香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织PI3K信号通路相关因子表达的影响

段永强　巩子汉　王丽园　成映霞　王强　杨晓轶　李兰珍　段云燕

摘要：目的  观察香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠胃组织血管内皮生长因子（VEGF）、磷酸酶张力蛋白同源物基因（PTEN）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）的影响，探讨该复方防治CAG的作用机制。方法  将120只Wistar大鼠分为空白组和模型组，采用综合法制作CAG动物模型，将成模大鼠分为模型组、维酶素组和香砂六君子汤高、中、低剂量组，空白组和模型组大鼠给予10 mL/（kg·d）蒸馏水灌胃，香砂六君子汤高、中、低剂量组分别给予24、12、6 g/（kg·d）香砂六君子汤灌胃，维酶素组给予0.30 g/（kg·d）维酶素灌胃，连续120 d。ELISA检测大鼠胃组织VEGF含量，RT-PCR和Western blot分别检测大鼠胃组织PTEN、PI3K、AKT基因和蛋白的表达。结果  与空白组比较，模型组大鼠一般状况较差，胃黏膜变薄，上皮细胞及腺体排列紊乱、稀疏，腺体数目明显减少，黏膜肌层增厚向固有层延伸，可见大量炎性细胞浸润，胃组织PTEN基因及蛋白表达显著降低（P<0.01），VEGF含量和AKT、PI3K基因及蛋白表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较，香砂六君子汤高剂量组大鼠胃组织PTEN基因表达显著升高（P<0.01），VEGF含量和AKT、PI3K基因及蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论  香砂六君子汤通过改善模型大鼠生存状况及胃黏膜病理状态，上调胃组织PTEN表达，下调VEGF、AKT、PI3K表达，发挥治疗CAG的作用。

关键词：慢性萎缩性胃炎;血管内皮生长因子;磷酸酶张力蛋白同源物基因;磷脂酰肌醇3-激酶;蛋白激酶B;香砂六君子汤;大鼠

中图分类号：R285.5    文献标识码：A    文章編号：1005-5304（2020）03-0033-06

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.201907062

Effects of Xiangsha Liujunzi Decoction on PI3K Signaling Pathway Correlation Factor Expression in Gastric Tissue of Rats with Chronic Atrophic Gastritis

DUAN Yongqiang1，2，3，4， GONG Zihan1，3， WANG Liyuan1，5， CHENG Yingxia1， WANG Qiang1， YANG Xiaoyi1， LI Lanzhen1， DUAN Yunyan1

1. Gansu University of Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China; 2. Gansu Key Laboratory of Pharmacology and Toxicology of Traditional Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China; 3. Key Laboratory of Traditional Chinese Herbs and Prescription Innovation and Transformation of Gansu Province， Lanzhou 730000， China; 4. Key Laboratory of Dunhuang Medicine and Transformation of Ministry of Education， Lanzhou 730000， China; 5. Cangxi County Traditional Chinese Medicine Hospital， Cangxi 628400， China

Abstract： Objective To observe the effects of Xiangsha Liujunzi Decoction on vascular endothelial growth factor （VEGF）， phosphatase tensin protein homologue （PTEN）， phosphatidylinositol 3-kinase （PI3K） and protein kinase B （AKT） in gastric tissue of rats with chronic atrophic gastritis （CAG）; To discuss the mechanism of this

