CKMB活性法和质量法检测结果回归方程建立和临床应用

刘建平 ，熊思忆 ，杨爱平 ，杨柳

(1.南昌大学第一附属医院检验科，江西 南昌 330006；2.南昌大学公共卫生学院 14级，江西 南昌330031；3.萧山人民医院检验科，浙江 杭州 311202；4.南昌市第三医院病理科，江西 南昌 330003)

CK-MB是CK的同工酶之一,它的主要来源是心肌，是非常重要的心肌损伤的标志物。临床将CKMB当做急性心肌梗死（AMI）的辅助诊断工具，也用在心肌梗塞发作后血栓溶解治疗的监控指标[1，2]。目前CKMB的检测方法主要酶活性法即间接酶免抑制法，得出CKMB活性结果。这个方法优点是简便、快速、经济、容易实现自动化，缺点是容易出现一定比例假性升高的结果、干扰临床医生的判断[3]。CKMB另一种检测方法是质量法，它的优点是特异性高、准确度好、抗干扰性强，缺点是试剂相对昂贵、费时[4]。因此临床工作中CKMB检测以活性法为主,当其出现假性升高时可以进行质量法检测纠正，这样可以兼顾两者的优点。现对CKMB活性法和质量法检测结果进行logistics分析得出两者的回归方程，并探讨其在纠正假性升高CKMB活性法结果中的应用。

1 材料与方法

1.1 标本来源 我院2017年体检健康的正常人25份和确诊心肌梗死病人（诊断标准参照2015版急性ST段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南[5]）的血清标本35份，年龄25~86岁，男女标本占比相同。我院2017年某周常规进行生化检测的临床标本。

1.2 试剂与仪器 上海德赛肌酸激酶MB同工酶测定试剂盒（速率法）、校准品及高、低浓度质控品;丹麦雷度肌酸激酶MB同工酶测试卡（时间分辨免疫荧光法）及定标卡和质控品。丹麦雷度AQT90 FLEX免疫分析仪、北京白洋台式4000A型低速离心机、日立7600-210全自动分析仪。

1.3 实验方法 对临床常规样本采用间接酶免疫抑制法检测CKMB，IFCC连续监测法检测CK。对用于回归方程建立的体检健康人和心梗病人血清标本同时采用间接酶免疫抑制法和时间分辨免疫荧光法检测CKMB活性及质量。

1.4 数据计算与统计学处理 统计分析采用SPSS19.0软件，相关回归方程建立采用logistics回归，R2>0.9两者显著相关。计数资料以百分率表示；计量资料以（x±s）表示、组间比较采用 t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 实验结果

2.1 CKMB活性法和质量法检测结果回归方程以X轴为质量法结果，Y轴为酶活性结果，经过logistics回归得出方程Y=0.0263X3-1.0666X2+11.724X-18.747（X>2以上适用，因为质量法结果检测下限为2），R2>0.9，两者显著相关。见图1。

图1 CKMB活性法和质量法检测结果回归方程

2.2 CKMB活性法工作量及假性升高比例 我院一周CKMB的活性法总工作量是1883测试数，其中出现CKMB>0.3CK的标本数为220,所占比率为11.2%。CK-MB>CK活性的次数为66,比率为3.5 05%。出现危急值异常CK-MB＞CK＞50μ/L的标本数为18，所占的比率为0.96%。见表 1。

表1 我院一周CKMB活性法检测数及假性升高比例

2.3 假性升高CKMB活性法危急值与回归方程纠正值比较 假性升高CKMB活性法危急值结果与经质量法检测再经过两者回归方程纠正换算得出活性结果比较，P<0.05差异具有统计学意义。见表2。

表2 假性升高CKMB活性法结果与回归方程纠正出结果比较

3 讨论

CK为二聚体结构，主要分布在各种肌肉组织中和脑组织。 CK由M和B两个亚基构成,可以组成 3种同工酶，即CKMM、CKMB和CKBB[6,7]。CKMM主要存在于骨骼肌中。CKMB唯一含量丰富的器官是心肌。CKMB是心肌梗死较有价值的指标[8]。血清CKMB活性水平在AMI发病后4~6h出现增高，9~24h即可达到峰值，在48~72h恢复正常。CKMB活性可以用于AMI的诊断，估计梗死范围和判断再梗死[9]。另外AMI患者在溶栓治疗后出现的再灌注使得血清CK，CKMB活性升高，导致CK，CKMB峰值时间的提前，据此可以判断溶栓治疗后的再灌注情况[10]。CKBB主要存在平滑肌组织中，例如大脑、前列腺、肺、胃肠道[11]。CKBB在正常人血清中含量极微，可忽略不计。

