钦州地区人乳头瘤病毒感染的人群调查及与宫颈疾病的关联

刘宁毅　蓝莉

【摘要】 目的：調查钦州地区人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染的人群分布特征，以明确HPV感染与宫颈疾病的关联。方法：选择钦州地区14 335例疑似感染HPV患者为研究对象，采用核酸扩增和反向点杂交技术行HPV基因检测，统计检测结果。结果：HPV阳性患者

3 239例，阳性检出率为22.60%;共检出23种HPV基因分型，其中低危型有6种，高危型有17种。慢性宫颈炎患者HPV阳性检出率为32.8%，低度鳞状上皮内病变患者HPV阳性检出率为83.4%，高度鳞状上皮内病变患者HPV阳性检出率为95.6%，宫颈癌患者HPV阳性检出率为100%。在LSIL、HSIL和宫颈癌患者中，以HPV16、HPV18、HPV52和HPV58四种高危型HPV较常见，其中HPV16和HPV52最常见。HPV阳性高峰年龄段为25～34、35～44、45～54岁，以35～44岁HPV阳性检出率最高。结论：钦州地区HPV感染型别以HPV52、HPV16、HPV58、HPV18为主，多发于35～44岁人群，不同宫颈病变HPV阳性检出率具有明显差异，说明根据HPV感染情况可鉴别各类宫颈疾病。

【关键词】 人乳头瘤病毒感染 宫颈疾病 组织学 检测

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.15.030 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2020）15-00-04

Investigation of Human Papillomavirus Infection in Qinzhou Area and Its Association with Cervical Diseases/LIU Ningyi， LAN Li. //Chinese and Foreign Medical Research， 2020， 18（15）： -74

[Abstract] Objective： To investigate the population distribution characteristics of human papillomavirus （HPV） infection in Qinzhou area to clarify the association between HPV infection and cervical disease. Method： A total of 14 335 patients suspected of being infected with HPV in Qinzhou were selected as the research subjects. HPV gene detection was performed by nucleic acid amplification and reverse dot hybridization， and the results were counted. Result： There were 3 239 patients with HPV-positive， and the positive detection rate was 22.60%. A total of 23 HPV genotypes were detected， including 6 types for low-risk types and 17 types for high-risk types. The positive detection rate of HPV in patients with chronic cervicitis was 32.8%. The positive detection rate of HPV in patients with low-grade squamous intraepithelial lesions was 83.4%. The positive detection rate of HPV in patients with high-grade squamous intraepithelial lesions was 95.6%. The positive detection rate of HPV in patients with cervical cancer was 100%. Among LSIL， HSIL and cervical cancer patients， four high-risk types of HPV were more common， including HPV16， HPV18， HPV52 and HPV58， among which HPV16 and HPV52 were the most common. The peak age of HPV-positive was 25 to 34， 35 to 44 and 45 to 54 years old， and the highest positive detection rate of HPV was 35 to 44 years old. Conclusion： The types of HPV infection in Qinzhou area are mainly HPV52， HPV16， HPV58， HPV18， and they are more common in people aged 35 to 44. The positive detection rate of HPV in different cervical lesions are significantly different， indicating that various types of cervical diseases can be identified based on HPV infection.

[Key words] Human papillomavirus infection Cervical disease Histology Detection

First-authors address： The Second Peoples Hospital of Qinzhou， Qinzhou 535000， China

人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属，包含低危型HPV和高危型HPV两种，其中低危型HPV感染可引发良性肿瘤和疣，如生长在黏膜上的乳头状瘤、疣等，而持续性高危型HPV感染则可致癌[1]。流行病学调查结果显示，HPV感染可发生于各年龄段，且HPV感染年龄特异性曲线为双峰U型[2]。还有数据表明，95.0%～99.7%的宫颈癌中存在高危型HPV感染，说明高危型HPV感染是引发宫颈癌的危险因素[3]。本文主要调查钦州地区HPV感染的人群分布特征，并分析HPV不同型别感染与宫颈疾病的相关性，以期能为该地区宫颈癌防治工作提供有效的参考，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年1月-2019年6月钦州地区14 335例疑似感染HPV患者作为研究对象。纳入标准：（1）均为女性且月经正常;（2）依从性良好。排除标准：（1）标本细胞量过少或标本不合格;（2）资料不全影响统计。年龄17～60岁，平均（40.18±2.05）岁。患者均自愿加入本研究。

