乳腺癌并发糖尿病患者microRNAs103、107基因作用机制

宋鹏涛 邵霞 郑淑莺 顾栋桦

(湖州市中心医院 1病理科，浙江 湖州 313000；2乳腺外科;3内分泌科)

2型糖尿病(T2DM)病人中乳腺癌发病率逐渐上升，这两者间可能存在共同的发病机制，当前研究成果证明体内对胰岛素产生抵抗已经成为其共同存在的分子机制〔1〕。胰岛素抵抗的分子机制尚不明确，但miRNAs(miR)的异常表达会通过影响信号通路的转导使胰岛素抵抗形成，这个因素也在肿瘤病人体内存在，致使肿瘤病人发生胰岛素抵抗概率增加，同时又损伤细胞DNA使基因异常表达，刺激肿瘤的产生〔2〕。miR103、107是非编码RNA家族中的一个成员，研究〔3〕表明，其在健康血清中表达非常稳定。经实验〔4〕证明：miR103和107量多时会降低小窝蛋白-1的数量，间接产生胰岛素抵抗，T2DM由此引起，同时，T2DM患者发病时，若高水平雌激素在体内存在，当下调表达的小窝蛋白-1将雌激素受体(ER)α激活，就会引起乳腺癌，或使原有乳腺癌加快发展进程。T2DM患者乳腺癌发生危险性加大，反之乳腺癌患者也更易致使体内胰岛素抵抗。这二者的关系暂无统一说法，但miR和糖尿病与肿瘤间的关系值得研究。本实验研究miR103、107在T2DM合并乳腺癌患者体内表达及其作用机制。

1 资料与方法

1.1一般资料 2018年3月至2019年3月湖州市中心医院经检查确诊T2DM合并乳腺癌女性患者32例为研究组，年龄45～78岁；单纯女性T2DM患者32例为Dm组，年龄48～77岁；单纯女性乳腺癌患者32例为Bc组，年龄44～76岁；女性健康查体者32例为健康组，年龄47～75岁。所有患者心电图及血压正常，尿沉渣检测中示尿蛋白(-)。研究均在自愿前提下进行。

1.2研究方法 所有参与者禁止饮食8 h后采静脉血液10 ml，其中5 ml血液2 h内完成空腹血糖、雌二醇(E2)、糖化血红蛋白(HbA1c)及空腹胰岛素的测定，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。剩下的5 ml血液经离心处理后保存在冰箱里，设定温度为-70℃。

1.3miR-103、107测定方法 先摇混血清10次，于离心机(湖南省湘仪集团，TGL-16K)中离心10 s(设定温度4℃)；之后将上清液移到新试管里；再次离心10 min后向内滴加血清3倍trizol(北京智杰方远)，经过5 min震荡后常温下搁置15 min；然后经过10 min的离心后得到其上清液，1∶1加入酚氯仿摇晃均匀；再次离心后把上清液收集到新管，将3倍量异丙醇加入摇匀，在-20℃冰箱里存放一夜。将血清RNA离心30 min后沉淀，把上清液倒掉后向内添加乙醇，重复离心2次后加入灭菌蒸馏水。所用酚氯仿、异丙醇、乙醇购自深圳华昌化工。

1.4统计学分析 使用统计学软件SPSS19.0进行单因素方差分析和t检验、Pearson分析多元性逐步回归分析。

2 结 果

2.1一般资料对比 4组年龄差异无统计学意义(P>0.05)；Dm组、Bc组和研究组体重指数(BMI)、HOMA-IR、HbA1c、E2和空腹胰岛素水平均显著高于健康组(P<0.05)；研究组HOMA-IR水平明显高于Dm组和Bc组(P<0.05)；Bc组HbA1c、E2和空腹胰岛素水平显著低于研究组和Dm组(P<0.05)，见表1。

表1 4组一般资料对比结果

与健康组比较：1)P<0.05；与Dm组比较：2)P<0.05;与Bc组比较：3)P<0.05；表2同

2.2miR103、107表达差异对比 研究组miR103、107表达量明显高于Dm组、Bc组和健康组(P<0.05)，但Bc组miR103、107表达量明显高于Dm组(P<0.05)，健康组较其他3组miR103、107表达量显著低(P<0.05)，见表2。

2.34组miR103、107与BMI、HbA1c、HOMA-IR关系 BMI、HbA1c及HOMA-IR与miR103、107表达量呈正相关(P<0.01)。见图1，图2。

2.4多元线性回归分析 应变量分别为miR103和miR107，自变量分别定为BMI、HbA1c和HOMA-IR，HOMA-IR为miR103和miR107独立影响因素。见表3。

表2 4组miR103、107表达量

图2 miR107和BMI、HOMA-IR、HbA1c间关系

表3 影响miR103、107线性回归分析

3 讨 论

胰岛素抵抗不仅存在于T2DM患者体内，患有恶性肿瘤患者体内同样存在胰岛素抵抗〔6〕。当体内的雌激素和呈现高表达状态的ERα进行结合时，就会使人白血病相关蛋白(LRP)-16基因表达上调，高表达的ERα可以影响胰岛素信号的转导，引起胰岛素抵抗〔7〕。研究提示：一方面T2DM发生同时会增加乳腺癌发生危险性，另一方面乳腺癌给T2DM发生提供相应的胰岛素抵制，这二者产生应该是相互作用的〔8，9〕。MiR103、107可表达于人体的多种器官，它在肥胖、癌变的状态下存在高表达，参与肿瘤及糖尿病的产生〔10，11〕。研究显示，高表达的miR103/107通过下调小窝蛋白-1激活ERα，还能影响胰岛素信号的通路，使血清中胰岛素高表达〔12，13〕。miR103、107受胰岛素抵抗独立影响。单纯的T2DM患者、单纯的乳腺癌患者及二者合并患者血清中测到miR103、107表达，并且当两者共同存在的情况下检测量最多，同时它表达于单纯T2DM患者和单纯乳腺癌患者血清中的量比健康的人群要高〔14〕。这提示miR103、107很有可能参与T2DM合并乳腺癌发生过程。研究发现：高表达的miR103、107和HOMA-IR之间呈现正相关关系〔15〕，这和本研究一致。miR103、107不仅来自于身体内的脂肪组织，另外也存在于乳腺癌的癌组织里，因此将miR103、107作为分子因素参与乳腺癌诊断时一定要考虑是否同时存在糖尿病。