TNF-α、IL-1β及IL-6水平用于评估川崎病患儿发生冠状动脉损伤的临床价值

黄宏琳 黄育坤 林淑斌 郭瑞芳

【摘要】 目的：探討TNF-α、IL-1β及IL-6水平用于评估川崎病（KD）患儿发生冠状动脉损伤的临床价值。方法：选取2014年6月-2016年9月本院收治的KD患儿88例，根据是否合并冠状动脉损伤（CAL）分为非CAL组（n=29）和CAL组（n=59），并选取同时期健康体检儿童50例为对照组。测定血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌钙蛋白I（cTnI）;超声检测左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短分数（LVFS）。结果：KD组血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;KD组血清CK-MB、LVEF及LVFS水平与对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗前，CAL组血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于非CAL组，差异均有统计学意义（P<0.05）;CAL组血清CK-MB、LVEF及LVFS水平与非CAL组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗后，CAL组血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均高于非CAL组，差异均有统计学意义（P<0.05）;CAL组血清CK-MB、LVEF、LVFS及cTnI水平与非CAL组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。KD患儿血清TNF-α与cTnI水平呈显著正相关（P<0.05），与CK-MB无显著相关性（P>0.05）;血清IL-1β、IL-6与CK-MB、cTnI均无相关性（P>0.05）。结论：检测血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平可作为诊断KD合并冠状动脉损伤的辅助指标，可应用于临床。

【关键词】 川崎病 冠状动脉损伤 肿瘤坏死因子α 白细胞介素-1β 白细胞介素-6

Clinical Value of TNF-α， IL-1β and IL-6 in Evaluating Coronary Artery Injury in Children with Kawasaki Disease/HUANG Honglin， HUANG Yukun， LIN Shubin， GUO Ruifang. //Medical Innovation of China， 2020， 17（04）： 0-015

[Abstract] Objective： To investigate the clinical value of TNF-α， IL-1β and IL-6 levels in evaluating coronary artery injury in children with kawasaki disease （KD）. Method： A total of 88 cases of KD children admitted to our hospital from June 2014 to September 2016 were selected. According to the combination of CAL or not， they were divided into non-CAL group （n=29） and CAL group （n=59）， and 50 healthy children in the same period were selected as the control group. Serum tumor necrosis factor （TNF-α）， interleukin-1β （IL-1β）， interleukin 6 （IL-6）， creatine kinase isoenzyme （CK-MB） and cardiac troponin I （cTnI） were measured. The left ventricular ejection fraction （LVEF） and left ventricular short axis shortening fraction （LVFS） were measured by ultrasound. Result： The levels of TNF-α， IL-1β， IL-6 and cTnI in KD group were higher than those in control group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF and LVFS between KD group and control group （P>0.05）. Before treatment， TNF-α， IL-1β， IL-6， cTnI in serum of CAL group were higher than those of non CAL group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF and LVFS between CAL group and non CAL group （P>0.05）. After treatment， TNF-α， IL-1β and IL-6 in serum of CAL group were higher than those of non CAL group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF， LVFS and cTnI between CAL group and non CAL group （P>0.05）. There was a significant positive correlation between serum TNF-α and cTnI （P<0.05）， but no significant correlation with CK-MB （P>0.05）; there were no correlation between serum IL-1β， IL-6 and CK-MB， cTnI （P>0.05）. Conclusion： The detection of serum TNF-α， IL-1β and IL-6 levels can be used as auxiliary indicators for the diagnosis of KD complicated with coronary artery injury and can be applied in clinical practice.