1.2 方法

1.2.1 HPV基因分型检测 所有患者均行HPV基因分型检测。为达到最佳检查效果，检测人员需指导患者于月经来潮后10～18 d到院进行检测，并叮嘱患者在检查前3 d内不可冲洗阴道，不要使用避孕药等阴道内用药物，检查前24 h内不应有性行为，检查前不进行醋酸或碘液涂抹。采用专用宫颈脱落细胞采集器进行采样，采样前先以阴道扩张器或窥阴镜暴露宫颈，再用棉拭子将宫颈口过多的分泌物擦除，取出宫颈刷置于宫颈口，单方向旋转4～5周以获得足量的上皮细胞样本。将宫颈刷头部放入洗脱管中，沿刷柄折线处将宫颈刷柄折断，旋紧洗脱管盖，做好样本标识，并保持洗脱管直立放置。采集标本后需尽快送检，先进行HPV DNA提取，方法为：将宫颈刷充分洗脱，并在管壁上挤干，再将洗脱液转移至1.5 ml离心管中进行离心，弃去上清液，保留细胞沉淀，加入50 μl裂解液悬浮沉淀，沸水浴加热10 min，再次做离心处理，保留上清液待用;再进行PCR扩增、杂交，采用亚能生物技术（深圳）有限公司提供的基因扩增仪、YN-H16恒温杂交仪进行检测，具体方法为：提取5 μl DNA加入HPV基因阵列分型检测试剂盒提供的

24 μl PCR反应体系中，振荡混匀后置于基因扩增仪进行扩增，扩增条件为72 ℃、30 s，55 ℃、30 s，95 ℃、20 s，95 ℃、9 min，

72 ℃、5 min，共40个循环，应用仪器及配套试剂盒进行导流杂交得出扩增产物[3]。

1.2.2 细胞学检查 对HPV阳性患者行细胞学检查。采集宫颈脱落细胞样本，通过TCT制作细胞薄片。根据TBS分类标准，报告细胞学结果。细胞学诊断分正常范围（WNL）、非典型鳞状细胞（ASCUS）、低度鳞状上皮内病变（LSIL）、非典型鳞状上皮细胞不能排除高等鳞状上皮内病变（ASCH）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、宫颈癌。

1.2.3 阴道镜检查 对HPV阳性和异常细胞学（ASCUS级别以上）患者均进行阴道镜检查。在阴道镜检查过程中，对出现异常的子宫颈病变位置进行活检。阴道镜检查和活检均由本院经验丰富的医师进行。详细记录阴道镜和活检检查结果，记录确诊为宫颈病变的患者的诊疗过程，便于治疗后跟踪回访。按照病理检查划分为宫颈炎、低度鳞状上皮内病变（LSIL）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）和宫颈癌[4]。

1.3 观察指标及评价标准

（1）统计HPV阳性检出率和不同型别HPV阳性检出率。HPV阳性判定标准：HPV基因型位点及IC位点出现显色信号;HPV阴性判定标准：杂交膜条除IC位点有蓝色斑点外，其他位点均不显色[5]。（2）不同宫颈病变中HPV阳性检出率。（3）不同年龄段HPV感染情况。（4）不同HPV型别在不同宫頸病变中的分布情况。

1.4 统计学处理

采用SPSS 20.0软件对数据进行分析，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV阳性检出率和不同型别HPV阳性检出率

14 335例疑似感染HPV患者中有3 239例HPV阳性患者，阳性检出率为22.60%（3 239/14 335）;共检出23种HPV基因分型，其中低危型有6种，包含HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV81、HPV83，高危型有17种，包含HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73、HPV82;低危型以HPV6阳性检出率最高为5.99%，高危型以HPV52、HPV16和HPV58阳性检出率最高，分别为20.10%、14.30%和9.30%，见表1。单一型别阳性检出率为85.00%（2 771/3 239），两种及以上型别阳性检出率为15.00%（468/3 239）。

2.2 3 239例不同年龄段HPV感染情况

HPV阳性高峰年龄段为25～34、35～44、45～54岁，以35～44岁HPV阳性检出率最高，见表2。