HIF-1α蛋白在胃癌患者组织、癌旁组织中的表达及与其TNM 分期的关联性分析

侯志斌

【摘要】目的：分析缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白在胃癌患者组织、癌旁组织中的表达情况。方法：选取2017年5月～2019年7月我院胃癌手术切除标本138例，对比HIF-1α、TGF-β1、VEGF蛋白在胃癌、癌旁组织中的阳性表达情况，并分析HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达与胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期的相关性。结果：胃癌组织HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达率高于癌旁组织（P<0.05）;胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期等不同临床病理条件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达率均存在明显差异（P<0.05）;Spearman相关性分析结果显示：HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达与胃癌患者淋巴结转移（r=0.637，P<0.001;r=0.582，P=0.005;r=0.604，P<0.001）、浸润程度（r=0.539，P=0.004;r=0.619，P<0.001;r=0.574，P=0.003）、TNM分期（r=0.626，P=<0.001;r=0.594，P=0.004;r=0.568，P=0.001）呈正相关。结论：HIF-1α、TGF-β1、VEGF在胃癌组织中呈异常高表达状态，且其与胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期呈正相关，检测三者阳性表达情况可作为评估胃癌患者病情的参考指标，对临床早期治疗有重要意义。

【关键词】HIF-1α蛋白;胃癌;癌旁组织;TNM分期

【中图分类号】R735

【文献标识码】A

【文章编号】2095-6851（2020）05-241-01

胃癌是临床常见恶性肿瘤，发病率高，占恶性肿瘤第4位，呈逐年升高趋势，目前临床治疗多采用手术切除、放疗、化疗等，但其病情复杂，易复发及转移，患者5年生存率不足50%，降低患者生存质量[1]。相关研究证实，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白与肿瘤的发生、发展有关。基于此，本研究选取我院胃癌手术切除标本138例，旨在分析其在在胃癌患者组织及癌旁组织中的表达情况。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究经我院伦理委员会审核通过，选取2017年5月～2019年7月我院胃癌手术切除标本138例。其中男80例，女58例，年龄24～85岁，平均（54.75±14.39）岁;肿瘤直径：<5cm 48例，≥5cm 90例，分化程度：低分化86例，中、高分化52例，淋巴结转有转移105例，无转移33例;浸润程度：黏膜下层50例，浆膜88例;TNM分期：Ⅰ、Ⅱ期55例，Ⅲ、Ⅳ期83例。所有患者术前均未行放疗及化疗。排除合并其他肿瘤患者、免疫系统功能障碍者、不配合本研究者。

1.2 方法 （1）免疫组织化学染色：标本均经10%中性福尔马林固定和常规石蜡包埋，常规切片并脱蜡至水。采用磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗5min×2次，用3%过氧化氢溶液室温封闭10min，蒸馏水冲洗3次，利于90℃微波抗原修复10min;PBS冲洗5min×3次，滴加正常山羊血清封闭特异性抗原位点，室温封闭20min，甩去多余液体，滴加一抗，置于4℃冰箱过夜;PBS冲洗5min×3次，滴加生物素化二抗，37℃孵育20min;PBS冲洗2min×3次;滴加细胞免疫组化（SABC）试剂，20～37℃孵育20min;PBS冲洗5min×4次，二氨基联苯胺（DAB）显色，蒸馏水冲洗;苏木精复染1min、盐酸乙醇分化，氨水返蓝，常规脱水、透明、封固、镜检。兔抗人成熟型HIF-1α、TGF-β1及VEGF多克隆抗体，SABC试剂盒、DAB显色试剂盒均购自北京博奥森公司。（2）判断标准：TGF-β1、VEGF定位于细胞质中，HIF-1α定位于细胞核和细胞质中。采用半定量积分法判断阳性结果：按染色强度评分：无染色为0分，浅黄色1为分，棕黄色为2分，棕褐色为3分;高倍镜（×400）下随机对每张切片取10个视野，每个视野计数100个细胞，计算阳性细胞占同类细胞的百分数：细胞阳性率无为0分，<25%为1分，25%～50%为2分，>50%为3分。二者积分乘积大于2判定为阳性，小于2判定为阴性。

1.3 观察指标 （1）HIF-1α、TGF-β1、VEGF蛋白在胃癌、癌旁组织中的阳性表达情况。（2）不同临床病理条件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达情况。（3）HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达与胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期的相关性。

1.4 统计学分析 以SPSS23.0分析，计数资料以n（%）表示，行χ2检验，计量资料以（x±s）表示，行t检验，采用Spearman进行相关性分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HIF-1α、TGF-β1、VEGF蛋白在胃癌、癌旁组织中的阳性表达情况。胃癌组织HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达率高于癌旁组织（P<0.05）。见表1。

2.2 不同临床病理条件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达情况。胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期等不同临床病理条件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF陽性表达率均存在明显差异（P<0.05）。

3 讨论

胃癌是消化道常见恶性肿瘤，其病因复杂，与遗传、环境、饮食习惯等因素相关，死亡率较高，位居恶性肿瘤第2位，威胁患者生命健康，因此，早期诊断、及时治疗对临床改善患者预后有重要作用。

本研究结果还显示，胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期等不同临床病理条件的HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达率均存在明显差异（P<0.05）;Spearman相关性分析结果显示：HIF-1α、TGF-β1、VEGF阳性表达与胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期呈正相关（P<0.05），表明HIF-1α、TGF-β1、VEGF与胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期呈正相关，检测三者阳性表达情况可作为评估胃癌患者病情的参考指标。

综上可知，HIF-1α、TGF-β1、VEGF在胃癌组织中呈异常高表达状态，且其与胃癌患者淋巴结转移、浸润程度、TNM分期呈正相关，检测三者阳性表达情况可作为评估胃癌患者病情的参考指标，对临床早期治疗有重要意义。

参考文献：

[1] 刘鹏，刘玉刚，旷建刚，等.膀胱癌组织中NF-κB1、VEGF-C、Smad4与HIF-1α表达及其意义分析[J].现代中西医结合杂志，2017，26（12）：1349-1351.