BSP、osteocalcin在骨肿瘤组织中的表达

石林，郑学均*，郭彬，刘自贵，李秋江,2，杨帆

(1.重庆市垫江县中医院骨科，重庆；2.宁夏医科大学研究生院，重庆)

0 引言

骨肿瘤是发生于骨组织及其附属结构的一类良性或者恶性肿瘤的总称，其发病率及死亡率均居恶性肿瘤的前几位，其原因之一就是因为骨肿瘤具有较强的转移性[1]。且临床上无统一的指标用于对骨肿瘤的早期诊断及对预后的评估，故临床上对骨肿瘤诊断的生物学指标的研究也越来越受到医务工作者的重视。BSP是细胞外基质中的一种酸性蛋白，主要由成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞合成[2]。骨钙素(osteocalcin，OC)在骨基质中含量非常丰富，常常定位于成骨细胞和骨样组织中。在低分化的软骨肉瘤中探测到OC的高度免疫活性，而在良性和高分红软骨肿瘤中则无这种现象[3]。本次研究通过免疫组织化学的方法检测了骨肿瘤及骨软骨骨瘤组织中BSP和osteocalcin的表达情况，分析两种蛋白的表达相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年10月至2018年10月我院手术切除的30例骨肉瘤组织和30例骨软骨骨瘤组织，患者手术治疗前均未进行化疗，两组患者在年龄，性别等方面无差异，具有可比性。所有癌组织均经过病理老师确诊。本次研究取得了患者及家属以及医院伦理委员会的批准。

1.2 试剂及方法

兔抗人BSP、osteocalcin单克隆抗体，购于Abcam公司， DAB试剂盒及苏木素均购于中杉金桥公司，辣根过氧化物标记的二抗购自美国Santa Cruz公司。将骨肉瘤和骨软骨骨瘤组织蜡块进行连续切片，每张厚度4μm，于65度烤箱中烤片2h，免疫组织化学采用SP法，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 实验结果判定

BSP、osteocalcin的阳性表达在片子上均呈现棕黄色或者黄色颗粒样物质。在400倍显微镜(Leica，德国)下选取10个不重复的视野，分析阳性细胞所占的百分比及着色的深浅。

1.4 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计数资料采用卡方检验，相关性分析采用Spearman秩相关分析。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 BSP、osteocalcin在骨肉瘤及骨软骨骨瘤组织中的表达情况

BSP蛋白在骨肉瘤组织蜡块中有24例判定为阳性表达，蛋白表达阳性率为80.00%，在骨软骨骨瘤组织蜡块中仅有4例染色结果为阳性，蛋白阳性率为13.33%(P＜0.05)；osteocalcin蛋白在乳腺癌组织中有25例判定为阳性表达，阳性率为83.33%，在骨软骨骨瘤组织中有7例判定为阳性表达，阳性率为23.33%(P＜0.05)。具体比较见图1。

图1 BSP与osteocalcin蛋白在骨肉瘤及骨软骨骨瘤组织中的表达

2.2 BSP与osteocalcin之间表达的相关性

比较表1发现，BSP与osteocalcin的表达呈正相关，(r=-0.624，P＜0.05),具体见表1。

3 讨论

骨肿瘤是发生于骨组织及其附属结构的一类良性或者恶性肿瘤的总称。据研究发现，恶性骨肿瘤发病率占全部恶性肿瘤的1%，每个国家，地区骨肿瘤的发病率也有所不同[4]。我国原发的骨肿瘤约占全身肿瘤的2%-3%。同时，随着近些年来环境的变化，骨肿瘤的发病率也在逐年上升，同时愈发年轻化。因此对于骨肿瘤的诊治在骨科领域中占重要地位。

表1 BSP与osteocalcin4在骨肉瘤及骨软骨骨瘤组织表达的相关性

BSP是细胞外基质中的一种酸性蛋白，主要由成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞合成[2]。众多的研究表面，BSP的分布相对局限，主要在矿化组织特异性表达，在胎盘滋养层细胞、血小板中也能检测到BSP的表达。1995年，Arai[5]等人首次发现BSP在乳腺癌组织中的表达。同时众多的研究也发现，BSP在肺癌、甲状腺癌、黑色素瘤等多种癌性组织中高表达[6]。但是，关于BSP在骨肿瘤组织中的表达均未见报道。骨钙素在骨基质中含量非常丰富，常常定位于成骨细胞和骨样组织中。在低分化的软骨肉瘤中探测到OC的高度免疫活性，而在良性和高分化软骨肿瘤中则无这种现象[3,7]。因此，我们的研究发现，BSP和osteocalcin蛋白在骨肉瘤组织中均存在高表达，而在骨软骨骨瘤组织中呈现低表达，差异具有统计学意义(P＜0.05)，同时进一步的研究发现，在骨肉瘤及骨软骨骨瘤组织中BSP与osteocalcin的表达呈正相关(r=-0.624，P＜0.05)。综上所述，BSP和osteocalcin参与了骨肿瘤的发生发展，对骨肿瘤潜在的治疗靶点及预后判断具有重要意义。