compound for prevention and treatment of CAG. Methods Totally 120 SPF Wistar rats were randomly divided into blank group and model group. CAG animal models were reproduced by comprehensive method. The model rats were randomly divided into model group， vitacoenzyme tablets group and Xiangsha Liujunzi Decoction high-， medium- and low-dosage groups. The blank group and model group were given 10 mL/（kg·d） distilled water for gavage， and Xiangsha Liujunzi Decoction high-， medium- and low-dosage groups were given 24 g/（kg d）， 12 g/（kg d）， and 6 g/（kg·d） Xiangsha Liujunzi Decoction， respectively， for gavage. Vitacoenzyme tablets group was given 0.30 g / （kg·d） vitacoenzyme tablets， for consecutive 120 d. The content of VEGF in gastric tissue was detected by ELISA， and the gene and protein expressions of PI3K， PTEN and AKT were detected by RT-PCR and Western blot， respectively. Results Compared with the blank group， the general survival condition of the model group was worse; the gastric mucosa of the model group was thinner， the arrangement of epithelial cells and glands was disordered and sparse， the number of glands was significantly reduced， the muscular layer of the mucosa was thicker and extended to the lamina propria， a large number of inflammatory infiltration could be seen， PTEN gene and protein expression in gastric tissue were significantly reduced （P<0.01）， and the content of VEGF and the gene and protein expressions of AKT and PI3K in gastric tissues significantly increased （P<0.01）. Compared with model group， the gene expression PTEN in gastric tissue of rats in Xiangsha Liujunzi Decoction high-dosage group was significantly higher （P<0.01）， and the content of VEGF and gene and protein expressions of AKT and PI3K in gastric tissues significantly decreased （P<0.01）. Conclusion Xiangsha Liujunzi Decoction can exert the therapeutic effect on CAG by improving the general survival of the model rats and the pathological state of gastric mucosa， up-regulating the expression of PTEN in gastric tissue， down-regulating the expression of VEGF， AKT and PI3K.

Keywords： chronic atrophic gastritis; vascular endothelial growth factor; PTEN; PI3K; AKT; Xiangsha Liujunzi Decoction; rats

慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis，CAG）多因素体脾胃虚弱、饮食不节、情志失调、感受外邪导致中焦气机不利、升降失司而引发，常表现出胃脘痞满、疼痛、纳呆、嗳气、大便不调、消瘦等症状。诸多医家经长期临床观察总结认为，CAG病位在脾胃，其病机关键是脾胃虚弱。脾主升清，胃主通降，脾胃为一身气机升降之枢纽，若脾胃受损，脾失健运，胃失和降，则中焦气机紊乱，气血生化乏源，脏腑失养而致胃痞[1-3]。正如《素问病机气宜保命集》所云：“脾不能行气于肺胃，结而不散则为痞。”临床应用香砂六君子汤治疗CAG疗效显著[4]，且本课题组前期研究表明，香砂六君子汤可调控CAG大鼠NF-κB通路进而抑制炎症因子白细胞介素（IL）-12、肿瘤坏死因子-α、IL-1β和IL-8的高表达，改善CAG大鼠胃排空功能、促进胃蛋白酶活性、下调缺氧环境缺氧诱导因子（HIF）-1α基因和蛋白表达，调控IL-6、IL-10及热休克蛋白70基因及蛋白表达，对CAG大鼠胃窦黏模具有保护作用[5-7]。有研究表明，血管内皮生长因子（VEGF）参与肿瘤的进展、浸润和转移，其高表达与肿瘤进展有关[8]。PI3K/AKT信号通路是细胞内重要的信号转导通路，参与调节细胞的凋亡、增生、迁移、分化和代谢[9]。PI3K/AKT信号通路与胃上皮细胞的增殖和凋亡关系密切，胃上皮细胞增殖过度而凋亡不足时，则可能导致胃癌的发生[10]。本研究旨在通过动物实验观察以健脾理气和胃法为指导的香砂六君子汤对CAG大鼠生存状况、胃组织VEGF、磷酸酶张力蛋白同源物基因（PTEN）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）表达的影响，探讨该复方防治CAG的作用机制。

1  材料与方法

1.1  动物

SPF级健康Wistar大鼠120只，雌雄各半，2月龄，体质量（200±20）g，甘肃中医药大学医学实验中心提供，动物许可证号SCXK（甘）2015-0002。饲养于甘肃中医药大学SPF级实验室，相对湿度45%～55%，室温（23±2）℃，自由摄食饮水。

1.2  药物

香砂六君子汤（生晒参、茯苓、麸炒白术、姜半夏、木香、砂仁、陈皮、甘草、生姜），饮片均购自兰州复兴厚药材有限责任公司。生晒参、麸炒白术、茯苓、陈皮、姜半夏、砂仁、木香、生姜、甘草按6∶12∶12∶5∶6∶5∶4∶12∶4比例配制[11]。加10倍蒸馏水浸泡2 h后常規煎煮1 h，滤出药渣，保存药液，药渣再加8倍蒸馏水煎煮45 min，混合2次药液，常压下浓缩至1 mL药液含原药材2 g。置于4 ℃冰箱保存，使用时稀释至所需浓度。维酶素片，新乡恒久远药业有限公司，批号20160518;MNNG，梯希爱化成工业发展有限公司，批号75F7I-TF;雷尼替丁，广东华南药业集团有限公司，批号151101。

