血浆脂蛋白相关磷脂酶A2浓度与不同类型冠心病相关性研究

张爱爱 韩 伟 宋建英 李飞星 王晓元 李方江

心血管疾病(cardiovascular disease, CVD)是目前全球死亡的主要原因[1-2]。冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease，CHD)，作为心血管疾病中常见的一大类疾病[3]，其发病机制涉及多种因素，其中重要的病理因素之一是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)，而炎症反应在动脉粥样斑块的发生和发展中起着重要作用，其参与动脉粥样斑块的形成、发展甚至最终破裂[4-5]。研究发现，脂蛋白相关的(Lp-PLA2)是一种新的炎症标志物与冠心病相关，它可诱导细胞聚集和血管收缩，刺激急性炎症反应，可直接参与AS发生，能够预测冠状动脉事件[6-7]。在未来，这种酶活性的抑制剂有望成为动脉粥样硬化的一种新疗法[8-9]。我们的目的是通过比较冠心病患者和健康对照组Lp-PLA2的水平，讨论Lp-PLA2与冠心病及其与血脂和hs-CRP的表达水平的关系。

表1 各组临床资料比较

资料与方法

1.研究对象 选择2016年2月至2019年1月，河北北方学院附属第一医院收治360例患者接受冠状动脉造影(CAG)，并采集患者血液。其中包括男性179例(49.7%)，女性181例(50.3%)，年龄40～85岁，平均年龄(62.82±12.44)岁，根据冠心病诊断与治疗指南将患者分组：包括稳定型的心绞痛(SAP) 129例，不稳定型心绞痛(UAP) 111例与AMI 120例，对照组由门诊149例健康个体组成，年龄42～85岁，平均年龄为(62.87±12.39)岁，排除了以下条件：心肌病、瓣膜性心脏病、严重肝肾功能不全、恶性肿瘤、急性感染、长期服用降脂药物、抽血前服用阿司匹林或他汀类药物。参与者已经签署了参与研究的同意书。

2.方法 (1)样本采集：所有受试者均于住院后禁食一晚，第二日凌晨从肘部采集静脉血样本，立即送检分析。生化试验用血注分离凝胶管，脂质LP-PLA2用血抽吸EDTA-Na2抗凝管。记录一般临床资料，如性别、年龄等。(2)检测方法：采用酶联免疫吸附法测定(ELISA)测定脂质LP-PLA2的含量，采用全自动生化分析仪测定血脂等相关指标，免疫浊度法测定hs-CRP的含量。

3.统计学处理 应用SPSS19.0统计软件。计量资料以均数±标准差表示，两组间的比较采用t检验，三组以上比较采用方差分析，两两比较采用SNK法。计数资料比较采用卡方检验；相关分析采用Pearson线性相关；采用ROC曲线进行特异性及敏感性的分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1. 临床资料比较 比较冠心病各亚组在年龄、性别、糖尿病、高血压、吸烟等方面，差异无统计学意义(P>0.05，表1)。

2. CHD各亚组中血浆Lp-PLA2水平和其他实验室指标的比较 CHD各亚组血浆Lp-PLA2浓度显著高于对照组(P<0.05)。AMI组和UAP组Lp-PLA2浓度均高于SAP组(P<0.05); 且AMI组与UAP组间差异有统计学意义(P<0.05)。AMI组hs-CRP水平明显高于对照组、SAP组和USP组(P<0.05)。CHD各亚组Lp(a)水平均高于对照组，其中AMI组与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，SAP及UAP组与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。CHD各亚组与对照组血清Tch，TG，Apo-A1，Apo-B，HDL-C，LDL-C水平比较，差异无统计学意义(P> 0.05，表2)。

表2 各组生化指标比较

3. CHD各组间血浆Lp-PLA2浓度与其他实验室指标的比较 通过双变量线性分析，可以发现，全部参与者血浆Lp-PLA2浓度与hs-CRP水平呈正相关(r=0.624，P<0.05)，而与Tch，TG，Apo-A1，Apo-B，HDL-C，LDL-C，LP(a)的水平无相关性。CHD组血浆Lp-PLA2浓度仅与hs-CRP呈正相关(r=0.433，P<0.05)，与Tch，TG，Apo-A1，Apo-B等其他指标无相关性。对照组血浆Lp-PLA2浓度与TG正相关(r=0.438，P<0.05，表3)。

表3 各组间Lp-PLA2和其他指标相关性分析

4. ACS中Lp-PLA2 and hs-CRP的敏感性及特异性的比较 Lp-PLA2、hs-CRP在ACS中ROC曲线图，Lp-PLA2在ACS中的特异性高于hs-CRP，而hs-CRP 的敏感性高于Lp-PLA2(图1)。

图1 ACS中Lp-PLA2及hs-CRP的ROC曲线

讨 论

在本实验中，研究了一种与动脉粥样硬化相关的新型炎症生物标志物Lp-PLA2和冠心病之间的关系，研究表明与对照相比，Lp-PLA2浓度在冠心病组中较高。目前大量实验研究表明，在目前接受冠状动脉造影的中国患者人群中，Lp-PLA2浓度与冠心病独立相关，Lp-PLA2浓度与ACS的关系独立于其他已知的预测因子和ACS的其他疾病[10-11]。