[Key words] Kawasaki disease Coronary artery injury TNF-α IL-1β IL-6

First-authors address： Xiamen Childrens Hospital， Xiamen 361006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.04.003

川崎病（Kawasaki disease， KD）是一种病因不明，以全身中、小血管炎性反应为主要症状的急性发热、出疹性小儿疾病。KD的主要危害是造成全身中小动脉血管扩张而引发冠状动脉损伤（coronary artery lesion， CAL），是目前造成小儿后天获得性心脏损伤的主要原因，且合并CAL会增加KD治疗难度，影响预后。免疫系统高度活化及细胞因子的级联放大效应是CAL的病理基础，其形成是多种炎性因子损伤血管内皮细胞所致[1-3]。因此，了解CAL程度对于治疗方案的制定及治疗效果评估具有非常重要的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年6月-2016年9月本院收治的KD患儿88例，其中典型KD 62例，不完全KD 26例;男61例，女27例;年龄6个月～7岁，平均（2.5±1.2）岁;发热至确诊平均时间（4.5±2.2）d。选取同时期健康体检儿童50例为对照组。CAL诊断标准：（1）<5岁儿童冠状动脉内径>3 mm;（2）≥5岁儿童冠状动脉内径>4 mm;（3）任一年龄段儿童冠状动脉内径是邻近段的1.5倍以上[4-5]。纳入标准：（1）年龄6个月～7岁，性别不限;（2）患者均符合第七版诸福棠实用儿科学关于KD诊断标准[3]，符合日本MCLS研究会标准。（3）均为首次发病，急性期入院。排除标准：（1）入院前已诊断川崎病并静脉注射丙球蛋白者;（2）合并其他感染，如脓毒症者。治疗前对88例患儿行心脏超声检查，根据是否合并CAL分为非CAL组（n=29）和CAL组（n=59）。治疗采用丙种球蛋白（IVIG）静注和阿司匹林口服治疗。患儿家长知情同意且签署知情同意书，该研究已经医院伦理学委员会批准。

1.2 方法 患者于治疗前后、对照组于体检时采集清晨空腹静脉血3 mL，离心取血清，测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌钙蛋白I（cTnI）。TNF-α、IL-1β和IL-6均采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定，试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，操作严格按照说明书进行;CK-MB采用迈瑞BS800全自动生化分析仪测定;cTnI采用贝克曼库尔特DXI800全自动化学发光免疫分析仪测定;同时，超声检测试验者冠状动脉及左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短分数（LVFS）。

1.3 观察指标 （1）比较KD组与对照组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情况。（2）比较治疗前后CAL组与非CAL组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情况。（3）分析KD患儿血清TNF-α、IL-6与CK-MB、cTnI的相关性。

1.4 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析，计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，相关性采用Person相关性分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较 非CAL组男16例，女13例;年龄6个月～6岁，平均年龄（2.3±1.0）岁。CAL组男31例，女28例;年龄6个月～6岁，平均（2.6±1.1）岁。对照组男35例，女15例;年龄6个月～6岁，平均（2.5±1.1）岁。三组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 KD组与对照组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情况比较 KD组血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;KD组血清CK-MB、LVEF及LVFS水平与对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.3 CAL组与非CAL组治疗前血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情况比较 治

疗前，CAL组血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于非CAL組，差异均有统计学意义（P<0.05）;CAL组血清CK-MB、LVEF及LVFS水平与非CAL组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表2。

2.4 CAL组与非CAL组治疗后血清TNF-α、IL-1β、

IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情况比较 治疗后，CAL组血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均高于非CAL组，差异均有统计学意义（P<0.05）;CAL组血清CK-MB、LVEF、LVFS及cTnI水平与非CAL组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表3。

2.5 KD患儿血清TNF-α、IL-1β、IL-6与CK-MB、cTnI的相关性分析 KD患儿血清TNF-α与cTnI水平呈显著正相关（r=0.612，P=0.021），与CK-MB无显著相关性（r=0.362，P=0.087）;血清IL-1β与CK-MB、cTnI均无相关性（r=0.114、0.412，P=0.637、0.120）;IL-6与CK-MB、cTnI均无相关性（r=0.277、0.396，P=0.532、0.201）。

