不同微生物处理甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊生长性能、养分消化和瘤胃发酵的影响

王 坤，周 波，穆胜龙，刘 林，蒋小刚，邹彩霞*，何仁春

（1.广西大学动物科技学院，广西南宁 530005；2.广西扶绥广羊农牧有限公司，广西扶绥 532100；3.广西畜牧研究所，广西南宁 530002）

努比亚山羊原产于非洲东北部的埃及、苏丹等国家。2009 年5 月，广西从云南省引进努比亚山羊，经过10 年的饲养已初具规模[1-2]。冬季粗饲料资源匮乏是广西亟需解决的问题，而每年冬季有大量的甘蔗尾叶可供利用[3-4]。Couto 等[5]研究表明，甘蔗尾叶可以替代高精料肉牛日粮中的甘蔗，可作为一种低成本的粗饲料来源。辛明等[6]研究发现，饲喂甘蔗尾叶可以显著提高育肥羊的生长性能。可见，甘蔗尾叶可以作为牛羊粗饲料进行饲用，但由于广西属于亚热带季风气候区、高温且潮湿等气候原因，饲料储存易变质，所以需要采取青贮方式进行储存。Ando 等[7]研究发现在青贮中添加乳酸菌可以提高饲草青贮饲料的品质，增加动物采食量。Elli 等[8]试验发现，在青贮中添加植物乳杆菌、布氏乳杆菌和乳酸乳球菌的混合青贮（三叶草、玉米和黑麦草为青贮原料）会提高青贮饲料中的有机物消化率。周雄等[9]试验发现，无添加剂的自然青贮甘蔗尾叶替代一定比例王草可在一定程度上改善黑山羊生长性能，且对其血清生化指标无不利影响。虽然有很多学者使用不同微生物处理的青贮饲料进行饲养试验，但有关甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊生长性能、血液生化指标和瘤胃发酵的影响研究尚未见报道。为此，本试验旨在研究饲喂不同微生物处理甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊生长性能、血液生化指标和瘤胃发酵指标的影响，为开发利用甘蔗尾叶作为努比亚山羊饲料来源提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物及试验设计 选取72 只初始体重为 24.5 kg的努比亚山羊去势公羊，根据山羊初始体重按照随机区组试验设计分为4 个处理组，每组18 只羊，分组圈养，每个圈栏设置1 个饲槽，预试期7 d 和正试期42 d。采用单因素试验设计，取4 份切断至2～3 cm 的甘蔗尾叶，用喷雾器均匀将蒸馏水或者菌液喷洒在甘蔗尾叶上。对照组使用蒸馏水；T1 组选用实验室从甘蔗尾叶青贮中分离制得的菌液，其原菌液菌种及活菌数为植物乳杆菌（7.70×107CFU/mL）、干酪乳杆菌（1.64×108CFU/mL）、发酵乳杆菌（4.65×108CFU/mL）和鼠李糖乳杆菌（5.25×107CFU/mL）；商业发酵剂（T2）组选用市场上购买的菌液，其原菌液菌种及活菌数为黑曲霉（2.10×107CFU/mL）、枯草芽孢杆菌（1.20×108CFU/mL）、米曲霉（1.15×107CFU/mL）；商业发酵剂（T3）组选用市场上购买的另一款菌液，其原菌液菌种及活菌数为枯草芽孢杆菌（1.35×107CFU/g）、乳酸片球菌（1.16×107CFU/g）。菌液添加量都为1 mL/kg 甘蔗尾叶，均匀喷洒各组菌液后通过压捆打包机制成袋装青贮，在室内存放，青贮45 d 后开窖进行饲养试验。

1.2 试验日粮及管理 试验所用饲料原料均为广西扶绥广羊农牧有限公司提供。参考张丽英[10]的方法测定试验饲料原料及饲粮的营养成分，饲料粗饲料营养成分见表1，试验饲粮组成及营养成分见表2。

1.3 测定指标及方法

1.3.1 生长性能 记录每天每组圈栏料槽中的饲喂料重以及剩料重，根据试验天数、总耗料量以及各饲料原料的干物质计算各组试验牛平均日采食量（ADFI）、平均干物质采食量（ADMI）。

