糕点中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸的同时检验方法探讨

摘 要：苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸是日常生活中最传统、最高性价比的防腐剂和甜味剂。本文通过检验分析，建立同时分析糕点中苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸的检验方法。

关键词：糕点;苯甲酸;山梨酸;糖精钠;脱氢乙酸;检验方法

近年来，随着人们生活水平的提高，糕点越来越受到人们的喜爱，其样式和品种越来越多，这在很大程度上为糕点行业的发展提供了十分有利的条件[1]。国家食品安全监督抽检实施细则中，糕点的检验项目中基本都包含了苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸这几个指标。依据国家食品安全监督抽检实施细则，这4个指标的检验方法是GB 5009.28-2016和GB 5009.121-2016，两种方法都是使用超高效液相色谱进行分离，考虑到这几种物质的化学性质，可以考虑使用同一种前处理方法来提高检验的初筛速度，从而提高检验工作效率。为了迅速、准确地对上述参数进行检测，本文研究了同时检验糕点中苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸的方法。

1 材料与方法

1.1 仪器

高效液相色谱（赛默飞U3000，配DAD），0.22 μm有机滤膜，离心机（安亭），超声波清洗器（安谱）。

1.2 试剂

苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸标准溶液：浓度均为1 000 mg/L，中国计量科学研究院;甲醇、乙腈为HPLC级（TEDIA）;乙酸铵为优级纯，实验室用水（娃哈哈，杭州）。

1.3 标准溶液配置

1.3.1 标准中间溶液（200 mg/L）

分别吸取1 000 mg/L的苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸标准溶液10 mL，用水定容至50 mL，混匀。于4 ℃贮存，保存期为3个月。

1.3.2 标准工作溶液

分别吸取标准中间溶液（1.3.1）0、0.05、0.25、0.50、1.00、2.50、5.00 mL和10.0mL，用水定容至10 mL，配制成质量浓度分别为0、1.00、5.00、10.0、20.0、50.0、100 mg/L和200 mg/L的混合标准系列工作溶液，临配现用。

1.4 色谱条件

色谱柱：C18柱，流动相：甲醇+乙酸铵溶液=4+96，柱温：35 ℃，流速：1 mL/min，检测波长：230 nm，进样量：10 μL。

1.5 样品前处理方法

准确称取约2 g样品，置于50 mL离心管中，加水约20 mL，涡旋混匀，超声20 min，加亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液各2 mL，涡旋混匀，4 000 r/min离心5 min，将水相转移至50 mL容量瓶中，在残渣中加水20 mL，涡旋混匀，4 000 r/min离心5 min，将水相转移前一步骤的容量瓶中，用水定容至刻度，混合均匀，经过0.22μm水系滤膜过滤，供进样。

2 结果与讨论

2.1 样品前处理的选择

糕點的种类比较多，基质相对比较复杂，按照GB 5009.28-2016[2]中的规定，糕点按照一般性试样进行前处理，通过蛋白质沉淀剂作用除去样品中的蛋白质，从而减少基质中蛋白质对检样出峰及峰型的干扰。而脱氢乙酸按照GB 5009.121-2016[3]的方法，利用硫酸锌、氢氧化钠溶液进行蛋白沉淀后，用正己烷进行除脂。本实验过程对糕点样品进行加标检验，使用GB 5009.28-2016中的蛋白质沉淀剂（亚铁氰化钾和乙酸锌）沉淀后离心，取上清液定容进样。

2.2 色谱条件选择

在涉及苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸的相关检测标准中，流动相主要为甲醇、乙酸铵。本实验测试了甲醇+0.02 mol/L乙酸铵两种流动相体系，通过不同流动相比例来分离这4种物质。通过试验发现甲醇+0.02 mol/L乙酸铵（4+96）在本实验洗脱程序下能够较好分离这4种物质。

2.3 方法的线性范围和检出限

本实验采用直接配制的标准溶液绘制工作曲线，对标准溶液进行测定，来考察方法的线性范围和检出限，以信噪比10∶1作为该方法定量下线，具体见表1。

2.4 方法精密度与回收率

选用糕点中较为典型的面包和月饼两种样品，将两种样品分两组分别加入一定量的混合标准溶液，配制成50、100、200 mg/L、400 mg/L浓度水平，进行回收试验，计算其回收率及相对标准偏差（RSD）。测定结果表明，这4种物质的回收率在92.7%～99.6%，RSD小于10%。

3 结论

通过检验分析，探讨建立同时分析糕点中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸的检验方法。经检验发现，通过常规的蛋白质沉淀后离心进样，基本可以满足检验要求。该方法在后期实验室大批量筛查检验过程中可以得到应用。

参考文献

[1]杨静，陈遂，李佩斯，等.论糕点食品行业质量安全问题及应对措施[J]食品界，2017（4）：40-41.

[2]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB 5009.28-2016食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定[S].北京：中国标准出版社，2016.

[3]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB 5009.121-2016 食品安全国家标准 食品中脱氢乙酸的测定[S].北京：中国标准出版社，2016.

作者简介：薛佳佳（1993—），女，汉族，江苏省盐城人，本科。研究方向：食品检验。