不同厂家阿胶及动物皮胶中四种阴离子含量的测定

刘雯 李峰 覃洁萍 冯旭

摘要：通过离子交换色谱法，建立不同厂家阿胶及动物皮胶中Ccr、S042-、NO，-、P043-4种阴离子的测定方法。结果表明，4种阴离子分离效果良好，C1-、SO4-、NO3-、PO4分别在0.000 922-0.023 l、0.001 09-0.027 3、0.000 167-0.004 18、0.000 314-0.007 86 mg/mL浓度范围内线性关系良好，平均加样回收率在98.7% -101.0%。该测定方法结果准确、灵敏、可靠，重现性较好，可用于阿胶及动物皮胶中4种阴离子含量的测定。

关键词：阿胶;阴离子;离子交换色谱;含量;测定

中图分类号：065

文献标识码：A

文章编号：0439-8114（ 2020） 08-0134-04

DOI：IO.14088/j.cnki.issn0439- 8114.2020.08.030

阿胶为马科动物驴的干燥皮或鲜皮配以冰糖、绍酒、豆油等十几种辅料经煎煮、浓缩制成的固体胶，具有补血止血、滋阴润燥的功效…。现代研究表明，其主要由蛋白质、多肽、氨基酸和微量元素等構成，对阿胶质量控制的研究主要针对以上这几种物质，而对于阿胶中阴离子含量的测定尚未见有关报道。很多学者认为中药的作用机制不同于西药，较为复杂，具有多成分、多靶点的特征作用模式，中药发挥药效是多种成分共同作用的结果，不仅包括有机物质，也包括无机物质。因此，对于中药中无机物质的研究也具有重要意义，许多学者已开始展开了研究[2-4]。为了更全面地控制阿胶的质量，对不同厂家阿胶及不同动物皮胶中的阴离子进行了测定，以期找出不同厂家阿胶及不同动物皮胶在阴离子含量上的差异。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品与试剂选取10批福牌阿胶、4批东阿阿胶、2批宏济堂阿胶、3批马皮胶、3批新阿胶、3批黄明胶作为供试品。NaF、KCI、Na2S04、KN03、Na2HPO4和NaOH均为分析纯，水为高纯水。

1.1.2 仪器 DIONEX ICS-1100型离子色谱仪;Suppressed Conductivity电导检测器;DIONEXAS-DV型自动进样器;MS205DU型电子天平;KQ5200B型超声波清洗器。

1.2方法

1.2.1 色谱条件 采用DIONEX IonPacTM ASlI-HC Analytical（4μm×250 mm）离子交换色谱柱，柱温30℃;流动相为30 mmol/L NaOH溶液，抑制电流为76mA，流速为1.0mL/min，进样量为10 μL。1.2.2样品制备

1）对照品溶液的制备。精密称取NaF 17.5 mg、KCI 16.2 mg.Na2S04 77.0mg.KN03 79.0mg.Na2HP04177.7 mg，置于100 mL容量瓶中，加30mmol/LNaOH溶液溶解并定容，精密量取上述溶液10 μL，置于10 mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容至刻度，用0.45μm微孔滤膜滤过，取滤液即得。

2）供试品溶液的制备。精密称取本品粗粉0.06 g，置于10 mL容量瓶中，加适量30 mmol/LNaOH溶液超声使溶解后，再加30 mmol/L NaOH溶液并定容至刻度，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取滤液即得。

2 结果与分析

2.1 样品及对照品离子交换色谱

5种阴离子混合对照品和样品的离子交换色谱图见图1。

2.2 线性关系考察

精密称取KCl 76.0 mg、Na2SO4 80.9 mg、KNO313.6 mg、Na2HPO423.5 mg，置于100 mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容至刻度，分别精密量取上述溶液20、50、100、200、500 μL置于10mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容至刻度，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取滤液即得5个系列浓度的对照品混合溶液。将上述溶液分别精密吸取10 μL进样分析，测定目标峰的峰面积值，并以峰面积值（y）对浓度（x）进行回归分析，分别计算标准曲线方程，线性关系见表1。

