费菜根茎化学成分的分离与鉴定△

李乔，于洋，李明晓，徐昙烨，路金才*，吕重宁*

1.辽宁中医药大学 附属医院，辽宁 沈阳 110032；2.沈阳药科大学 中药学院，辽宁 沈阳 110016；3.大连海洋大学 食品科学与工程学院，辽宁 大连 116023

费菜SedumaizoonL.又名养心草、救心草、回生草、土三七，属于景天科景天属，为多年生草本植物。费菜全草皆可入药，具有宁心平肝、清热安神、补血凉血、化瘀止血等功效[1-2]，其中含有多种有效成分，包括生物碱、谷甾醇、黄酮类、齐墩果酸和景庆庚糖等，对心脏病、肝病、高血压有独特疗效[3-5]。费菜亦可作为保健蔬菜，其茎叶鲜嫩多汁，口感较好，可炒、炖、煮等多种烹调方式食用。由于其应用广泛，多地积极开展费菜的培育种植及产品加工，包括药品、保健食品、茶饮料等。但目前对该药材的化学成分研究国内外报道较少，且多为地上茎叶部分，因此本研究对费菜根茎70%乙醇水提取物的化学成分进行分离纯化，通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和制备高效液相色谱等多种分离方法，分离得到16个化合物，并通过理化性质与核磁共振波谱数据鉴定其结构，分别为蒲公英赛酮(taraxerone，1)、异莫替醇(2)、十六烷醇(1-hexadecanol，3)、β-谷甾醇(β-sitosterol，4)、山柰酚(kaempferol，5)、槲皮素(quercetin，6)、青棘虫素A(7)、β-谷甾醇亚油酸酯(β-sitosteryl linoleate，8)、鸢尾酚酮(iriflophene，9)、正三十碳酸(n-triacontanoic acid，10)、双十八烷基硫醚(dioctadecylsulfide，11)、胡萝卜苷(daucostero，12)、异鼠李素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(isorhamnetin-3-O-α-L-arabinopyranoside，13)、异鼠李素-3-O-β-D-吡喃木糖苷(isorhamnetin-3-O-β-D-xylopyranoside，14)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside，15)、鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(rhamnetin-3-O-β-D-glucopyranoside，16)。其中化合物2、13、14、16为首次从景天属植物中分离得到，化合物1、3、7、8、10、11、12均为首次从该植物中分离得到。

1 材料

ARX-400与ARX-600核磁共振波谱仪(Bruker公司)，1260 DAD型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)，METTLER TOLEDO 105DU分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；薄层和柱色谱硅胶(青岛海洋化工有限公司)，Sephadex LH-20(美国Pharmacia Biotech公司)，10%硫酸-乙醇溶液、色谱级甲醇、乙腈、色谱纯二氯甲烷和分析纯三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮(天津市禹王化学试剂厂)，纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)。

