2019 年江西省部分地区猪瘟抗体水平调查与分析

邓海英，周升志，廖健慧，黄小红，漆 招

（江西生物科技职业学院，江西 南昌330000）

猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒引起猪的急性、热性和高度接触传染病，是危害我国养猪业最严重的传染病之一，国际兽医局把它列为A 类传染病。全世界有44 个国家和地区存在猪瘟，甚至在1993 年后一些已经宣布消灭猪瘟的国家，如荷兰、比利时、德国、英国等，又先后有猪瘟的复发报道，目前该病主要在亚洲、欧洲、非洲、美洲的国家及地区流行。该病仍是危害我国养猪业的主要疾病。

近年来，我国猪瘟的流行形式和发病特点已经发生了很大的变化，尤其是妊娠母猪带毒综合征、仔猪胎盘垂直传播及先天免疫耐受，还存在其他多种非典型的发病特点。免疫猪群在外界应激诱因、疫苗问题和其他病原混合感染作用下发生免疫失败现象也很常见。

本文对江西省部分地区的猪瘟免疫保护情况进行实验调查，期待为本省猪瘟疾病的控制和净化起到一定的帮助作用。

1 调查方法

1.1 调查时间

调查采样时间：2019 年3 月～11 月。

1.2 样品来源

在南昌市、鹰潭市、赣州市和吉安市等地区，选择有代表性的规模化猪场随机采取静脉血样。

采集方法：每头猪使用一个一次性注射器，大猪采用耳静脉采血，仔猪采用前腔静脉采血。每头猪采血量5mL，样品冷藏送检，一周内测完。

2 仪器试剂

2.1 试剂材料

20 倍浓缩洗液、标准阳性血清、标准阴性血清、稀释液、终止液、包被液、磷酸盐缓冲液、封闭液、底物液A、底物液B、羊抗猪酶标二抗。

2.2 仪器器材

恒温箱、微量移液器、一次性注射器、洗板机、猪瘟病毒抗体试剂盒 （美国 IDEXX：99-43220-K381）。

3 检测方法

3.1 操作步骤

3.1.1 将血样品室温斜面静置2h，自然凝固后5℃冷藏2.5h；然后4 000 r/min 离心10min，取上清液。

3.1.2 将20 倍浓缩洗液恢复至室温25℃后，在血清稀释板中按1:40 的体积比稀释待检血清、标准阳性血清、标准阴性血清。

3.1.3 分别将50μL 样品稀释液、阳性对照、阴性对照和被检样品加入每个检测孔和对照孔中，然后将反应板中的溶液振荡混匀。注意吸头一次性使用不重复利用，以防止交叉污染。

3.1.4 将微量反应板用封条封闭后，25℃左右，过夜。

3.1.5 取出反应板，吸出反应孔中的液体，并用稀释好的洗涤液和洗板机洗涤3 次，拍干反应板；再分别将100μL 的羊抗猪酶标二抗加入反应孔中，用封条封闭反应板，温箱35℃温育30min。

3.1.6 再次洗板3 次后，分别将100μL 的底物溶液加入反应孔中，避光，25℃放置10min；再分别加入100μL 的终止液终止反应。

3.1.7 样品在450nm 处测定样本以及对照的吸光度值。

3.2 计算方法

（被检样本的平均值ODTEST；阴性对照的平均值ODNEG，阳性对照的平均值ODPOS,其中ODPOS应大于0.50）。

抗体水平判断标准：阻断率≥40%血清样品为合格（＋），阻断率≤30%血清样品为不合格（－），阻断率在30%～40%间为可疑（±）。

4 猪瘟抗体水平检测结果

检测75 头，63 头阳性，10 头阴性，2 头可疑。阳性率86.67%、平均阻断率78%。离散度38.25%,整体抗体水平较好（见表1～5）。

表1 3 周龄仔猪检测结果

表2 1～4 胎母猪检测结果

表3 5 胎以上母猪检测结果

表4 6 周龄仔猪检测结果

表5 9 周龄仔猪检测结果

5 结果分析

5.1 猪瘟抗体水平分析

从2019 年调查来看，母猪群抗体都比较好，阳性率100%；平均阻断率80%；三周龄15 头，阴性3头，阳性率80%，平均阻断率57.93%，最高的阻断率90%，最低的只有7%，说明母源抗体整体还很高；6 周龄仔猪15 头，阳性7 头，阴性8 头，阳性率46.7%，平均阻断率34.8%，处于临界点，难以保护不受病毒侵袭，要重新考虑首免日龄；9 周龄仔猪15 头，阳性率93.3%，一头可疑，平均阻断率55.86%，处于正常状态（见图1、表6）。

图1 猪瘟抗体水平图

表6 猪瘟抗体结果分析 头

6 讨论

通过对江西省部分地区的猪瘟免疫保护情况做出的实验结果，发现猪瘟抗体整体水平良好，江西省规模化猪场的猪瘟预防免疫工作到位，母源抗体整体保护率高，有利于降低未断奶仔猪的猪瘟发病率，提高仔猪的存活率；9 周仔猪的预防接种及时，抗体保护率正常；缺点是6 周龄仔猪免疫保护率处于临界点，保护率不高，应需调整免疫接种时间或首免日龄，加强免疫。