VITEK 2Compact微生物分析仪法在细菌耐药表型检测中的应用

鞍山市肿瘤医院检验科 （辽宁 鞍山 114001）

内容提要： 目的：探究分析VITEK 2Compact微生物分析仪法在细菌耐药表型检测中的应用价值。方法：研究时间为2018年1月～2019年4月，随机选择本院细菌室分离保存的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌，各选取70株，对各类菌株耐药表型进行检测，分别采取常规纸片扩散法、VITEK 2Compact微生物分析仪法，对检测结果进行分析，评估VITEK 2Compact微生物分析仪法应用价值。结果：VITEK 2Compact微生物分析仪法ESBLs阳性率、MRSA阳性率、克林霉素诱导试验阳性率分别为74.29%、51.42%、48.57%，与常规纸片扩散法72.86%、50.00%、48.57%相比差异无统计学意义，P＞0.05，但两种方式在ESBLs检测和NRSA检测结果方面稍有差异。结论：在致病菌耐药表型检测过程中，VITEK 2Compact微生物分析仪法检测准确性、特异度、灵敏度较为理想。

细菌感染对人类健康威胁较多，目前临床多采取抗生素进行预防与处理，随着医学技术和药学研究的发展，临床上存在多种不同机制的抗生素，但是现阶段感染率控制效果不理想，且细菌耐药性情况较为突出，同时随着抗生素的广泛使用，耐药机制日趋复杂，很多学者预言人类存在无抗生素所用的危险可能，因此在细菌感染控制过程中快速、准确提供抗生素药敏结果至关重要[1]。目前临床检测技术不断发展，耐药表型检测工作得以更好地推进，其中常规纸片扩散法、VITEK 2Compact微生物分析仪法应用广泛，但具体应用价值仍需进一步探究。本文对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌进行了药敏试验，旨在找寻一种更为敏感的检测方式，做出如下报道。

1.资料与方法

1.1 一般资料

研究时段确定为2018年1月～2019年4月，随机选择本院细菌室分离保存的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌，各选取70株，质控株确定为金黄色葡萄球菌ATCC29213和大肠杆菌ATCC25922。

1.2 方法

1.2.1 常规纸片扩散法

药敏纸片由Oxoid提供，血培养基、M-H培养基、麦康钙培养基由北京同立海源生物科技有限公司提供。具体检测如下：①超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）试验，取大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌，在麦康凯培养基中复种，取3～4个克隆，配置而成悬浊液（0.5麦氏单位浓度），于M-H平板上涂抹，取30μg头孢噻肟、30μg头孢噻肟和10μg克拉维酸、30μg头孢他啶、30μg头孢他啶和10μg克拉维酸纸片，放置在M-H平板上，孵育24h，温度控制为35°C；②耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检测，复种、配置混悬液、混悬液涂抹同上，随后取30μg头孢西丁、1μg苯唑西林，放置在M-H平板上，孵育如上；③红霉素耐药克林霉素诱导试验，取黄金色葡萄球菌，复种、混悬液处理等如①，取15μg红霉素纸片、2μg克林霉素纸片，贴于M-H平板，两者中心间距15mm，培养24h。

1.2.2 VITEK 2Compact

微生物分析仪法，配置大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌混悬液，浓度为0.5麦氏单位浓度，使用梅里埃AST-GN13药敏检测板，随后再配置黄金色葡萄球菌混悬液，浓度如上，选取梅里埃AST-GP67药敏检测板进行检测。

1.3 观察指标与判定标准

统计比较两种方式检测结果，参照如下标准：①ESBLs阳性：2组纸片或其中1组加克拉维酸制片抑菌圈直径＞未加克拉维酸纸片抑菌直径，且差值＞5mm；②MRSA阳性：苯唑西林抑菌环＜11mm或者头孢西丁抑菌环＜19mm；③克林霉素诱导试验阳性：根据克林霉素抑菌环是否出现截平现象判断，即是否有“D”型环形成，有则为阳性[2]。

1.4 统计学分析

数据处理使用SPSS24.0软件，计数资料，表示为n、%，χ2值进行检验，统计学意义指标：P＜0.05。

2.结果

2.1 检测阳性率比较

VITEK 2Compact微生物分析仪法ESBLs阳性率、MRSA阳性率、克林霉素诱导试验阳性率分别为74.29%、51.42%、48.57%，与常规纸片扩散法72.86%、50.00%、48.57%相比差异无统计学意义，P＞0.05，见表1。

2.2 检测结果分析

两种方法检测阳性率统计比较无统计学差异，但在ESBLs、MRSA检测方面存在细微差异，其中ESBLs中，常规纸片扩散法检测阴性菌株为38例，而VITEK 2Compact微生物分析仪法检测其中2例为阳性，常规制片扩散法在MRSA检测中检出阴性菌株为35例，而2VITEK 2Compact微生物分析仪法检测其中1例为阳性。

表1. 两种方法检测阳性率比较(n/%)

3.讨论

抗生素在细菌感染控制中发挥着重要的作用，但是目前细菌种类明显增多，且抗生素存在滥用情况，耐药性成为临床关注的重点问题，且耐药机制日益复杂，对临床抗生素使用提出了更高要求。在耐药性问题解决过程中，药敏试验发挥着重要作用，对于耐药表型检测，临床多应用常规纸片扩散法和微生物分析仪法，对二者检测结果进行探究分析，明确检测结果，进而确定更为敏感的检测方式[3]。

本次研究结果显示：微生物分析仪法与常规纸片扩散法检出阳性率差异无统计学意义，但两种方式在ESBLs检测和NRSA检测结果方面稍有差异。具体原因分析如下：常规纸片扩散法在应用过程中容易受多种因素影响，常见因素为培养基种类、细菌接种量、菌液浓度等，影响抑菌圈大小，从而影响结果判断准确性，同时在结果读取时纸片法读取最终结果，而微生物分析仪法可实现每隔15min读取1次结果，可实现动态观察，进而提高了检测的敏感性和特异性，此外微生物分析仪法检测时间较短，以ESBLs检测为例，仅需5～9h，更利于耐药试验开展[4]。

综上所述，在致病菌耐药表型检测过程中，VITEK 2Compact微生物分析仪法检测准确性、特异度、灵敏度较为理想。