短片藁本的生药学研究
2020-05-25李学芳邱斌
李学芳, 邱斌
(云南中医药大学,云南昆明 650500)
短片藁本为伞形科(Umbelliferae)蒿本属(Ligusticum)植物短片蒿本(Ligusticum brachylobum Franch.)的根[1],又名前胡,也称旱前胡、川防风、水前胡,为治疗感冒风寒发汗要药[2-3]。其根味甘、辛,性温,有发表、镇痛、袪风渗湿的功能,用于外感、头痛昏眩、关节疼痛、四肢拘挛、目赤疮疡及破伤风等病证[4]。文献报道,在云南、四川及广西等省有将短片藁本作《中华人民共和国药典》所收载的前胡药材药用[5]。其根含有香豆素类化合物[6]及挥发油[7]。为了能更好地开发利用短片藁本,我们对其进行了初步系统的生药学研究,为其鉴定及深入研究提供一定的理论依据,现将研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 药材本品采自云南昆明、丽江、大理、香格里拉,经中国科学院昆明植物研究所陶德定副研究员鉴定为伞形科蒿本属植物短片蒿本(Ligusticum brachylobum Franch.)的根。
1.2 试剂无水乙醇[分析纯,利安隆博华(天津)医药化学有限公司];TO 型生物制片透明剂(广西岑溪市松香厂);番红(上海三爱思试剂有限公司);固绿(上海化学试剂站);中性树胶(无锡市江原实业技贸公司);石蜡(56~58 ℃,上海永华石蜡有限公司);乙酸乙酯(分析纯,上海申博化工有限公司);甲酸(分析纯,上海申博化工有限公司);石油醚(分析纯,60~90 ℃,广东光华化学厂有限公司);甲醇(分析纯,国药集团化学试剂有限公司)。
1.3 仪器TS-12H+生物组织自动脱水机、BM-Ⅵ生物组织冷冻包埋机、QP-Ⅲ生物组织切片机、CS-Ⅳ型生物组织摊片烤片机、MD-Ⅱ型生物组织刀刃磨机(湖北孝感仪器公司);FA2004N 电子分析天平(上海分析仪器公司);GZX-9030 MBE 数显鼓风干燥箱、101A-2E 电热鼓风干燥箱(上海通用仪器公司);Micr E400 Nikon 显微镜、数码显微照相机(日本尼康公司)。
1. 4 方法按传统植物分类方法和药材鉴别方法,制作短片藁本的根横切面永久制片及粉末临时装片等方法进行观察比较、描述分析。并按常规方法进行化学成分鉴别预试验及薄层色谱试验。
2 结果
2.1 性状鉴别图1 结果显示:本品呈圆锥形或纺锤形,长9~25 cm,直径1~2.5 cm,有分枝。残留根茎粗大,直径1~3 cm,密被粗、硬纤维状叶鞘残基。表面浅灰褐色或灰黄色,上部有密集的细环纹,下部有皱纵沟及横向皮孔。质硬,不易折断,断面不整齐,淡黄色,皮部与木质易分离,皮部具有少数黄棕色油点,木部具有放射状纹理。气芳香而浊,味微辛。
图1 短片藁本外观Figure 1 The appearance feature of Ligusticum brachylobum Franch
2.2 显微鉴别
2. 2. 1 根横切面 图2 结果显示:木栓层细胞10 余列。皮层狭窄,散有椭圆形油管。韧皮部宽广,有裂隙;韧皮射线明显,向外渐弯曲;油管较多,由外向内逐渐变小。形成层成环。木质部较发达,近形层处木纤维断续排列成环,导管单个或数个成群,分布较密集,略呈放射状排列。本品薄壁细胞中含淀粉粒。
图2 短片藁本(根)横切面图Figure 2 The cross section manifestation of Ligusticum brachylobum Franch.(root)
2.2.2 粉末特征 图3 结果显示:粉末呈黄棕色或棕色。木栓细胞表面观类方形或类长方形,壁薄。淀粉粒类圆形,直径3~10 μm,脐点呈点状或裂缝状,层纹不明显;复粒由2~4 个分粒组成。油管碎片呈管状,内含黄棕色条状分泌物。主导管为网纹及具缘纹孔导管,直径20~65 μm。木纤维细长,两端渐尖,壁较厚,纹孔较少。
2. 3 理化预试验参照天然药物化学实验指导[8]中预试液的制备及相应方法进行理化预试验。结果表明,短片藁本主要含蛋白质、皂苷、苷类、黄酮类、内酯、酚性成分、甾醇、萜类、挥发油、油脂、香豆素及其苷类等成分。
2.4 薄层鉴别
2.4.1 供试液的制备 取4 个不同产地样品粉末各10 g,加甲醇100 mL 超声30 min。滤过,收集滤液,取滤液60 mL,加入60 mL 的石油醚萃取,放出甲醇层,以作供试液。
2. 4. 2 展开剂的筛选 提取物分别以石油醚∶乙酸乙酯(7∶3)、石油醚∶乙酸乙酯(7∶4)、石油醚∶乙酸乙酯(7∶5)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶8)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶10)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶12)、乙酸乙酯∶石油醚(3∶16),乙酸乙酯∶石油醚(3∶17)等为展开剂进行展开。结果以石油醚—乙酸乙酯(16∶3)展开的重现性较好。
图3 短片藁本(根)粉末特征图Figure 3 The power features of Ligusticum brachylobum Franch.(root)
2. 4. 3 试验结果 按照《中华人民共和国药典四部》(2015 年版)[9]薄层色谱的基本要求,吸取上述4 个不同产地药材溶液各10 μL,分别于同一硅胶G 薄层板上点4 个点,以乙酸乙酯—石油醚(3∶16)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254 nm)下检视。图4结果显示:昆明、丽江、大理、香格里拉等4个不同产地的药材供试液在同一硅胶G 板相应位置上显相同颜色的荧光斑点,分离效果较好。
3 讨论
短片藁本始载于《滇南本草》,为感冒发热用药。该药资源丰富,疗效明确,具有较好的研究开发价值。
通过对短片藁本药材性状、显微特征的研究,结果显示,其药材性状及显微鉴别特征明显,具有较好的鉴定意义,可为其与同属其他植物的鉴定提供了理论依据。
薄层色谱试验结果图片清晰,数据准确,分离度、重现性及稳定性均较好,为该药的鉴定、药材标准制定提供研究基础。
图4 4个不同产地短片藁本的薄层色谱图Figure 4 The thin-layer chromatogram for Ligusticum brachylobum Franch 4 different habitats
从化学大类成分预试结果可知,其所含化学大类成分较多,可对其进一步深入研究和开发。