1.3  主要试剂与仪器

VEGF酶联免疫试剂盒，上海将来实业股份有限公司，批号201811;总RNA抽提试剂Trizol，美国Life Technologies公司，批号152104;PCR反转录试剂盒，美国Promega公司，批号00435083;实时荧光定量PCR扩增试剂盒，美国Promega公司，批号0000227638;彩虹Marker，北京索莱宝生物科技有限公司，批号00580081;GAPDH，美国Gene Tex公司，批号130201;Ant-PTEN Antibody，美国Abcam公司，批号GR62840-23;Ant-pan-AKT Antibody，美国Abcam公司，批号GR3192605-11;Ant-PI3K antibody，美国Abcam公司，批号GR3192684-9;IgG（H+L），美国Immunoway公司，批号B0201。VELOCITY 18R高速台式低温离心机（澳大利亚Dynamically公司），XYJ80-2离心机（广东塘厦骏越机电设备厂），BIOMATE 3S核酸蛋白测定仪（美国BIO-RAD），S1000TM反转录仪（美国Bio-Rad），CFX96TM Optics Module PCR仪（美国Bio-Rad），HH-4数显恒温水浴箱（江苏省金坛市友联仪器研究所），JY-SPAT电泳槽（美国Bio-Rad），Chemi DOC XRS+凝胶成像分析系统（美国Bio-Rad），电子计时器（Gene Tex）。

1.4  造模

大鼠给予常规饲料及双蒸水适应性饲养7 d，按随机数字表法将120只大鼠分为空白组（20只）和造模组（100只）。每日8：00空白组大鼠给予1 mL/100 g生理盐水灌胃，每日9：00给予定量维持饲料，给予双蒸水供大鼠每日自由饮用。造模组大鼠参照文献[12]方法，采用综合法造模。①使用DMSO作为溶剂，将MNNG固体溶解，配制成20%MNNG溶液，置于4 ℃冰箱避光保存;②将配制好MNNG溶液与水按1∶2000比例配制，给予大鼠自由饮用，大鼠饮水瓶采用锡箔纸包裹避光;③将雷尼替丁溶解于85%NaCl溶液当中，按0.03 g/kg大鼠体质量灌胃;④采用饥饱失常喂养法：2 d足量喂养，1 d禁食不禁水。连续造模16周。待大鼠CAG造模8周后，2周为1个周期，随机抽取大鼠，取大鼠胃组织做病理检查，评价CAG模型复建是否成功。

1.5  分组及给药

造模16周后病理切片显示CAG大鼠模型成功，按随机数字表法将成模大鼠分为模型组、维酶素组和香砂六君子汤高、中、低剂量组，每组16只。模型组和空白组每日按10 mL/kg蒸馏水灌胃，维酶素组每日按0.30 g/kg维酶素灌胃（相当于60 kg成人每日剂量的6倍），香砂六君子汤高、中、低剂量组每日按24、12、6 g原药材/kg灌胃（相当于60 kg成人每日剂量的12、6、3倍）。等效剂量按人与动物体型系数折算，给药体积2 mL/100 g，每日1次，连续120 d。

1.6  标本采集与检测

大鼠于末次灌胃后禁食不禁水24 h，10%水合氯醛麻醉脱臼处死大鼠，解剖，取出胃组织，沿胃大弯剪开，生理盐水漂洗去除胃内容物。部分组织存放于4%多聚甲醛以备后续HE染色行病理组织学评估;另一部分置冻存管中，立即放入-80 ℃超低温冷冻冰箱备用，以备后续采用RT-PCR和Western blot分别检测大鼠胃组织PTEN、PI3K、AKT基因及蛋白表达。

1.7  ELISA检测大鼠胃组织血管内皮生长因子含量

将试剂盒和待测血清平衡至室温，稀释准备对照品和洗涤液，按要求加样、温育、洗涤、温育、洗涤、显色、终止，酶标仪测定450 nm波长处各孔吸光度，并绘制标准曲线，计算样品浓度。严格按ELISA试剂盒说明书进行操作。