ADFI=（总饲喂量－总剩料量）/试验总天数

ADMI=ADFI×饲料中的干物质含量（%）

分别在试验第0 天和第42 天早上空腹称取各组每只羊体重，根据试验天数、总增重和平均日采食量计算平均日增重（ADG）、耗料增重比（F/G）。

1.3.2 血清采集 试验结束时，每个组选取6 只羊进行颈静脉采血，然后静置离心取血清，并-20℃保存待测。

1.3.3 养分消化率的测定 于试验结束前6 d 进行粪样采集工作（持续5 d），随机选取6 只体况接近的羊并做上标记，试验采用直肠取粪，每只羊采集30 g 羊新鲜粪样，加3 mL 浓度为10%硫酸混合均匀进行固氮后冷藏（-20℃）保存，同时采集各组饲料样本。利用酸不溶灰分法[11]测定养分消化率。

1.3.4 瘤胃液采集 各组试验羊于试验正试期最后1 d 采集瘤胃液，每个组随机抽取6 只体况接近的山羊，于晨饲前通过羊口腔瘤胃液采集器采集瘤胃液，弃掉前面20 mL 瘤胃液后收集100 mL，取15 mL 置于15 mL 无菌离心管内用于瘤胃微生物测定，然后用4 层纱布过滤后立即测定pH（pHs-3C 型），将滤液分装后-20℃保存，用于测定NH3-N 和挥发性脂肪酸（VFA）。

1.3.5 血液生化指标测定 血液样品使用KHB-1280 全自动生化仪测定分析，测定总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、尿素氮（UN）、葡萄糖（GLU）、白球比（A/G）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、甘油三酯（TG）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、肌酐和碱性磷酸酶（ALP）。

1.3.6 氨态氮的测定 参考冯宗慈等[12]的比色法测定瘤胃液的NH3-N。

1.3.7 VFA 的测定 参考曹庆云等[13]的气相色谱仪测定，并作相应的改进。使用气相色谱（岛津GC-2014C）对瘤胃液中乙酸、丙酸和丁酸进行测定。色谱条件如下：色谱柱：WondaCAP WAX；气化室温度：200℃；检测器温度：220℃；程序升温：初始温度110℃保持0 min，以10℃/min 升温至180℃保持2 min；载气及流速：高纯氮气为160 kPa，总流量为104 mL/min，柱流量为1.98 mL/min，吹扫流量为3 mL/min，氢气为40 mL/min，空气为400 mL/min；分流比为50:1。

1. 4 统计分析 试验数据先经Excel 2010 初步处理，再用SPSS 19.0 软件中的单因素方差分析，采用Duncan´s法进行多重比较检验，P＜0.05 表示差异显著。结果用平均值表示，各处理变异程度用标准误表示（SEM）。

表1 饲料粗饲料营养成分（干物质基础）

表2 饲粮组成及其营养成分（干物质基础）

2 结果与分析

2.1 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊生长性能的影响 由表3 可知，各组间努比亚山羊的初重、末重、ADG 及ADMI 差异均不显著。T1 组的 F/G 小于 T3 组（P＜0.05），低于对照组和T2 组（P＞0.05）。

表3 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊生长性能的影响

2.2 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊养分消化率的影响 由表4 可知，与对照组相比，T1、T2、T3 组的CP 表观消化率分别提高了8.1%、4.31%、3.35%（P＜0.01）；T2 组NDF 的表观消化率提高了4.34%，T3 组的GE、有机物（OM）、NDF、ADF 的表观消化率提高了3.93%（P＜0.05）、3.18%（P＜0.05）、6.18%（P＜0.01）、5.94%（P＜0.01）。

2.3 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊血液生化指标的影响 由表5 可知，各组间TP、ALB、GLB、A/G、TC、HDL-C、LDL-C、TG、UN、AST、ALT、GLU、ALP 均差异不显著。

表4 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊养分表观消化率的影响 %

表5 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊血液生化指标的影响

2.4 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊瘤胃发酵的影响 由表6可得，各组间山羊瘤胃中乙酸、丙酸、丁酸及乙酸/丙酸没有显著变化。相比对照组，T3 组的pH 升高了0.18（P＜0.05）；T2、T3 组的 NH3-N 有所降低（P＜0.05）。T3 组的总挥发性脂肪酸（TVFA）高于其他组（P＜0.05）。

