一例小鹅瘟的诊断与治疗

2020-06-02王丽芹邢程卢松岩

吉林畜牧兽医 2020年4期

王丽芹，邢程，卢松岩

1.吉林省动物疫病预防控制中心，吉林长春 130062；2.吉林省磐石市动物疫病预防控制中心，吉林磐石 132300

小鹅瘟，又称鹅细小病毒感染，是由鹅细小病毒引起的一种急性或亚急性的败血性传染病[1]。主要经消化道传染，与病鹅直接接触或接触病鹅排泄物污染的场地、设备用具、饮水和饲料可感染。主要感染雏鹅和雏番鸭，雏鸡和雏鸭等具有较强抵抗力[2]。1956年，方定一教授等人发现小鹅瘟，并于1961年成功分离病毒。此后，欧洲、亚洲等多个养鹅业发达的国家相继报道小鹅瘟流行，我国广东、浙江、安徽、四川、内蒙古、河北、吉林等多省份相继报告小鹅瘟疫情，造成了巨大的经济损失，严重危害鹅养殖业持续健康发展[3]。

2019年8月，吉林省磐石市某养鹅场引进10日龄雏鹅5 000只，饲养至15日龄时，部分雏鹅精神萎靡，食量减少或不食，流浆液性鼻液，排灰白色水样稀粪，个别出现抽搐、瘫痪等神经症状，感染数量日益增多并不断死亡。剖检可见肝脏肿大、质脆，小肠黏膜充血出血，肠腔内有大量的纤维素性凝块和碎片；未见小肠中下段明显膨大，肠腔内形成“腊肠状”栓子等小鹅瘟典型病理变化。发病之初，养鹅场投放头孢拉定进行治疗，症状无明显改善。为进一步明确病原，养鹅场采集病死雏鹅组织样品进行实验室检测。

1 检测方法

1.1 材料及处理

采集病死雏鹅肝脏、脾脏、肠管等组织作为病料，1:5加入无菌PBS置入离心管，经反复冻融后研磨制成细胞悬液，-20 ℃保存备用。

1.2 试剂与仪器

无菌PBS，DNA提取试剂盒，PCR扩增试剂盒，PCR产物回收试剂盒，PCR仪，电泳仪，凝胶成像系统。

1.3 核酸提取

使用DNA提取试剂盒，提取组织悬液DNA，按说明书步骤操作，洗脱产物-20 ℃保存备用。

1.4 引物设计

根据GenBank中小鹅瘟B株VP3基因设计两对引物，引物序列见表1。

表1 PCR引物序列

1.5 PCR扩增

使用50 μL体系进行反应，体系中包含核酸提取液 2 μL，DNTP 2 μL，Buffer 2 μL，上、下游引物各 1 μL，Taq 酶 0.5 μL，ddH2O 38.5 μL。反应条件：95 ℃预变性5min，94 ℃预变性1 min,51 ℃退火 1 min，72 ℃延伸2 min，30个循环后72 ℃ 10 min，4 ℃保存。经1%琼脂糖凝胶电泳分析结果。

2 诊断

PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳显示经扩增获得大小为173 bp的产物，与预期大小相同，经切胶回收鉴定，可判定鹅细小病毒核酸阳性。

通过临床症状、病理变化和PCR方法检测结果，确诊为小鹅瘟。

3 治疗

做好病死鹅无害化处理，对育雏舍、设备用具使用聚维酮碘和稀戊二醛消毒，健康雏鹅与发病雏鹅分群且隔离饲养，全部雏鹅一鹅一针头地注射小鹅瘟精制蛋黄抗体，饮水中添加板蓝根多糖、黄芪多糖，饲料中添加硫酸粘杆菌素，用以增加鹅群免疫力，控制继发感染。经过治疗，雏鹅20日龄时，症状明显改善，无新增发病，雏鹅群逐渐恢复健康，存活雏鹅4 500只。