CK和CKMB是目前临床上常用的指标，它们主要用于肌肉损伤和心肌损伤疾病鉴别和诊断[12],其中CKMB在心肌梗死等心肌损伤疾病中的诊断和治疗监测价值较大[13,14]。目前临床上常规设有C KMB危急值,我院CKMB活性检测结果大于50 U/L为危急值。当CKMB检测结果达到危急值时，临床医生需要立即处理。CK和CKMB常常联合检测应用，检验和临床医生可以通过CK，CKMB的值或者结合两者比值判断病情[15]。CKMB常用的检测方法采用的是活性法即间接酶免疫抑制法检测CKMB活性。它的原理是通过抗CK-M亚基抗体抑制M亚基活性检测B亚基活性,因正常人血清中CKBB含量极微可忽略不计,故所测结果乘2即可大致反映血液CKMB的活性。CKMB间接酶免疫抑制法检测在各级医院应用非常普遍,因其对仪器要求不高适合自动化,且经济，快速。但CKMB间接酶免疫抑制法存在一定比例的假性升高结果干扰临床医生对疾病的判断[16]。

由于CKMB组织学分布特点，CKMB不会超过CK的30%。大型三甲医院由于工作量大，实际遇到CK-MB/CK>30%的结果也不少。有学者将CK-MB/CK>30%的 256例病历进行病因学分析[17]，只有百分之八左右可以经过心电图、超声影像等其它检查确诊有心肌损伤的疾病。CKMB活性假性升高常见于恶性肿瘤、神经系统或严重肺、胃肠道平滑肌损伤的疾病[18,19]。目前关于如何纠正CKMB>30%CK假性升高现象及必要性还没有一个定论。因此本研究调查分析了我院临床实际工作中遇到假性升高CKMB活性法结果及建立活性法和质量法检测结果回归方程的临床应用。通过调查分析发现我院临床一周CKMB活性检测数1883，其中CKMB>0.3CK占比11.2%，CKMB>CK占比3.5%，对临床诊疗影响较大的CKMB>CK>50μ/L占比0.96%。如果CKMB和CK值都在正常参考范围之内,两者之间比例异常对临床影响较小。在CKMB质量法检测出现之前，出现CKMB>CK>50μ/L结果常使临床工作者感到困惑和棘手。因我们较难判断CKMB＞CK＞50μ/L是否是一个真危急值。当然临床上可以通过影像、B超、心电图、肌钙蛋白检测或者临床症状等最终判断病人是不是存在严重的心肌损伤疾病[20]。如直接将可疑的CKMB＞50μ/L酶活性结果危急值报送给临床,那么出现临床不符合的时候临床医生需要进一步采取一系列检查或者治疗来确诊是不是存在严重的心肌损伤。所以纠正假性升高CKMB活性法结果特别是假性升高的危急值，可以帮助临床医生精确诊断治疗、减少一系列不必要的检查、降低病人的经济负担。本研究中,我们建立了CKMB活性法和质量法结果回归方程，R2＞0.9，两者显著相关。我们选取临床工作中出现假性升高CKMB活性结果标本进行质量法检测,再将质量法检测结果经两者回归方程计算得出纠正后的接近真实CKMB活性结果。纠正后的CKMB活性结果与纠正前结果比较，P＜0.05、两者之间有显著差异,说明应用两者回归方程可以有效纠正假性升高CKMB活性法结果。

综上所述，CKMB是诊断心肌损伤的重要指标。目前CKMB活性法存在检测结果假性升高的可能，但由于其快速方便经济等原因还暂时不能被CKMB质量法取代。在各大医院，每天用于筛查心肌损伤的CKMB活性检测数量多,累积出现假性升高结果的次数和概率相对较多。当出现假性升高CKMB活性结果时,特别是明显影响临床判断的假性升高危急值有必要予以纠正。建立CKMB活性法和质量法检测结果回归方程有助于这类假性升高活性法结果的纠正。