3 讨论

KD是一种以全身血管炎性反应为主要症状的血管综合征，常引起冠状动脉炎、冠状动脉扩张、冠状动脉瘤及冠状动脉血栓等并发症，给患儿健康造成极大威胁[4-6]。川崎病的病因尚未形成统一的结论，但是众多研究发现，川崎病的急性期伴随着免疫系统的激活，多种免疫指标的异常，表现为B细胞的多克隆活化、T细胞的异常增殖及多种细胞因子的分泌异常，可能还存在着外周血淋巴细胞凋亡延迟[7]。活化T细胞、单核细胞及激活的克隆B细胞释放大量的细胞因子和炎性介质，相互促进，在血液循环中级联放大，引起血管内皮凋亡增加，最终导致血管的损伤[7]。研究发现，TNF-α、IL-6、IL-1β、干扰素-γ、超敏C反应蛋白、血小板生长因子等均参与了川崎病血管炎性损害过程[8-11]。TNF-α由活化的巨噬细胞、单核细胞和T细胞产生，具有多种生物学效应，其能诱导内皮细胞黏附因子的表達和活化，促使血小板和白细胞黏附于血管内皮表面，从而引起血管壁的损伤和血管内凝血[12]。同时TNF-α能引起血管内皮细胞结构的改变，抑制细胞内皮生长，影响内皮细胞损伤的修复[13]。本组KD患儿血清TNF-α显著高于健康儿童，而且并发CAL的患儿血清TNF-α显著高于非CAL患儿，差异均有统计学意义（P<0.05），提示KD患儿CAL的发生与TNF-α对血管内皮的损伤有一定的关系，积极控制炎性反应的发展，降低患儿血清TNF-α水平对预防CAL的发生可能有一定疗效。IL-1β主要由活化的单核-吞噬细胞产生，是一种炎性反应前期细胞因子，活化内皮细胞，起着免疫调节的作用[14]。本组KD患儿血清IL-1β显著高于健康儿童，且并发CAL的患儿显著高于非CAL患儿，差异均有统计学意义（P<0.05），提示IL-1β参与了KD发生时的血管炎性反应。IL-6由活化的Th2细胞、单核吞噬细胞和成纤维细胞等产生，能促进B细胞分化，分泌自身抗体，引起细胞内皮毒性作用，同时IL-6的升高可引起淋巴细胞凋亡延迟，免疫过度激活损伤血管内皮[15]。本组KD患儿血清IL-6水平显著升高，且CAL患儿血清IL-6显著高于非CAL患儿，差异均有统计学意义（P<0.05），提示IL-6同样参与了KD的疾病过程，同时在冠状动脉炎性损伤中发挥了一定的作用。

另外本研究对KD患儿的心功能也做了检测，结果显示在KD患儿中，虽然伴随着炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6的异常升高，但是心功能指标（LVEF和LVFS）与健康儿童比较，差异均无统计学意义（P>0.05），提示本组KD患儿的心脏损伤临床症状较轻，尚未损害到心功能。进一步进行CK-MB和cTnI的检测，KD组血清cTnI水平高于对照组（P<0.05），但血清CK-MB比较，差异无统计学意义（P>0.05），同样证实了本组患儿的心脏损伤较轻。当KD患儿心功能尚未出现异常时，超声检测KD往往不能明确诊断，因此血清炎性因子的检测对于早期的KD确诊具有一定的优势[16]。对TNF-α、IL-1β和IL-6与心脏损伤指标CK-MB和cTnI的相关分析显示，KD患儿血清TNF-α与cTnI水平呈显著正相关（P<0.05），由此可知，KD患儿血清TNF-α水平的升高对预测早期心肌损伤有一定的临床意义。

综上所述，TNF-α、IL-1β和IL-6在KD的疾病过程中显著升高，且TNF-α的水平对预测早期心肌损伤有一定的临床意义，因此，检测血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平可作为诊断KD合并冠状动脉损伤的辅助指标应用于临床。

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（收稿日期：2019-07-11） （本文編辑：姬思雨）