HPLC法测定参茸壮骨丸中升麻素苷的含量

王丽艳，程晓英，李梦瑶

（1.吉林省医药中等职业学校，吉林 吉林 132000；2.吉林市食品药品检验所，吉林 吉林 132000）

防风是参茸壮骨丸中主药之一。参茸壮骨丸目前的质量标准是《中华人民共和国卫生部药品标准》（中药成方制剂第二十册），该标准只有其显微鉴别方法，为了更好地控制参茸壮骨丸的内在质量标准，本文采用了高效液相色谱法[1,2]测定参茸壮骨丸中防风中升麻素苷含量。

1 实验方法与结果

1.1 实验材料

LC－2010A高效液相色谱，CLASS－VP色谱工作站；Agilent 8453紫外-可见分光光度计；SartoriusBp211D型电子天平；升麻素苷对照品；参茸壮骨丸；水为超纯水；流动相所用甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

1.2 色谱条件

色谱柱：Agilent Technologies ZORBA X Extend-C18 4.6×250 mm，5 μm；流动相：甲醇-水（35：65），流速：1.0 ml·min-1；柱温：30℃；检测波长：254 nm。

1.3 溶液制备

1.3.1 对照品溶液的制备

精密称取升麻素苷对照品适量，加甲醇制成每1 ml各60μg·ml-1的溶液，摇匀，备用[3]。

1.3.2 供试品溶液的制备

取5 g样品，研细，精密称定，将其放入带塞锥形瓶中，精密加入甲醇10 mL，称定重量，水浴回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，过0.45 μm的微孔滤膜，即得。

1.3.3 阴性样品溶液的制备

取处方中防风以外的其余药材适量，按处方制法制成阴性对照物，取阴性对照物适量，同样品处理方法制得阴性样品溶液。

1.4 专属性试验

取供试品溶液和阴性对照溶液各5 μL，对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明对供试品中的升麻素苷进行测定是可行的。

1.5 线性关系

升麻素苷在22.26～222.60μg·ml-1范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系（r=0.9999）。

1.6 精密度

经检测，RSD为0.3%，本实验的精密度良好。

1.7 稳定性试验

经检测，RSD为0.5%，表明供试品24h内稳定性较好。

1.8 重复性试验

取供试品共5份，分别按“1.3.2”方法制备供试品溶液，进行测定，分别精密吸取供试品溶液5 μL，对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，计算求得升麻素苷含量的均值为140.13μg·ml-1，RSD为0.1%，表明重复性较好。

1.9 加样回收率试验

制备供试品溶液，分别精密称取已知含量的样品（升麻素苷含量140.13μg·g-1）适量，共9份，分别置具塞锥形瓶中，分别精密加入升麻素苷对照品贮备液（60μg·ml-1）适量，按“1.3.2”方法操作，得回收率试验溶液，依法测定。

1.10 样品含量测定

在上述试验基础上，分别精密吸取依标准方法制备的供试品溶液10 μL和对照品溶液5 μL，分别注入液相色谱仪，测定3批参茸壮骨丸中升麻素苷的峰面积，按外标法计算其含量（n=3），结果见表1。

表1 3批参茸壮骨丸含量测定结果

2 讨 论

2.1 流动相的选择

经多次测定确定流动相为甲醇-水（35：65），分离效果达到要求，对照品的峰形好。

2.2 检测波长的选择

在实验前用紫外分光光度计对升麻素苷对照品和供试品进行扫描，确定波长254 nm为检测波长。

2.3 结果

参茸壮骨丸升麻素苷的测定结果准确，可将该含量测定方法作为参茸壮骨丸的质量控制标准。

2.4 前景

可提高参茸壮骨丸的质量标准，增加含量测定项，规定升麻素苷应不得少于120 μg·g-1。