哮喘儿童血清维生素D及其免疫相关因素的分析

（福建省泉州市儿童医院呼吸科，福建 泉州 362000）

支气管哮喘是一种以慢性气道炎症和气道高反应性为特征的异质性疾病，常常引起不同程度的肺功能损害[1]。CVA是儿童慢性咳嗽的最常见病因之一[2]，它存在与CA相似的病理生理改变，约1/3CVA患者最终会发展为典型哮喘。二者均受遗传、环境、理化及感染等多因素影响，并且受多种免疫因素的调控。维生素D是一组类固醇衍生物，是最具有生物活性的激素前体，研究证实维生素D与哮喘发病有相关性。本研究探讨了哮喘儿童血清（25（OH）D）水平与肺功能及免疫功能的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2018年7月至2019年12月泉州市儿童医院呼吸专科门诊收治的CA患儿60例、CVA患儿65例作为研究对象，分别记为CA组、CVA组，均符合《儿童支气管哮喘诊断与防治指南（2016年版）》诊断标准[2]。排除营养不良、遗传代谢、免疫缺陷疾病、活动性佝偻病及心肝肾及甲状腺疾病，无长期使用糖皮质激素、免疫抑制剂等影响机体维生素D水平的服药者。另选取同期至我院儿童保健科进行体检的健康同龄儿童50例作为对照组，既往无慢性咳嗽及哮喘史，既往无过敏史，入组时体格检查均为阴性，胸片检查无异常。三组均为5～14岁儿童，CA组共60例，女32例，男28例，平均年龄（8.46±2.48）岁；CVA组共65例，女39例，男26例，平均年龄（8.11±2.29）岁；对照组共50例，其中女30例，男20例，平均年龄（7.87±1.74）岁。三组的年龄、性别等一般资料有可比性（P＞0.05）。儿童家长同意并签署知情同意书。

1.2 检验方法：所有儿童于入组当天清晨空腹状态下，由检验科护士抽取静脉2 mL，严格按照仪器及试剂盒上的说明操作。

1.2.1 25（OH）D及免疫指标的检测：使用上海西门子医学诊断产品有限公司的总维生素D测定试剂盒，采用化学发光法进行检测。使用该公司的免疫球蛋白A、G、M测定试剂盒，采用散射比浊法进行检测。使用上海碧迪医疗器械有限公司的细胞免疫流式细胞分析仪，采用流式细胞术法对样本进行检测。

1.2.2 肺功能检测：使用比利时麦迪公司生产的肺功能仪测定常规肺通气功能，测定前先由专业技术人员对测试系统进行校准，并记录受试者姓名、身高、体质量等个人信息。3组儿童采用同一立位姿势分别测定3次，取均值，结果判断符合儿童肺功能系列指南[3]。

1.3 统计学分析：采用SPSS22.0，计数资料（n/%）和计量资料（±s）分别行卡方和t检验，采用皮尔逊相关系数描述两定量变量之间的相关性，相关系数用r表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.2 三组儿童25（OH）D水平、肺功能指标的比较：CA组及CVA组25（OH）D水平均低于对照组（P＜0.05）。CA组患者大气道指标低于CVA组和健康对照组（P＜0.05），CVA组肺功能指标略低于对照组，但差异无统计学意义（P＞0.05）。CVA组、CA组及健康对照组小气道指标，CA组＜CVA组＜健康对照组，三组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.3 三组儿童体液免疫、细胞免疫指标的比较：CA组IgG、IgA均低于CVA组和健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.001）。IgM在3组间的差异无统计学意义。CA组CD4+、CD8+低于CVA组，但两组均低于健康对照组（P＜0.001）。CVA组和CA组CD3+、CD4+/CD8+的平均值接近，但均低于健康对照组（P＜0.05）。见表2。

2.4 25（OH）D与肺功能相关指标关联性分析：CA组25（OH）D水平与PEF有弱的正相关关系（P＜0.05），CA组和CVA组25（OH）D水平与FEF25、FEF50和FEF75均呈正相关关系（P＜0.05）。

表1 三组25（OH）D、肺功能比较（±s）

表1 三组25（OH）D、肺功能比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与CA组比较，#P＜0.05；与CVA组比较，△P＜0.05

表2 三组体液免疫、细胞免疫比较（±s）

表2 三组体液免疫、细胞免疫比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与CA组比较，#P＜0.05；与CVA组比较，△P＜0.05

2.5 25（OH）D与体液免疫、细胞免疫指标关联性分析：CA组25（OH）D水平与IgA呈正相关关系（P＜0.05），CA组和CVA组25（OH）D水平与CD4+、CD4+/CD8+均呈正相关关系（P＜0.05），与CD8+呈负相关关系（P＜0.05）。

3 讨 论

维生素D一直被认为是钙磷离子稳态及骨骼重塑的主要调节物质之一，25（OH）D是目前国际上公认的衡量机体营养状态及维生素D水平的可靠指标，维生素D的划分标准为：血清维生素D浓度在75～250 nmol/L为适宜，50～75 nmol/L为不足，低于50 nmol/L为缺乏[4]。维生素D缺乏对儿童具有潜在的不良健康后果[5]，维生素D及其受体在免疫调节和免疫平衡中发挥着举足轻重的作用。哮喘是一种异质性疾病，由多因素共同调控，其中免疫机制在哮喘的发病及进展中发挥着至关重要的作用。研究表明，体内维生素D水平缺乏与支气管哮喘具有相关性[6]。维生素D缺乏能有效地预测儿童哮喘的风险增加[7]。有学者研究证实维生素D可能会降低严重哮喘急性发作和医疗资源利用的风险[8]。修小莹等研究发现哮喘儿童血清维生素D水平越高，哮喘控制率越高[9]。由此说明提高维生素D水平可降低哮喘患者气道高反应性。本研究结果与流行病学研究数据相符。

维生素D能诱导调节性T细胞的产生，维生素D不足可引起哮喘儿童体内Th1与Th2、Th17与调节性T细胞比例失调，且存在双向调节作用。本研究结果显示CA患儿存在体液免疫功能紊乱。CA组、CVA组患儿维生素D水平与细胞免疫功能指标有相关性，提示维生素D水平不足或缺乏时，可导致外周血辅助T淋巴细胞CD4+/CD8+比值下降，亦使B细胞分化和成熟障碍，从而导致细胞免疫、体液免疫功能下降。

维生素D还可参与肺功能调节。肺功能检测是反映支气管哮喘的病情严重程度及控制情况的重要指标。国外研究显示哮喘患者的维生素D水平与肺功能大小气道指标呈正相关[10]。国内修小莹等研究发现哮喘儿童血清维生素D水平降低与肺功能大气道指标无相关性。本研究结果与上述报道一致，表明CA组患儿大小气道功能均有不同程度障碍，而CVA组存在小气道功能障碍，考虑与血清维生素D水平低，对以小气道受损为主的平滑肌细胞收缩影响更大有关，影响气道重塑。但是，Kim等[11]通过问卷调查并未发现哮喘儿童维生素D水平与肺功能大气道指标有显著相关性。

综上所述，CVA儿童的维生素D水平介于典型哮喘与健康儿童之间，CA及CVA儿童维生素D水平与肺功能指标、细胞免疫存在关联性。因此可推测说明提高维生素D水平，可降低哮喘患者气道高反应性，在防治哮喘的发生起到一定的作用。