剖宫产产妇术后感染患者血清TNF-α、PCT、IL-1β水平的变化及其意义

仵晓峰 王冉 李宛玲

临床上剖宫产术后感染的发生，能够导致孕产妇致残率的上升，增加了远期不能妊娠结局的发生风险［1-2］。对于剖宫产术后感染的早期诊断具有重要的意义，其能够在指导疾病的早期抗感染治疗方面发挥作用。血清学细胞因子的检测，可以为临床上相关感染性基本的诊疗提供参考。肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是炎症性相关因子，其能够通过诱导下游白细胞介素家族因子的激活，进而促进相关细胞因子对于子宫内膜的损伤［3］；降钙素原（procalcitonin，PCT）是病原体感染的指标，在细菌或者混合感染的患者中，脂多糖的释放能够显著促进PCT 的上升［4］；白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）是白细胞介素家族成员，其能够通过提高下游炎症性信号通路的激活，最终促进剖宫产术后感染的发生［5］。为了揭示TNF-α、PCT、IL-1β 的表达及其与剖宫产产后感染的关系，从而为临床上剖宫产产后感染的诊断提供参考，本次研究选取本院产科确诊剖宫产后并发感染的产妇作为病例组，探讨了TNF-α、PCT、IL-1β 的表达及其诊断学价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2015年1月至2017年12月本院产科确诊的80例剖宫产后并发感染的产妇作为病例组，同期实施剖宫产但未发生感染的160例产妇作为对照组。年龄22～38 岁，平均（28.4±2.6）岁，分娩孕周（38.2±1.0）周；其中初产妇62例、经产妇18例；其中41例患者经细菌学培养阳性（铜绿假单胞菌12例、鲍氏不动杆菌8例、肺炎克雷伯杆菌4例、大肠埃希菌4例、金葡菌6例、表皮葡萄球菌3例、其他4例）。年龄22～39 岁，平均（28.7±2.3）岁，分娩孕周（38.4±1.3）周；其中初产妇117例、经产妇43例。入选标准：①所有产妇均具有典型的临床剖宫产指征，在本院实施剖宫产手术；②经血清学、细菌培养等实验室检查结合患者的临床表现等确诊为产后感染；③本研究符合《赫尔透辛基宣言》相关伦理及保密原则。④所有患者及家属均已签署知情同意书。排除标准：①剖宫产术前伴有感染性疾病；②伴有免疫功能障碍、HIV 感染的产妇；③合并其他系统的重大疾病。

1.2 检测方法

采用一次性静脉血采集器进行肘部静脉血采集，采集5 mL 静脉血后自然放置，取上清液体进行检测。采用贝克曼库尔特公司UniCel DxI 800免疫发光仪器进行PCT 的检测，配套试剂盒购自北京九强生物公司；采用ELISA 法进行TNF-α、IL-1β的检测，采用十字交叉的方法进行抗原浓度的测定，采用碳酸盐缓冲液进行抗原稀释，加入96 孔的酶标板中，盖好酶标板盖后置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3 次，每次5 min，轻轻叩击酶标板甩干。每孔中加入5%的脱脂牛奶200 μL，置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3 次，每次5 min，加入稀释好的抗体（购自abcum 公司 批号：20083845 浓度1∶800），蒸馏水冲洗3 次，每次5 min，每孔中加入100 μL 的底物，显色后在酶标仪上进行吸光度的检测。

1.3 统计学方法

采用SPSS 21.0 软件进行统计学处理，采用（）表示符合正态分布的计量资料，两组间分析采用t检验；P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组产妇的血清TNF-α、PCT、IL-1β 动态变化趋势比较

实验结果显示，病例组和对照组的血清TNF-α、PCT、IL-1β 水平在产后第1 天至第5 天的结果整体上存在差异，其中在产后第1 天，病例组和对照组的血清TNF-α、PCT、IL-1β 水平差异均不具有统计学意义（P＞0.05），病例组在产后第1、3、5 天，血清TNF-α、PCT、IL-1β 水平呈显著升高的趋势，在产后第3、5 天局高于对应时间点的对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；见表1。

表1 两组产妇的血清TNF-α、PCT、IL-1β 动态变化趋势比较（±s）Table1 Comparison of dynamic trends of serum TNF-α，PCT，IL-1β in two groups of women（±s）

表1 两组产妇的血清TNF-α、PCT、IL-1β 动态变化趋势比较（±s）Table1 Comparison of dynamic trends of serum TNF-α，PCT，IL-1β in two groups of women（±s）

