淮海地区不同年龄人群糖化血清白蛋白参考区间的建立

崔 灿， 陈艳红， 张 蕊， 牛国平

（徐州市中心医院检验科，江苏 徐州 221000）

糖化血清白蛋白（glycated albumin，GA）可反映血糖在2～3周内的改变，是监测血糖良好的中期指标[1]。徐州市中心医院生化实验室在实际工作中发现，当常规体检及各项生化指标均正常时，GA的检测结果常超出试剂说明书提供的建议参考区间，且各年龄段人群检测结果也存在差异。本研究旨在建立淮海地区不同年龄人群GA的参考区间，同时探讨GA对糖尿病的临床诊断价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象

1.1.1 研究对象1 选取2017年1月—2018年1月徐州市中心医院常规体检（身高、体质量、血压、全身脏器彩超、胸透、血常规、尿常规、大便常规、生化全项、体格检查等）结果均正常，且无合并感染或应激状态疾病、糖尿病、心血管疾病、冠心病、呼吸系统疾病、急性上呼吸道感染、肾脏疾病、消化系统疾病、风湿性疾病、血液系统疾病、过敏性疾病、肿瘤等，排除月经期女性、孕妇、哺乳期女性及2周内服用药物、6个月内曾接受手术、4个月内曾输血或献血者。检测其GA水平，剔除离群值后，纳入合格的血液标本1 784例。研究对象年龄为0～106岁，根据我国年龄分段标准将其分为：儿童组（0～6岁）429名、少年组（7～17岁）199名、青年组（18～40岁）203名、中年组（41～65岁）618名、老年组（≥66岁）335名。

1.1.2 研究对象2 选取2018年5—6月于徐州市中心医院体检并与研究对象1排除标准相同者221名，检测GA水平，并剔除离群值。

1.1.3 研究对象3 选取2018年6月1—5日于徐州市中心医院行GA检测者1 367例，包括糖尿病患者149例，非糖尿病患者1 218例。本研究经医院伦理委员会审核通过，所有患者均知情同意。

1.2 标本采集及处理

采集所有研究对象空腹8 h外周静脉血2 mL于无抗凝剂的真空采血管中，记录受检者的基本信息。所有标本水浴30 min后，1006.2×g离心5 min，析出血清，待测。

1.3 仪器与试剂

日本日立公司7600-020全自动生化分析仪，上海复星长征试剂公司GA测定试剂（批号：D18090831）。

1.4 检测方法

采用酶法测定GA和白蛋白浓度，严格按照试剂盒要求进行操作。采用配套的定标品及质控品对结果进行质控。

1.5 研究对象离群值的剔除

采用SPSS 16.0软件判断离群值，以疑似离群点和其相邻点的差值（D）与数据全距（R）的比值＞1/3为离群值。若有离群值被剔除，应及时补上其他数据[2]。

1.6 参考区间的建立及验证

检测研究对象1的GA水平，进行正态性检验并计算95%可信区间；检测研究对象2的GA水平，计算R值（参考区间内的标本数/总标本数），要求R＞0.95。检测前和检测时均用正常和异常质控进行监控，所有标本须在采集后2 h内完成检测。

1.7 临床诊断评价

检测研究对象3的GA水平，以GA＞15.37%的糖尿病患者血清为真阳性标本，以GA＞7.61%且GA＜15.37%的非糖尿病患者血清为真阴性标本，计算敏感性、特异性、误诊率、漏诊率，并绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线。

1.8 统计学方法

采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。正态性检验采用K-S检验；参考区间估计双侧95%正常值范围，正态分布数据以96s表示，非正态分布数据以百分位数法（P2.5～P97.5）表示。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄组GA水平的正态性检验

K-S正态性检验结果显示，儿童组、少年组、青年组、中年组以及老年组均服从正态分布，但合计不符合正态分布，见表1。

表1 不同年龄组GA水平正态性检验

2.2 不同年龄组GA水平参考区间的建立

各年龄组GA水平均为正态分布，采用正态分布法的双侧95%可信区间确定医学参考区间，计算得出GA水平的参考区间为：儿童组6.28%～13.54%，少年组7.25%～14.93%，青年组8.32%～14.66%，中年组9.52%～15.64%，老年组10.09%～16.29%。合计GA水平不符合正态分布，采用百分位数法（P2.5～P97.5）计算，参考区间为7.61%～15.37%。

