滇重楼种苗质量分级标准研究

李 玛， 苏 钛， 李 云， 熊永兴， 邱 斌,4

(1.云南省药物研究所， 昆明 650111； 2.云南白药集团创新研发中心， 昆明 650111；3.云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室， 昆明 650111； 4.云南中医药大学， 昆明 650500)

滇重楼(ParispolyphyllaSmith var.yunnanensis)为百合科重楼属多年生宿根性草本植物[1]，以干燥根茎入药，其根茎含有多种甾体皂苷，占总化合物的80%以上[2]，具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效，用于痈肿、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等症，是药材重楼的原植物来源之一[4]。随着研究的深入，重楼在抗肿瘤、止血止痛、抑菌消炎、调节免疫、抗氧化、保护肝脏与肾脏等方面的作用不断被发现，目前以重楼为原料已开发有多种中药制剂用于疾病的治疗[5-7]。随着医药产业对重楼药材需求量的逐年增长，重楼药材来源已从野生资源转变为人工栽培提供。最主要的栽培方式为种子育苗移栽，滇重楼种子播种后，经过3年的生长发育，方可对种苗进行移栽。种苗是优良药材生产的源头，优质中药材种苗是提高药材产量、质量和用药安全性的根本保障[8]，有了科学的种苗质量分级标准，才能对种苗质量进行正确的测定，检验结果才有可靠性。一直以来，滇重楼种苗主要是药农自产自用，没有相应的种苗检验标准和质量标准，移栽前未进行科学的分级筛选，在实际生产中很难对滇重楼种苗的质量进行有效控制，严重影响了重楼药材的产量和质量。鉴于此，对不同种源的滇重楼种苗质量分级进行系统的研究，以期为滇重楼的规范化栽培及种苗质量标准的制定提供依据。

1 材 料

实验材料为在云南省大理州、丽江市各滇重楼栽培区收集的成熟滇重楼种苗23批次(见表1)，每个批次100株。

2 方 法

移栽前，随机选取各批次滇重楼种苗30株，分别测定每株种苗的株高、株重、地径、根茎直径、不定根数、根茎重。株高测定采用钢卷尺量取根茎基部至茎顶端的长度；株重测定采用电子天平称取种苗整株重量；地径测定采用游标卡尺量取种苗茎基部1 cm处的直径；根茎直径测定采用游标卡尺量取根茎最粗处直径；不定根数测定为数取根茎上生出细根的条数；根茎重测定采用电子天平称取地下部分的重量。运用SPSS 22.0统计分析软件分别对上述指标进行统计描述、相关性分析和聚类分析，最后根据聚类分析结果和生产实际按照最低级原则制定滇重楼种苗质量分级标准。

3 结果与分析

3.1 滇重楼种苗质量指标测定结果

23批不同来源的滇重楼种苗质量指标检测结果见表2。

表1 滇重楼种苗材料采集信息

编号采集时间/(年-月)采集地点经纬度海拔/m12017-09大理云龙25°57'28″N99°17'52″E291522017-09大理云龙26°17'28″N99°22'38″E291032017-09丽江玉龙26°44'56″N100°1'14″E283042017-09丽江玉龙26°44'56″N100°1'15″E283052017-09丽江玉龙26°45'56″N100°1'16″E283062017-09丽江玉龙26°38'56″N100°1'17″E283072017-09丽江玉龙26°47'56″N100°1'17″E283082017-09丽江永胜26°2'22″N100°38'19″E286092017-09丽江永胜26°48'12″N100°50'52″E2680102017-09丽江永胜26°49'12″N100°50'52″E2680112017-09丽江永胜26°57'14″N100°31'14″E2670122017-09丽江玉龙26°55'14″N100°31'15″E2670编号采集时间/(年-月)采集地点经纬度海拔/m132017-09丽江玉龙26°46'56″N100°1'17″E2830142017-09香格里拉维西24°57'14″N100°31'15E″3000152017-09大理巍山23°48'12″N100°50'52″E2680162017-09大理云龙25°57'28″N99°17'52″E2915172017-09大理云龙26°17'28″N99°22'38″E2910182017-09大理云龙26°116'28″N99°22'52″E2915192017-09大理云龙26°15'28″N99°22'52″E2915202017-09大理下关24°17'28″N99°22'38″E2910212017-09大理下关24°46'56″N100°1'14″E2830222017-09大理永平27°46'56″N100°1'15″E2830232017-09大理祥云24°46'56″N100°1'16″E2830

