P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP在阿尔茨海默病患者中的表达及意义

黎敏 叶丽君 喻长法 傅攀 薛玉峰

[摘要] 目的 探讨血清磷酸化Tau蛋白（ P-tau-181）、白细胞介素-1β（IL-1β）和尿液中阿爾茨海默病（AD）相关神经丝蛋白（AD7c-NTP）在AD患者中的表达及其临床意义。 方法 选取 2017年1月～2019年6月在浙江省台州市第一人民医院神经内科住院的76例AD患者为AD组，按照临床痴呆量表评分将其分为轻度组26例，中度组29例，重度组21例。另选同期体检的健康者35名设为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清中P-tau-181、IL-1β和尿液中的AD7c-NTP，比较各组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达水平，分析P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP对AD的诊断效能。 结果 AD组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达量高于对照组（均P < 0.05）;重度组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达量高于中度组、轻度组，中度组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达量高于轻度组（均P < 0.05）;P-tau-181对AD的诊断曲线下面积（AUC）为0.898，IL-1β的AUC为0.851，AD7c-NTP的AUC为0.847，均具有较高的诊断价值。 结论 AD患者P-tau181、IL-1β和AD7c-NTP表达量升高，可作为AD临床诊断的检测指标，同时还能对病变的严重程度进行分级，具有重要的临床意义。

[关键词] 阿尔茨海默病;磷酸化Tau蛋白;白细胞介素-1β;阿尔茨海默病相关神经丝蛋白

[中图分类号] R749.16          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2020）04（b）-0116-04

Expression and significance of P-tau-181， IL-1β and AD7c-NTP in patients with Alzheimer′s disease

LI Min1   YE Lijun2   YU Changfa3   FU Pan1   XUE Yufeng1▲

1.Department of Neurology， the First People′s Hospital of Taizhou， Zhejiang Province， Taizhou   318020， China; 2.Department of Blood Transfusion， the First People′s Hospital of Taizhou， Zhejiang Province， Taizhou   318020， China; 3.Department of Laboratory， the First People′s Hospital of Taizhou， Zhejiang Province， Taizhou   318020， China

[Abstract] Objective To explore the expression and clinical significance of serum phosphorylated tau protein （P-tau-181）， interleukin-1β （IL-1β） and urinary Alzheimer′s disease （AD） associated neurofilament protein （AD7c-NTP） in patients with AD. Methods A total of 76 patients with AD were selected as the AD group who were hospitalized in the Department of Neurology， Taizhou First People′s Hospital from January 2017 to June 2019. According to the clinical dementia scale score， they were divided into 26 cases in mild group， 29 cases in moderate group and 21 cases in severe group. A total of 35 healthy people who underwent physical examination at the same time were selected as the control group. Serum P-tau-181， IL-1β and AD7c-NTP in urine were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The expression levels of P-tau-181， IL-1β and AD7c-NTP were compared in each group， and the diagnostic efficacy of P-tau-181， IL-1β and AD7c-NTP in AD were analyzed. Results The expressions of P-tau-181， IL-1β， and AD7c-NTP in AD group were higher than those in control group （all P < 0.05）. The expression levels of P-tau-181， IL-1β， and AD7c-NTP in the severe group were higher than those in the moderate and mild groups. The expression levels of P-tau-181， IL-1β， and AD7c-NTP in the moderate group were higher than those in the mild group （all P < 0.05）. The area under curve （AUC） of P-tau181 in the diagnosis of AD was 0.898， the AUC of IL-1β was 0.851， and the AUC of AD7c-NTP was 0.847. Conclusion The expression of P-tau-181， IL-1β and AD7c-NTP in AD patients is elevated， which can be used as a detection index for clinical diagnosis of AD， and it can also classify the severity of lesions， which has important clinical significance.

[Key words] Alzheimer′s disease; Phosphorylated tau protein; Interleukin-1β; Alzheimer′s disease-associated neurofilament protein

阿尔茨海默病（AD）是以进行性加重的智力衰退为临床表现的神经病变疾病，是老年性痴呆发生的最主要原因[1]。AD致病的主要原因是大脑中Tau蛋白过度磷酸化导致神经元缠结和大脑中β淀粉样蛋白大量沉积构成老年斑，进而导致神经元功能异常[2]。现有的AD诊断方法主要是核磁共振成像（MRI）、遗传检测一些蛋白质的功能或其他病理检测。这些方法费用高，且不适合早期和大量人群筛查。随着AD病因研究的不断深入，侵入性较小、成本较低和高通量筛选人群患AD的风险的方法显得尤为迫切[3]。本研究旨在研究血清磷酸化Tau蛋白（P-tau-181）、白细胞介素-1β（IL-1β）和尿液中AD相关神经丝蛋白（AD7c-NTP）在AD患者中的表达及其临床意义，报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月～2019年6月在浙江省台州市第一人民医院（以下简称“我院”）神经内科住院的76例AD患者为AD组。纳入标准：①AD患者的诊断标准参考《精神病诊断和统计手册》[4]中的标准;②年龄≥60岁;③记忆能力或认知功能下降≥6个月;④与研究对象签署知情同意书。排除标准：①脑血管病史;②既往具有精神疾病病史;③听说功能障碍;④合并严重的肝肾功能疾病、免疫性疾病、感染性疾病等。其中男40例，女36例;年龄60～88岁，平均（75.0±12.0）岁。按照临床痴呆量表[5]评分将其分为轻度组26例，中度组29例，重度组21例。另选同期的健康体检者35名设为对照组，其中男19名，女16名;年龄60～87岁，平均（73.5±11.5）岁。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