1.8  RT-PCR检测大鼠胃组织磷酸酶张力蛋白同源物基因、磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B基因表达

采用Trizol法提取总RNA，测定其OD260/OD280均在1.8～2.0，反转录为cDNA，PCR扩增PTEN、PI3K、AKT基因片段。引物设计：从NCBI基因库中查询目标基因ID及序列，引物由TAKARA公司宝生物工程大连有限公司设计和合成。β-Actin引物序列：上游5'-GGAGATTACTGCCCTGGCTCCTA-3'，下游5'-GACTCATCGTACTCCTGCTTGCTG-3'，扩增片段长度150 bp;PTEN引物序列：上游5'-CCAATGGCTA AGTGAAGACGACAA-3'，下游5'-CATAGCGCCT CTGACTGGGAATA-3'，扩增片段长度197 bp;PI3K引物序列：上游5'-CTGGAGAGCTTGGAGG ACGA-3'，下游5'-TCGCAAGAACCAGAATAAGAAGTG-3'，扩增片段长度159 bp;AKT引物序列：上游5'-ATGGACTTCCGGTCAGGTTCA-3'，下游5'-GCCC TTGCCCAGTAGCTTCA-3'，扩增片段长度126 bp。本实验选择β-actin作为内参基因，同一种基因在模板进行6次平行实验，每次平行试验设置3个复孔，记录目的基因和β-actin的Ct值。运用ΔΔCt法分析数据，计算相对表达量，检测β-Actin及目的基因Ct值。ΔCt1=测试组目的基因Ct值-测试组β-actin Ct值，ΔCt2=对照组目的基因Ct值-对照组β-actin Ct值，ΔΔCt=ΔCt1-ΔCt2，相对表达量为2-ΔΔCt。

1.9  Western blot检测大鼠胃组织磷酸酶张力蛋白同源物基因、磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B蛋白表达

使用RIPA法提取胃组织蛋白，BCA法进行蛋白定量，SDS-PAGE电泳，转膜，封闭。GAPDH Antibody溶液配制（1∶1000）：GAPDH Antibody 10 μL，封闭液10 mL;AKT Antibody溶液配制（1∶500）：AKT Antibody 20 μL，封闭液10 mL;PTEN Antibody溶液配制（1∶1000）：PTEN Antibody 10 μL，封闭液10 mL;PI3K Antibody溶液配制（1∶1000）：PI3K Antibody 10 μL，封闭液10 mL。37 ℃摇床4 h，1×TBST洗涤3次×10 min，加入HRP标记羊抗兔二抗。HRP*Goat AntiRabbit IgG（H+L）溶液配制（1∶1000）：HRP*Goat AntiRabbit IgG（H+L）10 μL，封闭液10 mL;37 ℃摇床2 h，1×TBST洗涤3次×10 min，采用化学发光底物化学发光，暗室曝光显影后用Quantityone图像分析软件进行扫描分析。

1.10  统计学方法

采用SPSS22.0统计软件进行分析。实验数据以x（—）±s表示，组间均数比较用方差分析，方差齐用S-L-D法比较，方差不齐用Tamhane's T2法比较。P<0.05表示差异有统计学意义。

2  結果

2.1  一般状况

实验过程中空白组大鼠精神状态好，反应灵敏，被毛顺滑有光泽，大便以棕褐色质软颗粒为主;造模第6周后，造模组大鼠开始出现精神萎靡，摄食量减少，倦怠扎堆，反应迟钝，被毛杂乱无光泽易脱落等，随着造模的延续，大多数大鼠表现为弓背弯曲、眯眼蜷缩、消瘦昏睡、厌食怠动、反应迟钝、被毛稀疏枯槁无光泽、大便量少质干或便溏，总体生存状态较差。药物治疗阶段，空白组大鼠一般状况良好，体型逐渐增大;模型组大鼠精神萎靡、厌食倦怠、反应迟钝、消瘦嗜睡、皮毛枯槁无光泽;香砂六君子汤高剂量组上述表现逐渐减轻，治疗10周后香砂六君子汤高剂量组大鼠精神状态基本恢复正常，活动及摄食量正常，反应较为灵敏，被毛疏散但有光泽;香砂六君子汤中剂量组及维酶素组大鼠上述表现均有不同程度改善，但恢复相对缓慢;而香砂六君子汤低剂量组大鼠无明显好转，仅少量较模型组大鼠症状有所缓解。