费菜根茎于2016年9月采自山东省菏泽市，由沈阳药科大学中药学院路金才教授鉴定为费菜SedumaizoonL.的根茎部分。

图1 费菜根茎中所分离得到的化合物1～16的结构式

2 提取与分离

将费菜根茎鲜品180 kg冲净泥土，剪成2～3 cm厚的饮片大小，自然风干，共得费菜根茎干品17 kg。将干品加入8倍量70%乙醇-水，加热回流3次，每次1.5 h，合并3次提取液，减压浓缩至20 L左右，静置过夜，桶底析出沉淀，过滤，水洗，离心，并浓缩，得到沉淀220 g。总浸膏加水得混悬液，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取后得到石油醚部位3 g，二氯甲烷萃取部位9 g，乙酸乙酯萃取部位160 g，正丁醇萃取部位497 g，水层2 kg。所得沉淀部分经硅胶柱色谱分离，采用二氯甲烷-甲醇(100∶0～1∶1)梯度洗脱，得到6个流分 Fr.1～6。其中，Fr.1经反复硅胶柱色谱分离，采用二氯甲烷-甲醇(100∶1～5∶1)梯度洗脱后经制备型高效液相色谱(甲醇-水)分离，得到化合物1(7 mg)、2(8 mg)、3(40 mg)。Fr.2经硅胶柱色谱分离，采用二氯甲烷-甲醇(50∶1～5∶1)梯度洗脱，得到2个流分 Fr.2-1～2-2。Fr.2-1经二氯甲烷纯化得到化合物4(100 mg)，Fr.2-2经反复硅胶柱色谱和制备薄层色谱分离，得到化合物7(6 mg)、8(6 mg)。Fr.3经硅胶柱色谱分离，采用二氯甲烷-甲醇(35∶1～5∶1)梯度洗脱后经制备型高效液相色谱(甲醇-水)分离，得到化合物5(3 g)、6(10 mg)、9(9 mg)。Fr.4经硅胶柱色谱分离，采用二氯甲烷-甲醇(20∶1～1∶1)梯度洗脱，得到2个流分 Fr.4-1～4-2。Fr.4-2经反复硅胶柱色谱和制备型高效液相色谱(甲醇-水)分离，得到化合物10(6 mg)。Fr.5经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇(10∶1～1∶1)梯度洗脱后，经制备薄层色谱分离，得到化合物11(8 mg)。Fr.6经反复硅胶柱色谱分离和制备型高效液相色谱(甲醇-水)分离，得到化合物12(50 mg)。所得乙酸乙酯萃取部分经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇(100∶0～1∶1)梯度洗脱，得到6个流分Fr.1～6。其中 Fr.4经硅胶柱色谱分离，采用二氯甲烷-甲醇(10∶1～1∶1)梯度洗脱后经制备型高效液相色谱(甲醇-水)分离，得到化合物13(9 mg)、14(6 mg)、15(10 mg)、16(15 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：无色针晶(CH2Cl2)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：14.8(C-25)，17.5(C-6)，20.0(C-11)，21.4(C-23)，21.5(C-24)，26.0(C-28)，26.1(C-27)，28.8(C-13)，29.9(C-29)，29.9(C-30)，33.1(C-2)，33.4(C-26)，33.6(C-12)，34.2(C-22)，35.1(C-19)，35.8(C-20)，36.7(C-1)，37.5(C-10)，37.7(C-7)，37.7(C-8)，38.4(C-21)，38.9(C-17)，40.6(C-16)，47.6(C-4)，48.7(C-18)，48.8(C-5)，55.8(C-9)，117.2(C-15)，157.6(C-14)，217.7(C-3)。以上数据与文献[6]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为蒲公英赛酮。

化合物2：白色粉末；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：14.2(C-28)，15.3(C-27)，16.4(C-24)，18.8(C-19)，19.2(C-6)，20.2(C-25)，20.6(C-11)，22.1(C-26)，22.2(C-29)，22.3(C-30)，25.7(C-12)，26.0(C-20)，26.6(C-2)，28.0(C-23)，28.3(C-7)，29.9(C-15)，30.8(C-22)，36.0(C-16)，37.0(C-1)，37.4(C-13)，37.6(C-10)，38.2(C-4)，40.6(C-14)，42.9(C-17)，53.0(C-18)，59.7(C-21)，77.2(C-3)，134.8(C-8)，134.6(C-9)。以上数据与文献[7]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为异莫替醇。

化合物3：白色粉末(CH2Cl2)；13C-NMR(101 MHz，CDCl3)δ：14.1，22.7，25.8，29.4，29.5，29.6，29.7，32.0，32.8，63.1。以上数据与文献[8]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为十六烷醇。

化合物4：无色针晶(CH2Cl2)；Liebermann-Burchard反应呈阳性；与β-谷甾醇对照品共薄层，在3种溶剂系统中，薄层行为与β-谷甾醇相同，且混合熔点不下降，故鉴定该化合物为β-谷甾醇。

