血清线粒体DNA水平在重症感染诊断的作用

徐美玲，容永璋，林华新，陆小蒟

（江门市人民医院，广东 江门 529000）

脓毒症（sepsis）引起多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）是危重患者死亡的主要原因之一。目前研究表明MODS的发生与发展主要是由于受损细胞氧利用失衡导致[1-3]。由于氧气在体内主要利用者是线粒体，线粒体可能在脓毒症发病过程中扮演重要角色。国外研究指出：感染性休克患者在入住ICU的24小时内，骨骼肌线粒体功能障碍的程度与疾病的严重程度有关。近年研究证明，细胞损伤后释放线粒体碎片进入血液循环能激活中性粒细胞[4-5]。因此重症感染时线粒体功能破坏，可能最终导致多器官功能障碍。

1 资料和方法

1.1 一般资料

取2016年11月～2018年6月江门市人民医院ICU收治的脓毒症患者56例，根据疾病严重程度分脓毒症组和脓毒性休克组。脓毒症组28例（男14例、女14例），脓毒性休克组28例（男15例、女13例）。纳入标准：1、符合欧洲重症医学会发布脓毒症3.0定义及诊断标准；2、入组者经过相关检查最终得到确诊。排除标准：服用刺激炎症介质释放的药物 ；合并严重凝血功能障碍、免疫系统疾病；住院时间小于12小时。取同期入院健康体检者28例（男14例、女14例），设为对照组。本研究经医院伦理委员会批准通过。

1.2 方法

根据纳入标准，病例入组后收集性别、年龄、感染部位等资料。入组12小时内采集空腹静脉血15 ml分作三份，第一份采用RT-PCR技术测定血清mtDNA水平；第二份采用血液生化分析仪行血常规、急诊生化；第三份利用胶体金法检测CRP及PCT水平。同时应用DoCare重症监护系统记录患者生命体征，行APACHE II评分。

1.3 统计分析

采用SPSS 23.0软件分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，两组计量数据分析用的独立样本t检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

实验组（脓毒症组与脓毒性休克组）与对照组年龄、血清mtDNA水平、PCT、CRP、白细胞及APACHE Ⅱ比较，其中血清mtDNA水平、PCT、CRP、白细胞及APACHE Ⅱ差异具有统计学意义(P＜0.05)。而脓毒症组与脓毒性休克组比较，血清mtDNA水平、PCT及APACHE Ⅱ

差异具有统计学意义(P＜0.05)。

表1 两组比较（±s）

表1 两组比较（±s）

注：*与实验组相比，P＞0.05；#与实验组相比，P＜0.05。**脓毒症组与脓毒性休克组相比，P＞0.05；##脓毒症组与脓毒性休克组相比，P＜0.05

组别 年龄(岁) mtDNA（pg/ml） PCT(ng/ml) CRP(mg/L) 白细胞(×109/L)APACHE Ⅱ(分)对照组 62.0±6.5* 275.3±13.9# 0.2±0.15# 3.8±1.5# 7.3±2.4# 4.3±1.2#实验组 脓毒症组 63.0±17.0 506.1±98.3 11.6±5.7 41.6±9.5 20.3±3.4 18.4±2.6脓毒性休克组 62.0±19.0** 1504.1±34.7## 54.9±32.3## 45.9±14.4** 21.8±4.7** 24.8±4.2##

3 讨 论

脓毒症病因多样，包括严重创伤、感染以及在此过程中出现的循环障碍、再灌注损伤等，以上均可导致MODS发生。研究指出：受损细胞氧利用失衡是脓毒症发生与发展关键因素之一[6]。感染时，机体中的内毒素能直接损害线粒体功能，抑制电子传递。在重症感染早期，线粒体诱生型一氧化氮（NO）合酶激活，大量NO产生，抑制线粒体功能；同时线粒体产生大量活性氧，直接损害膜脂、脂蛋白，引起线粒体功能障碍。创伤患者，由于创伤后大量细胞破裂，释放到循环中的mtDNA特异性结合中性粒细胞内的TLR9，通过MAPK信号转导通路活化中性粒细胞，导致远隔器官组织的损伤，而激活的中性粒细胞引起系统性炎症，是创伤后无菌性SIRS的重要启动机制之一。临床研究发现重度创伤病人血清mtDNA平均浓度是健康对照组的1000倍[7-8]。

临床中应用PCT、CRP等指标，对感染性疾病诊断具有重要意义[9-10]。此外，APACHE Ⅱ评分是评估患者病情的指标之一。本研究中，实验组mtDNA水平、PCT、APACHEⅡ评分、CRP及白细胞均高于对照组，提示以上指标对于诊断机体处于感染状态有临床价值。而在脓毒性休克组及脓毒症组对比中，mtDNA水平、PCT及APACHE Ⅱ评分的差异具有统计学差异，其中mtDNA水平在脓毒性休克组明显升高，提示患者器官功能损伤越重，组织细胞损伤越重，血清mtDNA水平越高。

本研究结果提示联合血清mtDNA水平、PCT及APACHEⅡ评分对评估脓毒症患者病情严重程度具有价值。但鉴于本实验采样标本较少，实验结果存在偏倚，下一步研究方向可通过扩样本量进一步证明线粒体DNA水平能评估患者的病情与预后。