血浆β-防御素-3联合IL-6、PCT水平对下肢骨折患者手术部位感染的预测价值

朱梁豫，李兴华，王雷鸣

（郑州市骨科医院，河南 郑州 450000）

骨折手术后发生感染是常见并发症之一，骨折手术通常时间较长且术中多伴随辅助检查，将增加患者手术发生感染风险[1]。骨折手术患者术后卧床时间较长，骨折部位血液供给差，一旦出现感染轻则影响患者伤口愈合,严重者将造成骨髓炎等严重并发症，甚至导致截肢[2,3]。白细胞介素-6（IL-6）是一种多肽，可参与刺激免疫反应中细胞增殖、分化等[4]；降钙素原（PCT）则是一种具有高特异性及敏感性的判断感染的指标,当患者受到细菌感染及全身炎症时，其水平将异常升高[5]。防御素是具有免疫调节、促进伤口愈合作用的多肽，可抗微生物活性,其中β-防御素-3是可诱导性防御素，可抵御入侵微生物并调节免疫作用[6]。基于此，本文通过分析骨折术后感染患者的β-防御素-3、IL-6、PCT水平，探究其联合预测价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年9月到2018年9月到医院就诊的下肢骨折患者155例,根据术后是否发生感染分为感染组（n=25）及未感染组（n=130）。感染组男性17例，女性8例；年龄25~65岁，平均（43.17±4.32）岁；手术时间 1~4h，平均（2.18±0.22）h；交通伤13例，跌倒伤8例，坠落伤4例。未感染组男性72例,女性58例;年龄23~63岁,平均（43.0 4±4.30）岁；手术时间 1~4h，平均（2.13±0.21）h；交通伤67例，跌倒伤48例，坠落伤15例。两组患者一般资料可比（P＞0.05）。

纳入标准：⑴由影像学检测确诊为下肢骨折且进行手术治疗患者；⑵临床资料完整。排除标准：⑴妊娠期女性；⑵脑外伤患者；⑶自身免疫疾病患者；⑷血液系统疾病患者；⑸精神疾病者；⑹合并恶性肿瘤患者：⑺急慢性炎症患者；⑻心、肝、肾等脏器功能严重不全者；⑼严重外伤史患者；⑽严重感染患者；(11)甲状腺功能亢进等疾病患者。

1.2 方法 所有患者均在术后1d检测血浆β-防御素-3、IL-6、PCT水平。采用双抗夹心免疫发光法检测所有患者血清降钙素原（procalcitonin，PCT）水平 （试剂盒购于北京华夏远洋科技有限公司），分离血清后加入试剂盒反应孔中并在室温下平衡30min，当PCT超过0.5ng/ml可在观察区观察到淡红色条带,条带颜色深浅度与血清中PCT浓度成正比，与参考卡片上提供测试浓度相关。采用酶联免疫吸附法检测血浆β-防御素-3、IL-6水平 （试剂盒均购于武汉华美生物工程有限公司）：设立8孔标准孔，加入100μl样品稀释液，第1孔添加100μl标准品，混合均匀后吸出100μl加入第 2孔，重复操作至第7孔，第7孔吸出100μl溶液弃去，第8孔为空白对照；在8个孔中添加血清并混匀，在37℃环境下静置120min；洗板5次后加1滴抗体并反应60min，洗板5次后加2滴酶标抗体反应60min，洗板5次后加2滴底物反应60min，加1滴终止液30min用酶标仪检测450nm处OD值，作出标准曲线检测计算IL-6、β-防御素-3水平。

1.3 观察指标 ⑴检测两组患者血浆β-防御素-3、PCT、IL-6 水平；⑵统计血浆 β-防御素-3、PCT、IL-6水平对术后感染患者的预测价值。

1.4 统计学方法 本文数据采取统计学软件SPSS17.0进行处理，计量资料采用t检验分析，β-防御素-3、合IL-6、PCT分别检测及联合预测价值使用受试者工作特征（ROC）曲线分析，计算ROC曲线下面积（AUC）；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血浆β-防御素-3、PCT、IL-6水平比较 感染组患者血浆β-防御素-3低于非感染组，PCT、IL-6水平高于非感染组,差异有统计学意义（P＜0.05）；见表 1。