PCT（μg/mL）TNF-α（ng/mL）产后第1 天1.55±0.32 1.48±0.29 1.702 0.090组别病例组对照组t 值P 值产后第3 天2.67±0.69 1.50±0.31 18.125 0.000产后第5 天3.04±0.55 1.44±0.38 26.334 0.000产后第1 天0.81±0.27 0.78±0.24 0.875 0.382产后第3 d 2.23±0.69 0.63±0.20 27.184 0.000产后第5 天2.52±0.77 0.47±0.15 32.528 0.000 IL-1β（pg/mL）产后第1 天0.81±0.27 0.78±0.24 0.875 0.382产后第3 天2.23±0.69 0.63±0.20 27.184 0.000产后第5 天2.52±0.77 0.47±0.15 32.528 0.000

2.2 产后第3 天血清TNF-α、PCT、IL-1β 水平监测鉴别诊断产后感染的临床价值

依据产后第3 天血清TNF-α、PCT、IL-1β 水平绘制ROC 曲线，结果显示血清PCT、TNF-α、IL-1β水平鉴别诊断产后感染的AUC 值分别为0.888、0.766、0.751，对应的诊断临界值分别为1.26 μg/mL、2.00 ng/mL、2.51 pg/mL（P＜0.05）；见图1。

图1 产后第3 天血清TNF-α、PCT、IL-1β 水平诊断产后感染的ROC 曲线Figure1 ROC curve of serum TNF-α，PCT，IL-1β on the third day of postpartum diagnosis of postpartum infection

3 讨论

流行病学研究表明，剖宫产术后感染的发病率可超过859/1 万孕产妇左右［6］，在合并有基础性糖尿病或者妊娠期并发症的孕产妇中，剖宫产术后感染的发病率可进一步的上升［7］。长期的临床随访观察研究发现，剖宫产术后感染孕产妇发生晚期产后出血的风险可超过5%以上，同时孕产妇的病死率也明显的上升［8］。血清学指标的检测，能够具有简便和经济的特点，在感染性疾病的诊断和预后评估过程中均具有一定的价值。现阶段主要通过超敏C 反应蛋白或者白细胞介素6 进而辅助早期诊断剖宫产术后感染，但依靠超敏C 反应蛋白等评估剖宫产术后感染发病风险的灵敏度不足40%，其诊断剖宫产术后感染发病的假阳性率较高［9］。

肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor，TNF）是一种能够直接杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无明显毒性的细胞因子，分为TNF-α，TNF-β 两种，TNF-α 是炎症性相关因子，其不仅能够通过诱导下游单核细胞的激活，同时还能够增加其对于子宫内膜或者宫颈组织的浸润程度，加剧盆腔脏器的炎症性损害，TNF-α 还能够通过激活体内的金属机制蛋白酶因子，提高其对于细胞间质成分的分解，从而提高了炎症因子的扩散风险；PCT 是一种蛋白质，当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT 不会升高，上升的PCT 能够提高其对于中性粒细胞的激活能力，加剧病原体的入侵风险；IL-1（interleukin-1，IL-1）又名淋巴细胞刺激因子，主要由活化的单核-巨噬细胞产生，有IL-1α 和IL-1β 两种存在形式，IL-1β 是白细胞介素家族因子，其对于子宫剖宫产术后切口部位的浸润，能够影响到局部剖宫产切口的感染微环境，部分研究者探讨了PCT 的表达与剖宫产术后感染的关系，认为PCT 的表达上升与剖宫产术后感染密切相关［10］，但缺乏对于IL-1β等的分析研究。

本次研究结果提示了TNF-α、PCT、IL-1β 的表达浓度的逐渐上升与剖宫产术后感染密切相关，这可以从下列几个方面进行理解［11-14］：①剖宫产术后感染的孕产妇，其体内的炎症反应的激活具有显著的正反馈作用，从而逐渐放大了炎症性因子的激活和释放程度，促进了TNF-α、PCT、IL-1β 的逐渐上升；②剖宫产术后感染的孕产妇，其子宫内膜或者宫颈局部创面的损伤，能够进一步提高病原体的入侵风险，从而进一步提高了病原体扩增诱导的炎症因子的释放。陈怡等［15］研究者也发现，在剖宫产术后感染的孕产妇中，TNF-α 的表达浓度可平均上升40%以上，同时在合并有明显的产褥期感染或者子宫复旧不良的孕产妇中，TNF-α 的表达浓度的上升更为显著。本实验结果提示了临床上对于高度怀疑术后感染的孕产妇，在在术后第三天开始早期进行TNF-α、PCT、IL-1β 的检测，进而提高剖宫产术后感染的检出能力。诊断学价值分析可见，相关指标分别超过2.00 ng/mL、1.26 μg/mL、2.51 pg/mL 时，其在诊断剖宫产术后感染的过程中具有重要的参考价值，但本次研究并未分析不同指标诊断的灵敏度或者特异度的具体差异，存在一定的局限性。

综上所述，在剖宫产术后感染的孕产妇中，TNF-α、PCT、IL-1β 的表达浓度明显上升，同时TNF-α、PCT、IL-1β 超过2.00 ng/mL、1.26 μg/mL、2.51 pg/mL 时，相关指标能够在辅助诊断剖宫产术后感染中发挥作用。