Lp-PLA2磷脂酶是炎症相关的标志物，与动脉粥样硬化密切相关，主要由炎症细胞产生，PLA2是磷脂酶A2族的一员，被广泛研究，它广泛表达于肝细胞、巨噬细胞、血小板和血管平滑肌细胞。Lp-PLA2又称血小板活化因子乙酰水解酶(platelet-active factor acetylhydrolase, PAF-AH)，是一种能够催化细胞膜中脂蛋白和甘油磷脂第二酰基酯键水解，产生赖氨酸磷脂酶和非酯化脂肪酸的酶。在血液循环中，Lp-PLA2主要由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞产生和分泌，其中血小板活化因子能促进其分泌，在血液循环中，Lp-PLA2与脂蛋白颗粒结合，其中80%与LDL-C结合，15%～20%与HDL结合，其余与极低密度脂蛋白(VLDL-C)结合[12]。PAF可促进血小板聚集、中性粒细胞和单核细胞趋化、白三烯等炎症介质释放、血栓形成和炎症反应。另一方面，Lp-PLA2也能水解血管内膜的氧化卵磷脂，产生溶血磷脂酰胆碱(lyso-PC)和氧化游离脂肪酸(ox-FFA)，这两种产物是促炎介质，可刺激和产生粘附分子和细胞因子，进一步促进单核细胞从管腔向内膜的聚集运动，巨噬细胞来源于内膜内单核细胞的聚集，通过吞噬氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)转化为泡沫细胞，最终聚集形成斑块，释放细胞因子和蛋白酶，降解平滑肌细胞和纤维帽的胶原基质，导致斑块的脆性和破裂，进一步导致血栓的形成和心血管事件的发生，LP-PLA2在AS过程中的作用还存在争议，但越来越多的证据表明，LP-PLA2可以促进AS的发生[13-15]。

本研究发现，经年龄、性别调整后，CHD各亚组血浆Lp-PLA2浓度显著高于对照组(P<0.05)；AMI组和UAP组Lp-PLA2浓度均高于SAP组(P<0.05); 且AMI组与UAP组间存在差异(P<0.05)；这与目前大量研究结果相一致[12-13]。通过上述比较，可以发现，Lp-PLA2可能在AS中发挥促进作用，与冠心病及其临床类型的发生发展密切相关，对判断冠心病的发生发展具有重要价值，AMI组血浆Lp-PLA2浓度高于UAP组，可能与AMI患者血浆Lp-PLA2浓度升高有关，由于斑块和血栓形成导致血管阻塞,由炎症反应引起的粥样斑块形成AMI组强于UAP组。研究显示hs-CRP的升高与动脉粥样硬化斑块的不稳定性(严重程度)有关，但无统计学意义；而Lp-PLA2浓度随着动脉粥样硬化斑块不稳定性(严重程度)的增加而升高，且差异有统计学意义。本研究显示通过双变量线性分析，可以发现，血浆Lp-PLA2浓度与hs-CRP水平呈正相关(r=0.624，P<0.05)，而与Tch，TG，Apo-A1，Apo-B，HDL-C，LDL-C，LP(a)的水平无相关性；CHD组血浆Lp-PLA2浓度仅与hs-CRP呈正相关(r=0.433，P<0.05)，与Tch，TG，Apo-A1，Apo-B等其他指标无相关性；对照组血浆Lp-PLA2浓度与TG正相关(r=0.438，P<0.05)，在分析Lp-PLA2间的相关性时，其浓度与hs-CRP的水平有一定的相关性，这意味着Lp-PLA2可能与hs-CRP炎症因子相关，协同参与AS的炎症反应，原因可能是Lp-PLA2在AS过程中与hs-CRP共享不同的生理病理逻辑机制；本研究发现Lp-PLA2的特异性明显高于hs-CRP，这可能是这两种标志物在AS中发挥不同作用的原因：hs-CRP可能是急性非特异性炎症反应的产物，而Lp-PLA2可能在心血管炎症中发挥更特异的作用，此结果也许与样本量少有关，还需进一步研究。

综上所述，本研究考察了冠心病患者不同组别的脂质Lp-PLA2浓度的变化及其与hs-CRP的关系，目前还没有公认的关于Lp-PLA2在AS过程中所起作用的理论，脂多糖Lp-PLA2的确切影响及作用机制有待进一步研究证实。但本研究证实了Lp-PLA2在ACS中明显增加，血浆Lp-PLA2与hs-CRP对AS发生具有协同作用，且Lp-PLA2对ACS诊断特异性高于hs-CRP，因此，Lp-PLA2可能是冠心病诊断的潜在靶点，这对预防和治疗AS事件具有重要的临床意义。