2.2  胃组织病理形态学观察结果

空白组大鼠胃黏膜各层结构完整，上皮细胞及腺体排列规整，大小及形状较一致，黏膜固有层炎性细胞少见;模型组大鼠胃黏膜变薄，上皮细胞及腺体排列紊乱、稀疏，腺体数目明显减少，黏膜肌层增厚向固有层延伸，可见大量炎性细胞浸润;维酶素组大鼠胃黏膜较薄，腺体排列欠整齐，腺体数目减少，可见较多炎性细胞浸润，较模型组有所好转;香砂六君子汤高剂量组大鼠胃黏膜各层结构基本正常，腺体排列比较规整，间质有少许炎性细胞;香砂六君子汤中剂量组大鼠胃黏膜腺体排列比较规整，各层结构较为正常，可见少量腺体变形萎缩及炎性细胞;香砂六君子汤低剂量组大鼠胃黏膜较薄，腺体数目减少，排列紊乱，可见大量炎性细胞浸润。结果见图1。

图1  各组大鼠胃组织形态（HE染色）

2.3  香砂六君子汤对模型大鼠胃组织血管内皮生长因子含量的影响

与空白组比较，模型组大鼠胃组织VEGF含量显著升高，差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较，各给药组大鼠胃组织VEGF含量均有降低趋势，其中，香砂六君子汤高、中剂量组大鼠胃组织VEGF含量显著降低，差异有统计学意义（P<0.01）。结果见表1。

表1  各组大鼠胃组织VEGF含量比较（x（—）±s）

注：与空白组比较，**P<0.01;与模型组比较，△△P<0.01

2.4  香砂六君子汤对模型大鼠胃组织磷酸酶张力蛋白同源物基因、磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B mRNA及蛋白表达的影响

与空白组比较，模型组大鼠胃组织PTEN mRNA及蛋白相对表达显著降低，PI3K、AKT mRNA相对表达水平显著升高，差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较，各给药组大鼠胃组织PTEN mRNA及蛋白表达均有升高趋势，PI3K、AKT mRNA及蛋白表达有降低趋势，其中香砂六君子汤高、中剂量组大鼠胃组织PTEN mRNA及蛋白表达均显著升高，高剂量组大鼠胃组织PI3K、AKT mRNA及蛋白表达均显著降低，差异有统计学意（P<0.01）。结果见表2、图2。

表2  各组大鼠胃组织PTEN、PI3K、AKT基因及蛋白表达比较（x（—）±s）

注：与空白组比较，**P<0.01;与模型组比较，△△P<0.01

注：K.空白组;M.模型组;W.维酶素组;G.香砂六君子汤高剂量组;Z.香砂六君子汤中剂量组;D.香砂六君子汤低剂量组

图2  各组大鼠胃组织PTEN、PI3K、AKT蛋白免疫印迹图

3  讨论

香砂六君子汤作为治疗脾胃虚弱，湿浊内生，气机不通经典方药，遵循“健脾理气和胃”治疗原则。香砂六君子汤出自《古今名医方论》[13]，由六君子汤加木香、砂仁而成，用于治疗脾胃气虚、痰阻气滞证。方中以大补元气、补脾益气之人参为君;臣以白术健脾燥湿、助脾运化;佐以茯苓渗湿健脾，配白术健运脾气，使人参、白术补而不滞，湿无所聚，痰无所生;半夏燥湿化痰、和胃止呕，配以陈皮理气健脾，二药合用，共奏理气健脾、燥湿化痰、消痞散结之效;砂仁行气调中，和胃醒脾;木香行气止痛、醒脾和胃，能升降诸气;甘草和中益气，擅长发挥调和诸药药性的作用。诸药合用，共奏健脾和胃、理气畅中之效。