清晨空腹采集静脉血5 mL，3000 r/min（离心半径8 cm）离心10 min，取上清液;尿液5 mL，3000 r/min离心10 min，取上清液，-80℃冰箱保存待检。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中P-tau-181和IL-1β、尿液中AD7c-NTP。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，两组间比较采用t检验;计量资料以例数表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较

两组性别、年龄、受教育年限、高血压、吸烟史和空腹血糖比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。见表1。

表1   两组一般资料比较（x±s）

2.2 两组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达量比较

AD组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达量高于对照组（均P < 0.05）。见表2。

表2   两组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达比较（ng/L，x±s）

注：P-tau-181：磷酸化Tau蛋白;IL-1β：白细胞介素-1β;AD7c-NTP：阿尔茨海默病相关神经丝蛋白;AD：阿尔茨海默病

2.3不同程度AD患者P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达量比较

重度组P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达量高于中度组、轻度组，中度组P-tau181、IL-1β和AD7c-NTP表达量高于轻度组（均P < 0.05）。见表3。

表3   不同程度AD患者P-tau181、IL-1β

和AD7c-NTP表達量比较（ng/L，x±s）

注：轻度组比较，aP < 0.05;与中度组比较，bP < 0.05。P-tau-181：磷酸化Tau蛋白;IL-1β：白细胞介素-1β;AD7c-NTP：阿尔茨海默病相关神经丝蛋白;AD：阿尔茨海默病

2.4 P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP对AD的诊断效能评价

P-tau-181对AD的诊断曲线下面积（AUC）为0.898，IL-1β的AUC为0.851，AD7c-NTP的AUC为0.847，均具有较高的诊断价值。见表4和图1。

3讨论

随着人口老龄化的加速，AD的发病率呈上升趋势，目前进行性痴呆影响着全球3560万人，预计到2050年将增长两倍多，AD已经成为全球公共卫生问题[6]。因此，早发现、早诊断，争取更多治疗或干预时间延缓AD的进展十分关键。

P-tau-181蛋白是Tau蛋白磷酸化过程产生的中间产物，当Tau蛋白被过度磷酸化，丧失维持微管运输的功能，并形成神经纤维缠结，导致神经元细胞受损，使患者出现认知功能障碍[7]。许多学者[8-11]认为，脑脊液P-tau-181可作为AD患者诊断的标志物。但脑脊液采集时对患者的损伤太大，有些患者不愿意配合。Shekhar等[12]采用等离了共振技术，检测患者血清中P-tau-181的水平，证实AD患者P-tau-181浓度比对照组更高。Tatebe等[13]用ELISA测定AD患者血浆中的P-tau-181，AD患者P-tau-181显著高于对照组，血浆P-tau-181的水平与脑脊液P-tau-181的水平显著相关，提示血浆P-tau-181是脑AD病理学的有前途的生物标志物。本研究结果显示，轻度组、中度组及重度组血清中P-tau-181蛋白的水平依次升高（P < 0.05），血清中P-tau-181蛋白的浓度异常情况与AD的严重程度有关，与郝建华等[14]报道一致。

IL-1β是一種常见的多功能免疫调节因子，在多种细胞中存在，对其他炎症因子的表达起到诱导作用。对AD患者脑中IL-1β表达的研究发现，AD患者脑内激活的小胶质细胞分泌出的IL-1β可以达到同龄健康对照组的30倍[15]。IL-1β结构上包含了多个巯基结构，在结合脑组织细胞膜糖蛋白表面受体的同时，促进了自身免疫复合物沉积导致的小胶质细胞的吞噬作用，加剧病情进展[16]。AD患者IL-1β血清水平显著上调，炎症在AD整个疾病过程中变得很明显[17]。吴琼等[18]研究结果显示，AD患者血清中IL-1β水平显著高于对照组，与其发病有密切的关系，是其对应的致病因子。IL-1β过度表达可激活丝裂原活化蛋白激酶-P38信号通路和糖原合成激酶3，进而诱导Tau蛋白异常磷酸化和合成神经原纤维缠结[19-22]。

AD7c-NTP属神经丝蛋白家族的一个成员，是由375个氨基酸组成的基因序列，大小为41 kD，在神经元中表达，定位于神经细胞轴突，参与脑神经元的修补、再生和凋亡等[23]。Wang等[24]建立人工神经网络模型认为AD7c-NTP对于早期诊断具有临床价值，具有较高的准确性和诊断效率，可以作为一种低成本、实用的大量人群AD筛查和诊断工具。AD患者AD7c-NTP表达水平的增加可能与其介导AD神经退行性变化中细胞凋亡级联反应有关，脑组织中AD7c-NTP的免疫反应主要发生在退行性神经元、营养不良的轴突和神经纤维网等磷酸化Tau蛋白呈阳性的区域，其可能参与了Tau蛋白的累计过程，引起细胞骨架损伤进而促进神经炎的发生和脑细胞的凋亡[25-26]。

综上所述，AD患者P-tau-181、IL-1β和AD7c-NTP表达明显升高，可作为AD临床诊断的检测指标，同时还能对病变的严重程度进行分级，具有重要的临床意义。

[参考文献]

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