化合物5：黄色粉末；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：176.4(C-4)，164.4(C-7)，161.2(C-5)，159.7(C-4′)，156.6(C-9)，147.3(C-2)，136.1(C-3)，130.0(C-2′，6′)，122.1(C-1′)，115.9(C-3′，5′)，103.5(C-10)，98.7(C-6)，93.9(C-8)。以上数据与文献[9]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为山柰酚。

化合物6：黄色粉末；1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δH：7.67(1H，d，J=1.9 Hz)，7.54(1H，dd，J=8.4 Hz，1.7 Hz)，6.88(1H，d，J=8.5 Hz)，6.40(1H，d，J=1.4 Hz)，6.18(1H，d，J=1.5 Hz)；13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：147.2(C-2)，136.2(C-3)，176.3(C-4)，156.6(C-5)，98.6(C-6)，164.4(C-7)，93.8(C-8)，161.2(C-9)，103.4(C-10)，122.4(C-1′)，115.5(C-2′)，145.5(C-3′)，148.2(C-4′)，116.1(C-5′)，120.4(C-6′)。以上数据与文献[9]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为槲皮素。

化合物7：白色粉末；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：24.9(C-11)，29.7(C-2)，29.6(C-3)，26.0(C-4)，28.8(C-5)，29.3(C-6)，29.3(C-7)，29.5(C-8)，29.6(C-9)，29.7(C-10)，34.2(C-12)，56.0(-OCH3)，63.3(C-3″)，64.6(C-1)，65.2(C-1″)，70.3(C-2″)，109.3(C-5′)，114.7(C-2′)，115.7(C-8′)，123.1(C-3′)，127.1(C-4′)，144.6(C-7′)，146.8(C-6′)，147.9(C-1′)，167.4(C-9′)，174.4(C-13)。以上数据与文献[10]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为青棘虫素A。

化合物8：棕色油状物(CDCl3)；13C-NMR(101 MHz，CDCl3)δ：11.9(C-18)，12.0(C-29)14.1(C-18′)，18.8(C-21)，19.0(C-27)，19.4(C-19)，19.8(C-26)，21.1(C-11)，22.7(C-17′)，23.1(C-28)，24.3(C-15)，24.9(C-3′)，25.7(C-11′)，26.1(C-23)，27.2(C-8′、14′)，28.3(C-16)，29.2(C-25)，29.3(C-4′)，29.4(C-5′)，29.4(C-15′)，29.7(C-6′)，29.7(C-7′)，31.5(C-16′)，31.9(C-7)，32.0(C-8)，34.0(C-22)，34.2(C-2′)，36.2(C-20)，36.7(C-10)，37.3(C-1)，38.9(C-4)，39.8(C-12)，42.3(C-13)，45.8(C-24)，50.2(C-9)，56.1(C-17)，56.8(C-14)，73.6(C-3)，122.2(C-6)，127.9(C-10′)，128.0(C-12′)，130.0(C-9′)，130.2(C-13′)，140.4(C-5)。以上数据与文献[11]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为β-谷甾醇亚油酸酯。

化合物9：棕色粉末；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：94.7(C-3，5)，107.9(C-1)，115.2(C-3′，5′)，131.1(C-1′)，131.9(C-2′，6′)，158.4(C-2，6)，160.8(C-4)，161.9(C-4′)，194.8(C=O)。以上数据与文献[12]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为鸢尾酚酮。

化合物10：白色粉末(CH2Cl2)；13C-NMR(101 MHz，CDCl3)δ：173.5(C=O)，36.0(-CH2COOH)，20.0～29.0[-(CH2)n]，14.5(-CH3)。以上数据与文献[13]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为正三十碳酸。

化合物11：白色粉末(CH2Cl2)；13C-NMR(101 MHz，CDCl3)δ：75.0(C-1)，31.5(C-16)，29.5(C-2)，25.0(C-4-14)，22.5(C-17)，14.3(C-18)。以上数据与文献[14]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为双十八烷基硫醚。