表6 不同微生物青贮甘蔗尾叶对努比亚山羊瘤胃发酵的影响

3 讨 论

3.1 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊生长性能的影响 青贮饲料添加剂不仅可以提高青贮饲料的保存效率，还可以提高反刍动物的生产性能。目前商业上大多使用同型发酵乳酸菌，因为它们可以快速产生大量的乳酸，迅速降低pH。青贮饲料的乳酸菌还可通过抑制青贮饲料和瘤胃中的有害微生物，或产生可增强瘤胃中特定微生物种群功能的有益物质来提供益生菌效应，从而提高动物的生产性能[14]。T1 组的菌种都属于乳杆菌属，包括同型发酵乳酸菌和兼性异型发酵乳酸菌；T2 组包括2 种真菌以及枯草芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌是动物饲料中常添加的益生菌种，具有显著的益生作用[15]；T3 组包括枯草芽孢杆菌以及一种同型乳酸发酵乳酸菌，乳酸片球菌有一定的抑菌效果。

Rabelo 等[16-17]研究表明，添加植物乳杆菌和布氏乳杆菌或枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的玉米青贮饲料不会改善育肥肉牛的生长性能；饲喂添加微生物处理的玉米青贮饲料对绵羊ADMI 的增加不显著。本试验饲喂不同微生物处理的青贮甘蔗尾叶对努比亚山羊末重、ADG 和ADMI 与自然青贮组差异也不显著，但T1 组的混合青贮相比其他3 组有更好的饲料效率，原因可能是T1 组的微生物组合是实验室从甘蔗尾叶本身的微生物筛选所得，相比2 组商业其更适合甘蔗尾叶，可能产生了增强瘤胃中特定微生物种群功能的有益物质。本试验结果显示，T1 组的努比亚山羊试验期间每增重1 kg，比其他组平均节省1.12 kg 饲料，且T1 组菌液的制作成本不高，在商业化后可能得到更大的经济效益，从生长性能及经济效益上说，T1 组的微生物组合更适合用于甘蔗尾叶青贮。

3.2 甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊养分表观消化率的影响 消化率是反映动物对养分摄取的多少，同时也是反映动物生长性能的重要指标。程连平等[18]研究表明，相比对照组，湖羊饲喂添加枯草芽孢杆菌的发酵饲粮后羔羊的CP、ADF 和NDF 表观消化率显著提高。本试验添加枯草芽孢杆菌和乳酸片球菌的商业菌种组CP、NDF 和ADF 的表观消化率相比对照组也显著提高，可能是由于枯草芽孢杆菌与乳酸片球菌的混合加快了酶的反应，改变了甘蔗尾叶的纤维素结构，从而提高了饲粮中NDF 和ADF 的利用率。虽然T3 组的GE、OM、NDF、ADF 的表观消化率都显著高于其他组，但并未在生长性能上有所体现，可能是因为羔羊的消化主要依靠瘤胃微生物，但消化的产物不能很好地被羔羊吸收利用而造成了营养流失。本试验中添加植物乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌组成的T1 组显著提高CP 的表观消化率与Rabelo 等[16]研究结果不一致，可能是青贮原料不同所造成的青贮效果不同所致，CP消化率显著提高使T1 组的羔羊获得了更高的饲料效率。

3.3 不同微生物处理甘蔗尾叶青贮对努比亚山羊瘤胃发酵指标的影响 一般情况下瘤胃pH 变化范围在5.00～7.50[19]。本试验中各组瘤胃pH 均在正常范围。瘤胃液NH3-N 最佳水平一般在5.0～30.0 mg/dL[20]。本试验中NH3-N 的浓度在 13.24～18.67 mg /dL，且与 Gandra 等[21]研究甘蔗青贮瘤胃液NH3-N 的结果类似。在奶牛日粮中添加枯草芽孢杆菌会提高乙酸、丙酸和TVFA 浓度[22]；程连平等[18]研究发现，在羔羊饲粮添加富硒酵母或枯草芽孢杆菌都能够显著提高瘤胃液NH3-N、乙酸、丙酸的含量。本试验添加微生物青贮对乙酸、丙酸、丁酸没有影响，与上述结果不一致，可能是发酵方法不同所导致，日粮中添加菌种发酵与青贮过程中的发酵效果不同，青贮发酵受乳酸菌的影响较大。T3 组的TVFA 显著高于其他组，可能与其平均干物质采食量高于其他组有关。

4 结 论

本试验结果表明，饲喂努比亚山羊的甘蔗尾叶青贮饲料中，添加植物乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌和鼠李糖乳杆菌混合青贮能提高饲料效率；4 种处理组对血液生化指标无显著影响；添加枯草芽孢杆菌和乳酸片球菌的混合青贮各养分的表观消化率更高，并且增加瘤胃内TVFA 含量。