猪瘟脾淋苗与细胞苗免疫效果比较分析

刘 阳 仇 珊

（1陕西省汉中市动物疾病预防控制中心，陕西汉中 723000；2汉中市勉县畜牧兽医技术推广中心，陕西汉中 724200）

猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的一种以高热、出血为主要特征的烈性、高度接触性传染病，是国家强制免疫的重大动物疫病之一。目前，对猪瘟的主要预防途径仍旧是通过疫苗免疫，市场上使用较多的是猪瘟脾淋苗和细胞苗，且关于猪瘟脾淋苗和细胞苗免疫效果的争论也由来已久，养殖户在合理选择疫苗类型方面仍存在较大困扰。为了科学比较猪瘟脾淋苗和细胞苗免疫效果，本试验选择猪瘟脾淋苗和细胞苗进行了对比试验，比较分析二者的免疫效果，客观公正地评价了猪瘟脾淋苗和细胞苗的免疫效果，为广大养殖户选择猪瘟疫苗类型提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 疫苗

选用编号为A的政府采购猪瘟脾淋苗和编号为B的某公司生产的猪瘟细胞苗进行对比试验。

1.1.2 试剂

猪瘟间接血凝抗体检测试剂盒，购自中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.1.3 仪器

单道和8道微量移液器均购自德国Brand公司、高速离心机、微量振荡器、96孔U型聚乙烯反应板。

1.2 试验方法

1.2.1 试验动物与分组

在陕西省汉中市某规模养猪场选择4窝体质健康、体重接近的仔猪，随机分成4组，每组10头，具体分组及疫苗注射剂量见表1。

1.2.2 免疫注射

仔猪23日龄进行首免，首免28天后进行二免，免疫剂量参照表1。

表1 猪瘟疫苗对比试验分组

1.2.3 采样次数与时间

试验过程中共采血5次，第1次采血在首免当天，主要是查明仔猪的母源抗体情况；后4次采血分别在一免后14 d、21 d、28 d和二免后21 d。

1.2.4 结果判定

正向间接血凝试验（IHA）按试剂盒说明书进行操作。检测结果按原农业部[农医发（2012）2号]文件要求判定，判定标准：其有效抗体效价≥1:32（第5孔）为免疫合格。

1.2.5 饲养管理

试验猪场试验用猪各组单独饲养，与其他同龄猪群同舍饲养，按照日常饲养管理操作规程饲养。

2 结果与分析

2.1 试验结果统计

各组猪瘟免疫抗体检测合格率结果统计见表2。猪瘟脾淋苗首免后14 d、21 d、28 d和二免后21 d平均效价，A1组有升有降、A2组呈下降趋势，合格率除A1组首免后21 d、二免后21 d和A2组二免后21 d外，其余各采样时间免疫抗体合格率均达到了70%。猪瘟细胞苗首免后14 d、21 d、28 d后和二免后21 d平均效价B1组呈先上升再下降的趋势，B2组呈上升趋势，2组各采样时间的免疫抗体合格率均达到了70%。

2.2 试验结果分析

表2 猪瘟疫苗比对试验各组免疫抗体合格率统计表

2.2.1 不同种疫苗相同剂量对比

由图1、图2可以看出，除首免后14 d，其余3次检测，脾淋苗A1组免疫抗体合格率、平均效价都低于细胞苗B1组，脾淋苗A2组免疫抗体合格率、平均效价也都低于细胞苗B2组。首免后14天，可能受母源抗体的干扰，A1、A2组脾淋苗免疫抗体合格率平均效价均高于相应B1、B2组细胞苗。说明在相同剂量免疫情况下，细胞苗的免疫效果优于脾淋苗。

2.2.2 不同种疫苗不同剂量对比

由图1、图2可知，首免后14天，A1组脾淋苗免疫抗体平均效价高于B2组细胞苗，其免疫合格率与B2组细胞苗相同，其余3次检测，A1组脾淋苗的免疫抗体合格率、平均效价都低于B2组细胞苗。A2组脾淋苗首免后14天，免疫抗体合格率、平均效价高于B1组细胞苗，其余3次检测，免疫抗体合格率和平均效价均低于B1组细胞苗，说明脾淋苗无论是标准剂量还是加大剂量，其免疫效果都不如细胞苗。

2.2.3 同种疫苗不同剂量对比

无论是脾淋苗还是细胞苗，加大免疫剂量的试验A2组和B2组免疫抗体合格率均优于A1组和B1组，尤其是脾淋苗A1组和A2组差异较大。加大免疫剂量的脾淋苗A2组首免后3次检测，免疫抗体合格率均高于A1组，且合格率都维持在70%（农业农村部免疫抗体合格标准），二免后21 d，2组免疫抗体合格率均有所下降，且都低于70%，这是因为二免后21 d免疫抗体正处于上升期；细胞苗免疫后，2组试验各阶段免疫抗体合格率均高于70%，都能产生较强的保护力，加大剂量的细胞苗B2组，由于受母源抗体较高的影响，首免后免疫抗体合格率呈下降趋势，直到二免时才有所上升，二免后21 d，2组免疫抗体合格率均有所下降，但都达到了70%。脾淋苗加大剂量免疫后效果明显，细胞苗加大剂量免疫，免疫效果差异不大。

3 讨论

我国现有的猪瘟疫苗根据生产方式分为脾淋苗、原代细胞苗和传代细胞苗。从理论上讲，猪瘟脾淋苗是经典疫苗，属于组织苗，保护力很优秀。长期以来，生猪养殖户已经习惯使用猪瘟脾淋苗，但是由于时代的发展和生猪养殖量的增加，脾淋苗已经不能适应需求，特别是合格兔源的减少，很难满足猪瘟脾淋苗的生产需要，而且落后的生产工艺较难保证产品的稳定性[1]。本次试验，无论是脾淋苗还是细胞苗，免疫后都能迅速刺激机体产生抗体，对猪群形成一定的保护力，但不管是标准剂量还是加大剂量，细胞苗的免疫效果都优于脾淋苗，这与洪江庭[2]的试验结论一致。

母源抗体过高，对疫苗免疫存在很强的干扰作用。本试验中，母源抗体合格率、平均抗体效价较高的A1、A2、B2组首免后14 d、21 d，免疫抗体合格率、平均抗体效价不升反降，说明了母源抗体对首次免疫的干扰。因此除疫苗质量外，母源抗体水平也是猪瘟疫苗免疫成败的关键因素。据报道，母源抗体可以从细胞免疫和体液免疫2个方面对疫苗免疫产生干扰[3]，其作用机理主要是加强抗原物质的清除，对弱毒疫苗起中和作用、母源抗体对特异性抗原位点的“封闭”而阻止抗原位点与机体免疫相关细胞上的抗原受体结合等，从而导致免疫系统不能对抗原物质产生反应。

疫苗免疫效果受多方面因素影响，个体差异对疫苗免疫效果也有较大影响。本试验中，各组都出现了在母源抗体水平一致，接种同种相同剂量疫苗后，在同群饲养的情况下，同期采样，采用同种抗体检测方法检测，不同猪只免疫抗体水平却有高有低，差异较大。