化合物12：无色针晶(CH2Cl2)；与胡萝卜苷对照品共薄层，在3种溶剂系统中，薄层行为与胡萝卜苷相同，且混合熔点不下降，故鉴定该化合物为胡萝卜苷。

化合物13：黄色粉末；1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δH：3.86(3H，s)，7.91(1H，d，J=2.0 Hz)，6.92(1H，d，J=8.4 Hz)，7.58(1H，dd，J=8.5，2.0 Hz)，6.47(1H，d，J=1.7 Hz)，6.22(1H，d，J=1.9 Hz)，5.34(1H，d，J=5.8 Hz)；13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：56.3(-OCH3)，65.5(C-5″)，67.1(C-4″)，71.4(C-3″)，72.3(C-2″)，94.2(C-8)，99.2(C-6)，102.0(C-1″)，104.4(C-10)，113.6(C-2′)，115.7(C-5′)，121.3(C-1′)，122.7(C-6′)，133.9(C-3)，147.5(C-4′)，150.0(C-3′)，156.7(C-2)，156.8(C-9)，161.6(C-7)，1648(C-7)，177.9(C-4)。以上数据与文献[15]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为异鼠李素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷。

化合物14：黄色粉末；13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：56.1(-OCH3)，66.5(C-5″)，69.9(C-4″)，74.4(C-2″)，76.4(C-3″)，94.0(C-8)，99.7(C-6)，102.2(C-1″)，105.0(C-10)，113.5(C-2′)，115.8(C-5′)，122.5(C-1′)，133.2(C-3)，147.3(C-4′)，149.2(C-3′)，156.6(C-2)，158.6(C-9)，164.6(C-7)，167.0(C-7)，175.3(C-4)。以上数据与文献[16]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为异鼠李素-3-O-β-D-吡喃木糖苷。

化合物15；黄色粉末；13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：63.2(C-5″)，65.5(C-4″)，69.9(C-3″)，71.9(C-2″)，94.4(C-8)，98.7(C-6)，115.9(C-5′)，116.1(C-2′)，127.8(C-1′)，133.5(C-3)，146.6(C-3′)，147.3(C-2′)，155.3(C-9)，157.9(C-2)，159.3(C-5)，167.3(C-7)，180.4(C-4)。以上数据与文献[17]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷。

化合物16：黄色粉末；1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δH：3.85(3H，s)，3.87(3H，s)，7.97(1H，d，J=1.8 Hz)，6.93(1H，d，J=8.4 Hz)，7.55(1H，dd，J=8.4，1.7 Hz)，6.76(1H，d，J=2.0 Hz)，6.39(1H，d，J=2.1 Hz)，5.58(1H，d，J=7.2 Hz)；13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：56.2(7-OCH3)，56.6(3′-OCH3)，61.0(C-6″)，70.3(C-4″)，74.8(C-2″)，76.9(C-5″)，78.0(C-3″)，101.2(C-1″)，92.8(C-8)，98.4(C-6)，105.5(C-10)，113.9(C-2′)，115.7(C-5′)，121.4(C-1′)，122.6(C-6′)，133.7(C-3)，147.4(C-4′)，150.0(C-3′)，156.8(C-2)，157.1(C-9)，161.4(C-7)，165.6(C-7)，178.0(C-4)。以上数据与文献[18]进行对比，结果基本一致，故鉴定该化合物为鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

3 讨论

本研究从费菜根茎70%乙醇提物中分离得到了16个化合物，其中化合物2、13、14、16为首次从景天属植物中分离得到，1、3、7、8、10、11、12化合物为首次从该植物中分离得到。以上结果不仅丰富了费菜根茎的化学成分研究，也为寻找新的活性物质，阐明费菜根茎发挥药效的物质基础提供了研究方向，为费菜根茎资源的开发提供参考。