表1 两组患者血浆β-防御素-3、PCT、IL-6水平比较

2.2 血浆β-防御素-3、PCT、IL-6水平对术后感染患者的预测价值比较 血浆β-防御素-3、PCT、IL-6检测术后感染患者的AUC值分别为0.656、0.704、0.708，联合检测 AUC 值为 0.807；见图 1。

图 1 血浆 β-防御素 -3、PCT、IL-6水平对术后感染患者的预测价值比较

3 讨论

随着社会不断发展,近年来我国发生意外事故比例不断增加，导致下肢骨折发生率明显上升。临床中，部分患者对疼痛、发热等不适症状敏感性较低，发生伤口感染后通常无明显症状，直至病情发展到严重阶段才表现出全身反应,此时感染已不再局限化，增加治疗难度[7,8]。因此，对术后感染患者进行早期诊断及治疗十分关键。

防御素是一种单链的特殊抗菌肽,富含精氨酸残基，具有稳定分子结构及光谱抗菌活性[9]。防御素可直接杀灭入侵机体的病原微生物,并在创伤修复、获得性免疫反应中有重要作用。防御素可分为α及β两种,其中β-防御素在防御系统中作用十分重要，β-防御素-3可被多种炎症细胞因子、细菌等所调控，呈诱导性表达。β-防御素-3基因是组成固有免疫应答的重要部分,当出现炎症后将减弱固有免疫并加强适应性免疫,从而降低患者防御能力并减少分泌β-防御素-3[10]。IL-6是多种细胞对白细胞介素-1及少量肿瘤坏死因子-α（TNF-α）反应时合成的细胞因子，正常状态时含量极低，但生物活性高，可通过自分泌及旁分泌产生作用[11]。IL-6具有强致炎活性,直接作用血管内皮细胞并使其通透性增加，造成大量炎性渗出，同时可与TNF-α协同形成炎症介质网络[12]。IL-6水平上升时一方面将激活防御反应分化及低调前炎症反应,并促使中性粒细胞凋亡，减轻炎症反应；另一方面还将造成免疫功能失调，促使巨噬细胞分泌转化生长因子，导致免疫功能抑制。PCT是降钙素的前肽物质，无激素活性，源自甲状腺C细胞，是由氨基酸组成的糖蛋白[13]。正常状态下，极少量PCT将被释放进入血液循环，在健康人群中血液浓度为0.1~0.5μg/L，半衰期在10min左右,但当受到毒素或细胞因子影响时将造成蛋白溶解,从而使血清中水平升高[14]。细菌感染后血清PCT水平将显著升高,且将持续较长时间，而病毒感染、肿瘤、自身免疫疾病患者中仅轻度上升[15]。除微生物产物及细胞因子诱导释放P CT外，IL-6也可调节血液循环中PCT水平。

本文中术后感染患者血浆β-防御素-3水平更低，IL-6、PCT水平更高，可能原因为患者感染后防御能力降低，减少分泌β-防御素-3；PCT受到致病细菌影响后致使蛋白溶解，向血液循环中释放，故显著增加血液中含量；患者感染后将产生炎症反应，促使分泌大量IL-6；朱忠等[16]研究发现术后感染患者PCT、IL-6水平明显高于非感染组，姜慧等[17]研究发现牙周炎患者炎症越严重则β-防御素-3更低，提示患者感染后体内PCT、IL-6水平将明显上升且β-防御素-3水平与 炎症感染有一定联系,与本文结果相符。本文中血浆β-防御素-3、IL-6、PCT联合诊断术后感染患者AUC值更大，说明联合诊断更有效。

综上所述,本文发现骨折术后感染患者血浆β-防御素-3水平更低，IL-6、PCT水平更高，三者联合检测AUC值更大。