乳腺癌患者TGF-β、SMAD3、SOX2表达特点及临床意义

王鹏 ，陈晓 ，任浩

（1.南阳医学高等专科学校第一附属医院普外科，河南 南阳 473058；2.南阳医学高等专科学校第一附属医院重症医学科，河南 南阳 473058；3.南阳医学高等专科学校第一附属医院眼科，河南 南阳 473058）

乳腺癌是乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤,多发于女性，极少见于男性[1]。乳腺癌的临床表现主要包括乳房肿块、非妊娠期乳头溢液、乳腺和周围皮肤状态改变及乳头、乳晕异常等[2]。根据患者肿瘤分期和身体状况，医生选择采取手术、放疗、化疗、内分泌治疗、生物靶向治疗及中医药辅助治疗中的一类或联合使用[3]。近年许多研究表明SOX2与肿瘤的发生以及肿瘤干细胞的调控关系密切，转化生长因子-β（TGF-β）在肿瘤的发生和转移中起到重要作用，SMAD3则与TGF-β共同激活或抑制相关靶基因的转录从而影响肿瘤细胞的增殖和分化过程[4]。为观察乳腺癌患者的 TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白表达水平及其与肿瘤标志物水平的相关性，研究选取在我院接受治疗的乳腺癌患者(观察组)及我院接受手术治疗的乳腺良性肿瘤患者（对照组）,对比分析两组患者 TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的差异，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 患者一般资料 选取2017年2月-2018年2月在我院接受治疗的乳腺癌患者为研究对象。纳入标准：⑴年龄≥18周岁；⑵经手术病理检查确诊为乳腺癌者；⑶无其他部位原发肿瘤者。排除标准：⑴不符合纳入标准者；⑵合并其他系统严重疾病者。根据纳入排除标准共纳入研究对象100例，年龄28~62岁，平均46.08±5.47岁；乳腺良性肿瘤组纳入排除标准：成年女性，经病理检查确诊为乳腺良性肿瘤者，共纳入100例，年龄30~64岁，平均46.11±4.89岁。两组患者年龄等一般资料比较无差别。本项研究经医院伦理委员会评审通过，且所有患者均知情同意。

1.2 方法 所有患者均将离体的新鲜组织标本放入甲醇中固定，然后用石蜡包埋，制成切片后，切片经烘烤后使用二甲苯及梯度乙醇进行脱蜡水化。经柠檬酸盐缓冲液高压抗原修复后,加入一抗，冰箱（4℃）中过夜，在37℃条件下复温,加入二抗，室温放置半小时。经PBS冲洗三次，DAB显色2 min后，使用蒸馏水冲洗干净，再用苏木精衬染，最后采用梯度乙醇及二甲苯脱水，中性树胶封固，风干，光镜下观察，评分，留图。TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平根据染色强度及阳性细胞的数量进行评分。对各蛋白的总体表达水平进行半定量评估。

1.3 评价指标 观察两组患者 TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的差异，比较不同临床特征乳腺癌患者 TGF-β、SMAD3、SOX2 蛋白水平的差异，分析影响乳腺癌患者TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的因素。

1.4 统计学处理 数据录入后，采用SPSS11.5软件进行分析。计数和计量资料分别采用例和均数±标准差表示。两组患者、不同特征乳腺癌患者TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白表达情况的比较采用t检验进行分析，采用回归分析法分析影响乳腺癌患者TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的因素。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者 TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的比较 乳腺癌患者的SMAD3、SOX2蛋白表达水平低于乳腺良性肿瘤组，TGF-β蛋白表达水平高于乳腺良性肿瘤组，见表1。

表1 两组患者TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的比较

2.2 不同特征乳腺癌患者 TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白表达情况的比较 分化程度为中、低分化、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的乳腺癌患者的SMAD3、SOX2蛋白表达水平较低，TGF-β蛋白表达水平较高，见表2。

2.3 影响乳腺癌患者 TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的因素分析 将单因素分析有意义的因素：分化程度、有无淋巴结转移和TNM分期作为自变量，以乳腺癌患者 TGF-β、SMAD3、SOX2 蛋白水平作为因变量，进行多重逐步回归分析。结果分化程度和淋巴结转移进入回归方程，见表3。

表3 影响乳腺癌患者TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平的因素分析

表2 不同特征乳腺癌患者TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白表达情况的比较

3 讨论

乳腺癌细胞可转移扩散到身体各个部位,严重危害患者生命，是一类女性常见的恶性肿瘤[5,6]。一级亲属中有乳腺癌患者、乳腺腺体致密、月经初潮早绝经晚、长期使用雌激素和酗酒均为乳腺癌发生的高危因素，通过积极锻炼、健康饮食、良好的作息习惯、积极治疗乳腺疾病、高危人群中采用药物预防、合理应用雌激素等预防措施可有效降低乳腺癌的发生率[7]。乳腺癌患者常表现为乳腺肿块、乳头溢液、皮肤改变、乳头和乳晕异常及腋窝淋巴结肿等症状[8]。自20世纪70年代末开始全球乳腺癌发病率就一直呈上升趋势,我国乳腺癌发病情况同样较为严重。近年我国乳腺癌发病率的增长速度高出高发国家1～2个百分点,在我国乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位[9]。

TGF-β是属于一组调节细胞生长和分化的细胞因子，TGF-β表达与肿瘤相关成纤维细胞的形成有关[10]。SMAD3属于受体调节型SMAD蛋白，SMAD3在TGF-β信号从细胞表面受体传导至细胞核的过程中起到关键性作用,并且SMAD3与TGF-β共同激活或抑制它们调节的靶基因的转录[11]。其中转录因子SOX2是SOX基因家族的一个重要成员，SOX2促进肿瘤细胞中VEGF、CD13的表达，其表达与淋巴结转移、分级及TNM分期有关[12]。乳腺癌患者的SMAD3、SOX2蛋白表达水平低于乳腺良性肿瘤组，TGF-β蛋白表达水平高于乳腺良性肿瘤组。本结果证实了SMAD3、SOX2蛋白表达水平与肿瘤良、恶性之间的密切关联，同时也说明了TGF-β对肿瘤生长的促进作用。

淋巴结转移是肿瘤最常见的转移方式,出现淋巴结转移常会导致肿瘤预后效果差[13]。TNM分期数越高，患者的生存期就越短，预后就越差[14,15]。分化程度为中、低分化、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的乳腺癌患者的SMAD3、SOX2蛋白表达水平较低,TGF-β蛋白表达水平较高,通过SMAD3、SOX2和TGF-β蛋白表达水平可在一定程度上判断乳腺癌患者肿瘤恶性程度的高低。

通过单因素分析，将分化程度、有无淋巴结转移和TNM分期作为自变量，以乳腺癌患者TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平作为因变量，进行多重逐步回归分析，结果分化程度和淋巴结转移进入回归方程,该结果表明分化程度和淋巴结转移与TGF-β、SMAD3、SOX2蛋白水平之间存在密切关联，可将二者共同结合来判断患者所处分期，选择最佳的治疗方案。

综述所述,乳腺癌患者的SMAD3、SOX2蛋白表达水平较低，TGF-β蛋白表达水平较高，且与分化程度和淋巴结转移密切相关,在临床诊断中具有一定的应用价值。