HPLC法检测海水鱼中组胺含量

孙晶

摘 要：为了更好地保护人们的身体健康，减轻海水鱼腐烂对人体造成的影响，设置各种不同的方式来检测海水鱼中的组氨含量，在本次的实验中，主要是检测海水鱼中组胺的含量，采用的方式是高效液相色谱法。这种方式可以提高实验过程中的准确性，并且进行快速而有效的定量。

关键词：HPLC;组胺;海水鱼

生物胺是生物活性物质中含氮的低分子有机化合物的总称，生物胺一般包括脂肪类、芳香类和杂环类3大类，组胺是其中的一种杂环类生物胺，存在在各種动物和植物当中。海水鱼体内含有一定的游离组氨酸，如果海水鱼新鲜，就不会受细菌污染，但是，当海水鱼腐烂变质时，会受到大量微生物感染，这时在一定条件下就会产生化学反应，分解组氨酸形成组胺。

组胺在正常情况下是无色无味的，人的肉眼是无法分辨出组胺的。组胺是一种不发挥的有机胺，如果人体食入了不新鲜腐烂变质的海水鱼，就会出现相对应的中毒症状，并且会引起一系列的慢性病变，从而影响人的各大神经系统、消化系统以及心血管系统，严重的还会导致水肿、皮肤发红、头晕头痛等各种中毒症状，甚至会出现呼吸困难、发热、死亡，对于人体健康有非常大的影响。由于海水鱼是人们日常生活当中经常使用的食物，经常被人们搬上餐桌，所以重视海水鱼中组胺含量的检测，对于人们的身体健康具有非常重要的意义[1]。

1 海水鱼中组胺的检测方式

组胺的检测方式主要有分光光度法、高效液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱法和电化学生物传感器等方式。简单来说，分光光度法是利用提取液进行提取，通过显色剂作用显色，并与标准系列溶液进行比较定量，从而进行组胺的检测。这种处理方式比较节约时间，但是重现性较差，线性关系也不够稳定。薄层色谱法检测组胺的原理是利用吸附剂吸附能力的不同，从而达到将每一种不同的成分分离的效果，但是这种方式在高温下容易发生各种物质变化，整体的实验结果并不准确。若采用气相色谱法来进行检验，在检测过程当中容易出现峰拖尾的现象，整体的灵敏度较低。如果采用电化学生物传感器的方式进行分析，速度比较快，灵敏度高，但是生物固定化膜不够稳定。采用高效液相色谱法来进行分析的话，分析速度更快，重现性比较高，灵敏度和柱效都比较好，拥有定量分析准确的优点，比较适合日常的海水鱼组胺检测[2]。

2 海水鱼组胺检测过程

2.1 材料与方式

主要样品为市面上售卖的海水鱼，所需要的仪器包括液相色谱仪、色谱柱、离心器、涡旋振荡器与电子天平。主要所使用的试剂包括三氯乙酸、氯化钠、正已烷、盐酸丙酮、氯化钠、乙醚、甲醛、碳酸氢钠溶液以及氢氧化钠溶液等。

2.2 实验过程

在实验过程中，需要配置衍生剂溶液。想要制作衍生剂溶液，首先需要称取一定量的丹磺酰氯，加入丙酮，配制成相应浓度的衍生液。随后配置流动相，接着配制内标液，在上述过程完成之后，再配制标准溶液。标准溶液的配制方法如下，将相应的组氨溶解在一定量的盐酸溶液当中，然后转至容量瓶定容至相应刻度，配制成相应浓度的储存溶液，精密吸取储存液并进行稀释，在临用前配置。

在溶液配制结束之后，需要依次进行组胺标准曲线的绘制、精密度实验分析、重现性实验分析与加标回收率测定。具体的实验过程如下：首先在规定的色谱条件下，将组胺标准溶液依次进样，并将组胺标准溶液的吸收峰面积作为纵坐标，标准溶液浓度作为横坐标制作标准曲线，按照上述步骤依次测定不同浓度的标准溶液，并记录实验结果。在实验过程当中，为了提高检验结果的准确性，可以取同一批次6份供试样，经样品处理后，进行重复性考察，记录结果，分析重复性，计算相对偏差，从而确保检测的重复性。在重现性实验结束之后，需要取不同的样品加入已知浓度的标准溶液当中，进行回收率考察。确保回收率在固定范围之内，保障实验方准确性[3]。

3 结论

本次实验当中采用了HPLC来检测海水鱼中的组胺含量，具体的操作步骤包括试剂调配、组氨标准曲线制作、精密度实验、重现性实验与回收率测定。在本次实验过程当中，采用丹磺酰氯制作延伸剂。通过最终的实验结果分析，可以明确这种方式在一定的线性范围内线性关系良好，实验的精准性和重复性都有较高保障，回收率在合理范围内，方法整体来说操作简单、准确度高、回收率较高，适用于一般情况下的海水鱼组胺检测。

4 结语

现在越来越多的人们的生活品质得到了提高，餐桌上的海鲜也越来越多。海水鱼作为现阶段餐桌上使用较为广泛的海鲜之一，应确保其没有腐烂变质，保证海水鱼当中的组氨含量在标准范围内，减轻由于食用海水鱼导致的各种中毒症状及慢性病变，确保人们的生活健康，提高人们的生活质量。

参考文献

[1]梁立广，李绮敏，雷艳.HPLC法检测海水鱼中组胺的含量[J].食品安全导刊，2019（3）：179-181.

[2]谭彦君，彭接文，陈子慧，等.鱼类罐头相关食品标准法规中组胺指标探讨[J].中国食品卫生杂志，2019，31（4）：389-393.

[3]张金彪.常见野杂鱼中的生物胺分析及其对中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）存活、生长和体内累积的影响[D].上海海洋大学，2012.