2.3 不同年龄组GA水平的比较

各年龄组GA水平两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。GA%水平随着年龄的增加有升高趋势。见表2。

表2 不同年龄组GA水平比较

2.4 GA参考区间的验证

在2018年5—6月于徐州市中心医院体检的221名符合标准的表面健康者血清中，有216名GA的检测值在新建立的参考区间内，有5例超出了参考区间，计算得出R值为0.98。

2.5 GA参考区间的诊断效能

以GA＞15.37%的糖尿病患者的血清为真阳性标本，以GA＞7.61%且GA＜15.37%的非糖尿病患者的血清为真阴性标本，计算得出GA诊断糖尿病的特异性为95.00%，敏感性为98.65%，误诊率为6.89%，漏诊率为1.34%。ROC曲线下面积为0.99，见图1。

图1 GA对诊断糖尿病的ROC曲线

3 讨论

GA是血清白蛋白和葡萄糖结合的产物，代表体内白蛋白的糖化水平。由于蛋白质的半衰期是17～19 d，因此GA反映的是人近2～3周的平均血糖水平[3-4]。GA水平不受随机血糖水平波动的影响，而且比糖化血红蛋白半衰期短，是良好的血糖监测的中期指标，可以更灵敏、更准确地反映较短期内血糖的水平。有研究结果表明，GA能反映糖尿病患者视网膜病变的严重程度，且诊断效能优于糖化血红蛋白[5]。GA作为一项监测血糖控制情况的指标，已经被广泛应用于临床化学实验室。2014年，徐州市中心医院引进了GA项目的检测，但未建立本实验室的参考区间。

医学参考区间是指包括绝大多数正常人的人体形态、功能和代谢产物等各种生理及生化指标常数存在的范围，可作为判断指标正常和异常的标准。本研究初步建立了适合淮海地区人群的GA参考区间，人群界定、研究个体数量、统计方法与检测结果的可溯源性均符合美国临床实验室标准化协会提出的关于建立通用参考区间的要求[6]。本研究收集的用于确定参考区间的标本数量共1 784例，符合且超过了制定医学参考值范围样本量应足够大（≥100例）的标准[7]，可保证所建立的参考区间的准确性，且有较窄的可信区间[8]，同时采用了相对严格的排除原则，不仅排除了血糖相关性疾病，而且排除了体检不合格人群，选择更合适的参考个体，制定更准确的参考区间。本研究对于服从正态分布的数据采用正态分布法来统计其双侧95%可信区间，对于非正态分布的总体数值先采用SPSS 19.0软件对数值进行排序，取2.5%位置数值参考值为下限，取97.5%数值为参考值上限，来计算95%可信区间。本研究发现，GA水平随着年龄的增长而增加（P＜0.05）。分析原因如下：GA反映的是GA与血清总白蛋白的比例，所以GA%的值不仅受血糖水平的影响，也受一些白蛋白代谢水平的影响，如肝硬化、甲状腺功能减退等[9-12]，可造成白蛋白半衰期延长，从而使GA水平升高。随着个体年龄的增长，即使未患以上疾病，代谢速度也会逐渐下降[13-15]，影响白蛋白和血糖的代谢速率。但具体机制有待于进一步研究。

本研究对建立的参考区间进行验证，方法参照美国临床实验室标准化协会和国际临床化学联合会共同修订的指南《临床实验室如何确定和建立生物参考区间》[7]，计算出落在参考范围内的标本数/总的实验标本数（R值）为0.98，即样本通过率为98%，证明本实验统计的参考区间具有可靠性。本研究ROC曲线分析结果显示，GA诊断糖尿病的敏感性为98.65%，特异性为95.00%，表明该检验项目可以有效防止糖尿病的漏诊。同时，本研究ROC曲线下面积为0.99，提示GA对糖尿病诊断具有非常显著的临床意义。

本研究只进行了GA诊断糖尿病的临床验证，为更好服务于临床，还需进行GA对诊断低血糖疾病的价值，以完善实验室质量评价，提高医院检验质量与服务临床和患者的能力，为疾病诊疗提供客观、准确的检验数据。