表2 滇重楼种苗检验结果

编号株高/cm地径/mm根茎直径/mm株重/g不定根/条根茎重/g111.60±1.701.90±0.3710.43±2.192.43±1.048.28±2.211.60±0.81214.76±3.142.53±0.5810.78±2.123.88±1.778.45±2.552.54±1.19311.52±4.382.72±0.6410.13±1.473.06±1.2311.09±3.581.68±0.65412.33±2.672.22±0.3315.70±1.835.27±2.3211.43±2.113.53±1.04515.09±2.592.27±0.4014.84±2.145.45±1.8813.10±2.863.87±1.42613.82±3.762.84±0.4416.82±2.877.30±2.5115.88±3.495.41±1.9679.79±2.052.10±0.299.97±1.332.45±0.799.46±3.011.63±0.53812.05±2.743.12±0.5613.55±2.425.85±2.189.85±3.584.03±1.67917.95±4.474.06±0.6917.73±3.0111.79±4.3815.97±4.147.71±2.891013.10±1.902.15±0.319.71±2.582.48±0.9611.00±2.511.49±0.681110.22±1.792.11±0.2414.55±1.553.85±0.8512.25±2.492.91±0.651217.74±3.052.84±0.4613.85±2.706.22±2.4814.50±3.093.94±1.811316.83±5.422.34±0.4411.34±2.054.29±2.108.80±2.892.56±1.441420.96±3.713.09±0.6115.97±3.519.45±5.4811.65±3.905.75±3.30157.86±1.731.48±0.277.75±1.011.01±0.345.21±1.380.69±0.241613.42±2.381.88±0.2911.24±2.562.52±1.1810.35±2.291.70±0.851712.92±2.884.02±0.6016.11±2.538.61±3.2211.08±3.745.76±2.461811.96±2.602.35±0.429.73±1.983.14±1.328.30±2.212.02±0.871914.85±3.782.51±0.5212.34±2.994.27±2.688.03±2.642.70±1.83209.24±2.481.96±0.359.76±1.751.93±0.907.40±1.881.25±0.612110.55±2.242.28±0.3811.33±2.092.76±1.189.10±2.181.73±0.82224.47±0.882.80±0.519.30±1.211.95±0.568.97±3.001.37±0.442318.85±3.893.48±0.6218.92±3.5312.78±6.4113.10±3.608.22±4.40

3.2 方差分析及相关性分析

统计描述和方差分析结果(表3)显示，各质量指标变异幅度分别为：株高3.20～34.20 cm，地径1.03～5.92 mm，根茎直径1.36～27.11 mm，株重0.40～35.10 g，不定根数2.00～26.00条，根茎重0.10g～25.80 g，不同来源的种苗株高、地径、根茎直径、株重、不定根、根茎重这6项指标均达到极显著差异水平(p<0.01)，说明这些指标均可作为滇重楼种苗质量分级标准的依据。

相关性分析结果(表4)表明：除株高与地径呈显著相关外，其余质量指标间均为极显著相关关系，其中，株重与根茎重和根茎直径的相关系数分别为0.980和0.960，根茎重和根茎直径相关系数为0.962。

表3 滇重楼种苗各质量指标描述统计和方差分析

指标最大值最小值均值标准差F株高/cm34.203.2013.324.8849.56**地径/mm5.921.032.610.8264.16**根茎直径/mm27.111.3612.873.9257.13**株重/g35.100.408.714.3251.36**不定根数/条26.002.0010.764.0226.51**根茎重/g25.800.101.772.8547.63**

注：“**”表示p<0.01。

结合方差分析和相关性分析结果，为了便于生产实施，采用株重、根茎重、根茎直径指标进行滇重楼种苗分级标准的研究。

表4 各指标相关性分析

指标株高地径根茎直径株重不定根数根茎重株高1.000地径0.637*1.000根茎直径0.761**0.857**1.000株重0.802**0.913**0.960**1.000不定根数0.639**0.655**0.817**0.736**1.000根茎重0.784**0.907**0.962**0.980**0.763**1

注：“**”极显著(p<0.01，双尾)，“*”显著(p<0.05，双尾)。

3.3 滇重楼种苗质量分级标准的制定

采用K类聚类分析方法，对滇重楼种苗的株重、根茎重、根茎直径3个质量指标测定结果进行分析，得到滇重楼种苗各分级指标的3个最终聚类中心(见表5)。

表5 K类中心聚类的最终聚类中心值

类别株重/g根茎重/g根茎直径/mm1类10.666.8617.182类5.663.9514.893类2.781.7710.29

以滇重楼种苗株重、根茎重、根茎直径3项指标的聚类中心值作为滇重楼种苗分级标准的参考值，结合滇重楼种苗的生产实际和可操作性，划分出滇重楼种苗质量分级标准，结果见表6。

表6 滇重楼种苗质量分级划分

指标级别一级二级三级株重(g)≥10.00≥5.00≥2.00根茎重(g)≥7.00≥4.00≥1.00根茎直径(mm)≥17.00≥14.00≥10.00

4 讨 论

在中药材的规范化栽培过程中，优良的种子和种苗是提高药材产量和质量的重要前提和保障[9]。正确的中药材种子种苗质量分级标准是获得高产优质药材最主要的前提条件[10]。与农作物种苗标准相比，我国中药材种苗标准研究相对滞后，目前仅有人参种苗[11]通过研究并颁布了国家标准。随着国家中药材标准化战略的推进，中药材种子种苗标准研究的重要性日益凸显，先后有学者对高良姜[12]、广藿香[13]、知母[14]、金钱草[15]、祁菊花[16]等药材的种苗标准进行了研究，并取得了一定的成果。本研究根据滇重楼不同批次种苗质量指标的测定结果，将滇重楼种苗分为3个等级，种苗的株重、根茎重、根茎直径作为滇重楼种苗质量分级的主要指标，能直观的反应种苗的大小、形状和储存生物量的多少，在生产实践中具有一定的可操作性。在实际生产中，选择种苗时，除考虑分级指标外，还应考虑种苗的外观形态是否完好，是否存在机械损伤、霉变、虫蛀、病虫害感染等因素。

云南作为滇重楼重要的道地产区，已形成了相当规模的规范化种植基地，并向全国提供重楼药材，因此，从源头上管控种苗的质量就显得尤为重要，本标准的制定，能够为滇重楼生产经营者判断种苗的优劣提供理论依据，同时为规范滇重楼栽培过程，促进重楼药材生产水平的提高提供有力的保障。