VEGF可促进血管生成，在肿瘤生长和转移中发挥重要作用。有研究表明，VEGF在胃癌前病变（PLGC）阶段即存在较高表达，在胃癌发生早期阶段可能起一定作用[14]。蔺焕萍[15]通过免疫组化检测小鼠PLGC组织中VEGF、信号转导及转录激活因子（STAT3）和HIF-1α的表达，发现中药参佛胃康可下调HIF-1α、STAT3和VEGF的表达，逆转PLGC病变，其逆转PLGC的机制与降低VEGF-STAT3-HIF-1α信号转导蛋白的表达，抑制异型增生，促进修复有关。有研究表明，黄芪多糖可下调PLGC模型大鼠p53、p65、VEGF蛋白表达，降低细胞凋亡指数，从而控制PLGC进展[16]。

PI3K/AKT信号通路是细胞内重要的信号转导通路，参与调节细胞的凋亡、增生、迁移、分化和代谢。作为PI3K/AKT信号通路重要的负调控因子，PTEN通过使磷脂酰肌醇（3，4，5）-三磷酸（PIP3）脱磷酸生成PIP2以保持PIP3的低水平，从而抑制PI3K/AKT通路的活化以达到抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的目的[17-18]。Yang等[19]研究发现，正常胃黏膜及肠化生组织中PTEN蛋白表达明显高于不典型增生及胃癌，且呈递减趋势，表明在正常胃黏膜发展到胃癌过程中，PTEN蛋白表达下降，其抑制肿瘤细胞增殖分化能力减弱，促进肿瘤发展，说明PTEN在胃癌发生发展过程中起抑制作用。

PI3K是一种胞内磷脂酰肌醇激酶，由调节亚基p85和催化亚基p110所组成，且PI3K本身具有丝氨酸/苏氨酸（Ser/Thr）激酶的活性。一旦PI3K被激活，p110可以使PIP2磷酸化转化为PIP3，进而与AKT的N端PH结构域结合，促使AKT活化。而活化的AKT则能通过磷酸化作用于下游促凋亡蛋白BAD而发挥作用。韦维等[20]采用MNNG复制CAG大鼠模型，并运用安胃汤进行干预，结果显示，与空白组比较，模型组大鼠胃黏膜PI3K、AKT基因及蛋白表達升高，PTEN基因及蛋白表达下降;经中药治疗后大鼠PI3K、AKT基因及蛋白表达下降，PTEN基因及蛋白表达升高，说明PI3K/AKT信号传导通路参与CAG大鼠胃黏膜病变，且通过下调胃黏膜细胞PI3K、AKT基因及蛋白的表达，上调胃黏膜细胞PTEN基因及蛋白的表达，达到治疗CAG的作用。王彦刚等[21]采用随机单盲对照临床试验设计，将80例CAG患者随机分为2组，治疗组予化浊解毒方治疗，对照组予阿拉坦五味丸治疗，结果表明化浊解毒方能显著降低血清及胃黏膜组织AKT、受体酪氨酸激酶（c-Met）的表达，说明调控AKT、c-Met的表达水平能对慢性胃炎产生作用。江明礼等[22]构建幽门螺杆菌（Hp）感染慢性胃炎动物模型，给予苗药头花蓼治疗后，采用Western blot和RT-PCR技术检测大鼠胃黏膜组织，结果显示苗药头花蓼可能通过上调PTEN表达、抑制AKT表达，从而改善Hp引起的胃黏膜炎症。

本研究结果显示：与空白组比较，模型组大鼠胃组织PTEN基因及蛋白表达显著降低，提示CAG发病与大鼠胃组织PTEN基因及蛋白表达降低有关;与模型组比较，香砂六君子汤高剂量组大鼠胃组织PTEN基因及蛋白表达显著升高，提示香砂六君子汤通过上调CAG大鼠胃组织PTEN基因及蛋白表达而治疗CAG。与空白组比较，模型组大鼠胃组织VEGF含量及AKT、PI3K基因及蛋白表达显著升高，提示CAG发病与胃组织VEGF含量及AKT、PI3K基因及蛋白表达升高有关;与模型组比较，香砂六君子汤高剂量组大鼠胃组织VEGF含量及AKT、PI3K基因及蛋白表达显著降低，提示香砂六君子通过下调CAG大鼠胃组织VEGF含量及AKT、PI3K基因和蛋白表达，调节增殖和凋亡平衡机制，从而改善CAG病变。

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（收稿日期：2019-07-05）

（修回日期：2019-07-20;编辑：华强）