疗为主、化疗为辅的治疗方案，但是早发现、早治疗是预防和消灭宫颈癌的重要措施，因而对与宫颈癌诊疗有关因素的研究引起了广泛的关注。相关研究显示Hedgehog信号传导通路与宫颈癌、胃癌等的发生有密切关系，其中胶质瘤相关癌基因蛋白1（Gli-1）是该通路下游的转录调控因子之一[3]。本研究收集本院妇产科手术中切除的宫颈组织共143例，其中正常宫颈组织33例，子宫颈鳞状细胞癌组织78例，宫颈上皮内瘤变（CIN）32例，通过免疫组化SP技术对不同宫颈组织中Gli-1蛋白的表达情况进行分析，探讨Gli-1蛋白在宫颈癌中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集本院2014年2月～2019年1月妇产科手术中切除的宫颈组织共143例，其中正常宫颈组织33例，子宫颈鳞状细胞癌组织78例，宫颈上皮内瘤变（CIN）32例，依次分为正常组（n=33）、宫颈癌组（n=78）和CIN组（n=32）。所有患者年龄27～70岁，平均（46.59±6.37）岁。其中宫颈癌组按国际妇产科联盟（FIGO，International Federation of Gynecology and Obstetrics）临床标准分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期27例，Ⅲ期17例，Ⅳ期19例；低度分化26例，中度分化29例，高度分化23例。CIN组CINⅠ13例，CINⅡ12例，CINⅢ7例。

纳入标准：（1）本研究已通过医学伦理委员会批准；（2）所有病例均经病理检查确诊；（3）且病历资料中未见术前均未进行放射治疗、化学治疗或免疫疗法者。排除标准：（1）临床资料不完整者；（2）合并其他宫颈疾病者。

1.2 方法

各组所有组织经石蜡包埋后连续切片，常规SE染色。采用免疫组化SP法，严格按照说明书步骤进行操作。其中，免疫人Gli-1浓缩型抗体同一购自Santa Cruiz Biotechnology（Santa Cruz,California,USA），工作浓度调至1:150。

1.3 观察指标

Gli-1的表达情况：Gli-1表达在细胞核中，以出现棕褐色颗粒为染色阳性。随机选取5个切片，每个切片100个细胞，即随机选取500个细胞。计算阳性细胞百分率：在75%以上计4分，51%～75%计3分，26～50%计2分，在25%以下计1分，无阳性计0分；以及染色程度：棕褐色计3分，棕黄色计2分，淡棕色计1分，无颜色计0分。最后将两项积分相乘：0分（无阳性）、1分（≤25%）、2分（26%～50%）、3分（51%～75%），4分（＞75%）；染色程度相乘，0～1分为阴性（-），2～4分为阳性（+），5～8分为中等阳性（++），9～12分为强阳性（+++），最终得分为2分及2分以上即视为阳性结果。

1.4 统计学方法

本研究数据均采用SPSS 18.0软件进行统计分析，计量资料通过平均数±标准差（±s）描述，采用t检验；计数资料通过率或构成比描述，并采用x2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同宫颈组织中Gli-1蛋白的表达情况

Gli-1在正常组的阳性率为6.06%，CIN组阳性率为53.13%，而在宫颈癌组中阳性率为79.49%，不同宫颈组织中Gli-1阳性率比较：宫颈癌组＞CIN组＞正常组，（x2=83.857，P=0.001），Gli-1的表达情况在不同状态下的宫颈组织中有明显增强的趋势。比较具有统计学意义，详细见表1。

2.2 Gli-1的表达情况与宫颈癌临床分期和分化程度的关系

Ⅲ、Ⅳ期患者Gli-1阳性率为94.44%，高于Ⅰ、Ⅱ期患者的阳性率45.24%，差异有统计学意义（P＜0.05）；低度分化患者Gli-1阳性率为19.23%，中度分化患者Gli-1阳性率为68.00%，高度分化Gli-1阳性率为96.30%，不同分化程度患者Gli-1阳性率比较：高度分化＞中度分化＞低度分化，差异有统计学意义（P＜0.05），Gli-1的表达情况与宫颈癌临床分期和分化程度之间存在显著的相关性。比较具有统计学意义，详细见表2。

表1 不同宫颈组织中Gli-1表达情况[n（%）]

表2 不同宫颈癌临床分期和分化程度中Gli-1的表达情况（n，%）

3 结 论

随着医学技术的发展以及宫颈癌筛查的普及，我国宫颈癌的患病率逐年降低。宫颈癌好发于中青年女性，但随着现代生活压力的增加，目前开始出现年轻化等相关的问题[4]。早期宫颈癌患者仅有阴道接触性出血、月经异常、阴道排液等症状，临产上患者常根据癌细胞的转移而出现对应器官受到压迫后的症状，例如输尿管梗阻、下肢肿痛、尿毒症。晚期宫颈癌患者可出现贫血、恶病质等，最终甚至导致全身系统衰竭而发生死亡。宫颈癌发生病变和发展过程的时间需要一定的时间，临床的治疗也需要根据临床分期、患者自身情况等多种条件综合选择适合个体的方案，因此及时判断疾病的发展程度对预防和治愈宫颈癌有重要价值。

Hedgehog信号传导通路是人体胚胎发育和分化中重要的调节系统，可由多种组分构成，包括sonic hedgehog（Shh）、india hedgehog（Ihh）和desert hedgehog（Dhh）3种同源基因，分别编码 Shh、Ihh和Dhh蛋白[5]。正常情况下，转录因子神经胶质瘤相关癌基因同源物（Gli）受到多种组分的抑制而处于未激活状态，当Hedgehog配体异常增加后就会导致Gli被激活，进而出现Hedgehog信号传导通路异常激活的状态[6]。Gli-1、Gli-2、Gli-3均属于Gli中同源基因，其中Gli-1也是Hedgehog信号传导通路激活的标志，与Hedgehog信号传导通路对人体的各种调控功能有密切的联系[7]。陈丹[8]等通过检测70例宫颈癌组织和10例正常宫颈组织中Gli-1蛋白的表达，发现Gli-1蛋白在宫颈癌组织中的表达强度明显较高，从而认为Gli-1可促进宫颈癌的发生及发展。本研究结果显示，Gli-1在正常组的阳性率最低，而在宫颈癌组中阳性率最高，差异有统计学意义（P＜0.05），表明Gli-1的表达随着肿瘤的发展而持续增强。同时，在宫颈癌组Ⅲ、Ⅳ期患者Gli-1阳性率显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者，差异有统计学意义（P＜0.05），并且不同分化程度患者Gli-1阳性率比较：高度分化＞中度分化＞低度分化，差异有统计学意义（P＜0.05），可见Gli-1的激活促进着肿瘤的发生及，其与肿瘤的发展和恶性程度之间有密切的关系。

综上所述，Gli-1蛋白表达水平在宫颈癌患者中显著增强，且在Ⅲ、Ⅳ期患者中增强更为明显，故可将其作为检测宫颈癌及分期的重要指标之一。