西洋参淫羊藿片缓解体力疲劳作用研究

王 鹤，刘 磊，任立焕，侯金才

(神威药业集团有限公司，河北 石家庄 051430)

体力疲劳是人们生活中常见的症状，易疲劳人群广泛，抗疲劳食品市场需求大。在我国，抗疲劳保健食品在保健食品市场中占据着相当大的份额。疲劳已成为国内外关注的病症和研究的热点。多种中药具有抗疲劳作用[1-3]，西洋参性凉、味甘、微苦，具有补气养阴、清热生津之功效。现代药理学研究发现西洋参提取物具有抗疲劳、抗氧化、抗应激、抑制血小板聚集、调节血糖等作用。西洋参中的皂苷类成分可有效增强中枢神经兴奋性，达到静心凝神、消除疲劳、增强记忆力之功效[4-7]。淫羊藿始载于《神农本草经》，又称仙灵脾，李时珍在《本草纲目》中称其有“益精气，坚筋骨，补腰膝，强心力”之功效。淫羊藿中不同活性成分能在提高机体免疫能力、增加骨代谢能力、增强心肌收缩力、改善心脑血管血液循环以及抗氧化、抗肿瘤等方面具有重要的作用，并且能够促进睾酮的分泌，具有雄激素样作用。淫羊藿在延缓疲劳的发生、促进疲劳的恢复、提高运动能力方面具有重要的功效[8-12]。红景天补气清肺、益智养心、散瘀消肿，具有增强学习记忆、改善心脑血管系统、抗疲劳、耐缺氧、抗衰老、增强免疫、抗病毒及保护脏器的作用。红景天提取物已被证实可在细胞水平表现出抗疲劳功效[13-16]。雪莲培养物富含黄酮类物质，含量高达10%以上，多酚、紫丁香甙、绿原酸、1，5-二咖啡酰奎尼酸的药效含量也远远高于野生型天山雪莲。已经被证实的功效包括：抗辐射、抗疲劳、抗炎镇痛、调节免疫力、抗氧化、提高骨密度、调血脂、抑菌等[17-20]。

结合市场需求，我公司根据现代科学理论结合传统医学理论，选用西洋参提取物、淫羊藿提取物、红景天提取物、雪莲培养物为主要原料，配以适当的辅料加工制成保健食品，研究其缓解体力疲劳作用。

1 材料与方法

1.1 样品

西洋参淫羊藿片，神威药业集团有限公司生产，每100 g含总皂苷2.0 g，淫羊藿苷1.9 g，红景天苷320 mg，总黄酮4 g，人体推荐剂量为1.1 g/人/日。

1.2 实验动物

由西安交通大学医学院实验动物中心提供的雄性昆明种小鼠190只，生产许可证号：SCXK(陕)2018-001，体重18～22 g，SPF级。质量合格证号：61001700003136(负重游泳、血乳酸试验和血清尿素试验)，61001700003141(肝糖原试验)。动物饲料、垫料均由西安交通大学医学院实验动物中心提供。试验动物房为屏障系统，使用许可证号为 SYXK(陕)2018-009，温度20～25 ℃，相对湿度45%～65%。

1.3 主要仪器与试剂

电子天平(AL204)(梅特勒-托利多仪器有限公司);紫外可见分光光度计(UV-2550)(岛津)；全自动生化分析仪(BS-420)(深圳迈瑞)；离心机(TG16-WS)(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)；试剂盒(南京建成赛浩科技有限公司)；生化分析试剂(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)。

1.4 剂量设计及配制

将西洋参淫羊藿片设计为0.55 g/kg/BW、0.37 g/kg/BW、0.18 g/kg/BW三个剂量组，其剂量分别相当于人体推荐用量的30倍、20倍、10倍，另设一个阴性对照组(蒸馏水)。样品配制：准确称取受试样品0.55 g、0.37 g、0.18 g分别加蒸馏水至20mL混合均匀，备用。

1.5 试验方法

预游泳后选姿势正确雄性小鼠160只，共分4个试验组，每试验组用40只小鼠并随机分为4小组，各试验组均设3个剂量组和1个阴性对照组，每组10只小鼠。试验一组为负重游泳试验，试验二组为血清尿素测定试验，试验三组为肝糖原测定试验，试验四组为血乳酸测定试验。按上述剂量每天经口给予受试样品1次，阴性对照组给予等容量的蒸馏水，灌胃容量为20 mL/kg/BW，连续30天。然后分别进行各项指标的测定，方法如下。