2.3 精密度试验

精密吸取第3个浓度对照品溶液10 μL进行离子交换色谱分析，重复进样6次，测得Cl、S042-、N03-、P043-峰面积值的RSD （n=6）分别为0.26%、0.24%、0.91%、1.1%，表明该方法精密度良好。

2.4 重复性试验

取6份猪皮胶3样品进行离子交换色谱分析，测定4种阴离子的含量。该批次Cl、S042-、N03-、P043-扣水后的平均含量分别为0.76%、0.10%、0.024%、0.031%，其RSD（n=6）分别为1.2%、3.1%、3.0%、2.7%，表明该方法重复性良好。

2.5稳定性试验

取同一份供试品溶液，在0、2、4、8、12、24 h不同时间间隔点进行离子交换色谱分析。结果表明，Cl、S042-、N03-、P043-峰面积RSD分别为0.071%、0.37%、1.1%、2.1%，表明样品在24 h内稳定。

2.6 加样回收率试验

精密称取KCl 308.9 mg、Na2SO440.8 mg、KN0310.6 mg、Na2HPO411.5 mg，置于100 mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容，精密量取上述溶液1 mL，置于50 mL容量瓶中，加30 mmol/LNaOH溶液溶解并定容至刻度。精密称定6份0.03 9猪皮胶3样品，置于10 mL容量瓶中，分别精密加入上述对照品储备溶液5 mL，测定4种阴离子回收率。结果表明，Cl、S042-、N03-、P043-的平均回收率分另0为98.9%、101.0%、99.4%、98.7%，RSD（n=6）分别为1.5%、2.9%、2.3%、2.0%，表明该方法准确度良好（表2）。

2.7样品测定

取阿的胶及其他皮制胶样品分别进行离子交换色谱分析，计算CI-、S042-、N03-、P043-的含量，含量（按干燥品计）测定结果见表3。

3 小结

不同厂家阿胶以及不同动物皮胶中Cl、S042-、N03-、P043-4种阴离子含量有差异，其中猪皮胶含有P043-，而其他动物皮胶未检出，所有供试品均检出Cl-、S 042-、N03-3种阴离子。不同动物皮胶中，猪皮胶中Cl-含量較高，达到0.577 6-0.759 5 mg/mL，阿胶含量在0.057 5-0.309 7 mg/mL，牛皮胶含量在0.068 6-0.152 0 mg/mL，马皮胶含量在0.067 0-0.313 5 mg/mL。宏济堂阿胶SO4含量最高，其他品牌阿胶及其他动物皮胶均是Cl含量最高[5]。由于猪皮胶、牛皮胶和马皮胶为同一实验室、同一组试验人员熬制，其与其他样品的差异性推测是原料猪皮与牛皮、马皮、驴皮之间的差异引起的[6，7]。不同厂家阿胶之间的阴离子含量差异不仅跟原料驴皮有关，还与生产设备、生产用水、生产工艺等有关。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015

[2]郭俊国，毕宏生.离子色谱法测定栀子中Cl，Br_，S042，N03，PO3-5种阴离子的含量[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（23）：90-93.

[3]谢玉惠，龙兴浩.离子色谱法同时测定附子理中丸中6种无机阴离子含量[J].安徽医药，2016，20（8）：1490-1494.

[4]张元，李伟青，周伟娥，等.离子色谱法同时测定丹参注射剂中6种无机阴离子[J].中国实验方剂学杂志，2015，21（17）：24-27.

[5]宋玉国，申玉华离子色谱法测定苦碟子注射液中硫酸盐和亚硫酸盐[J].药物分析杂志，2012，32（5）：857-860.

[6]包雪英，刘艳秦.离子色谱法测定金莲花中多种阴离子研究[J].中草药，2012（ 23）：168-169

[7]刘冬莲，石洪凌，刘会媛，等.离子色谱法测定中药当归中的无机阴离子成分研究[J].唐山师范学院学报，2007，29（2）：26.

作者简介：刘雯（1984-），女，山东平邑人，T程师，博士，主要从事中药质量控制及资源研究，（电话）15163900639（电子信箱）123745789@qq.com，通信作者，李峰（1957-），男，山东安丘人，教授，博士，主要从事中药质量控制及资源研究T作，（电子信箱）842212526@qq.com。