1.5.1 负重游泳试验 末次给予受试样品后30 min，置于游泳箱中游泳，水深35 cm，水温25 ℃，鼠尾根部负荷5%体重的铅皮。记录各组小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠负重游泳时间，各剂量组结果与阴性对照组比较进行方差分析。死亡判断标准为：小鼠沉至游泳箱底并停止张口呼吸。若剂量组游泳时间明显长于阴性对照组游泳时间，且差异显著(P<0.05)，可判定该受试样品有延长小鼠负重游泳时间的作用。

1.5.2 血清尿素测定 末次给予受试样品后30 min，在温度为30 ℃的水中不负重游泳90 min，休息60 min后拔眼球采血0.5 mL，分离血清后用全自动生化分析仪进行血清尿素测定，各剂量组结果与阴性对照组比较进行方差分析。若剂量组血清尿素含量明显低于阴性对照组，且差异显著(P<0.05)，可判定该受试样品有减少疲劳小鼠尿素产生的作用。

1.5.3 肝糖原测定 末次给予受试样品后30min处死动物，解剖取出肝脏，按试剂盒要求进行肝糖原测定，各剂量组结果与阴性对照组比较进行方差分析。若剂量组肝糖原含量明显高于阴性对照组，且差异显著(P<0.05)，可判定该受试样品有促进小鼠肝糖原储备的作用。

1.5.4 血乳酸测定 末次给予受试样品，30 min后采血，然后小鼠在30 ℃水中不负重游泳10 min，于游泳前、游泳后立即及游泳后休息20 min，分别3次采血(内眦采血)测定血乳酸含量，以3个时间点血乳酸曲线下面积为指标，将各剂量组结果与阴性对照组比较进行方差分析。若剂量组血乳酸曲线下面积明显小于阴性对照组，且差异显著(P<0.05)，可判定该受试样品有减小小鼠运动后血乳酸曲线下面积的作用。

1.6 试验数据统计

采用SPSS 20.0软件对各试验原始数据进行方差齐性检验，满足“方差齐”要求的数据资料用单因素方差分析方法以及多个试验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理；对非正态分布或方差不齐的数据资料进行适当的变量转换，待满足“正态方差齐”要求后，用转换所得的数据进行统计处理。

2 结果

2.1 小鼠负重游泳试验

由表1可见，各剂量组小鼠各期体重及增重与阴性对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。由表2可见，各剂量组小鼠平均游泳时间较阴性对照组游泳时间均延长，且高剂量组与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结果表明，该样品有延长小鼠负重游泳时间的作用。

表1 样品对小鼠体重的影响

表2 样品对小鼠负重游泳时间的影响

2.2 小鼠血清尿素测定

由表3可见，各剂量组小鼠各期体重及增重与阴性对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。由表4可见，高剂量组小鼠血清尿素含量与阴性对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)。结果表明，该样品可减少疲劳小鼠尿素的产生。

表3 样品对小鼠体重的影响

表4 样品对小鼠血清尿素含量的影响

2.3 小鼠肝糖原测定

由表5可见，各剂量组小鼠各期体重及增重与阴性对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。由表6可见，各剂量组小鼠肝糖原含量均高于阴性对照组，且高、中剂量组与阴性对照组比较均有极显著性差异(P<0.01)。结果表明，该样品有促进小鼠肝糖原储备的作用。

表5 样品对小鼠体重的影响

表6 样品对小鼠肝糖原含量的影响

2.4 小鼠血乳酸测定

由表7可见，各剂量组小鼠各期体重及增重与阴性对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)。由表8可见，各剂量组与阴性对照组比较，血乳酸曲线下面积均无显著性差异(P>0.05)。结果表明，该样品对运动后小鼠血乳酸含量无显著作用。

表7 样品对小鼠体重的影响

表8 样品对小鼠运动前、后血乳酸含量的影响

3 结论

本研究结果表明各剂量组与阴性对照组比较小鼠体重差异均无显著性，可明显延长小鼠负重游泳时间，降低运动后血清尿素含量，增加小鼠肝糖原的储备量，根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中“缓解体力疲劳功能检验方法”可以判定西洋参淫羊藿片具有缓解体力疲劳的功能，但本次小鼠血乳酸试验结果为阴性，因此该样品缓解体力疲劳保健功能的作用机制还需要进一步研究探讨。本实验结果为西洋参淫羊藿片在保健品和医药等方面进一步的开发、利用提供了科学依据。