HPLC法测定土茯苓中落新妇苷的含量

秦菁莉 何书平

【摘 要】  目的： 饮片厂采购土茯苓为研究对象，测定落新妇苷含量。用高效液相色谱法测定土茯苓中落新妇苷含量。 方法： 色谱柱为C18 （250 mm×4.6 mm，5μm），流动相为甲醇-0.1%冰醋酸溶液（39∶61），流速为1.0 mL/min，检测波长为291nm。 结果： 结果表明，土茯苓中落新妇苷的含量符合2015年版《中国药典》标准。

【关键词】  土茯苓;落新妇苷;水分测定;含量测定;高效液相色谱法

【中图分类号】  R453      【文献标志码】B   【文章编号】1005-0019（2020）05-082-01

土茯苓为百合科植物光叶菝葜Smilax glabra Roxb.的干燥根茎。性淡平味甘，归肝、胃经。解毒，除湿，通利关节 [1] 。其主要分布在陕西、甘肃、安徽、浙江、江西、四川和云南等地 [2] 。始载于《名医别录》，名禹余粮，《本草纲目》始称土茯苓， 有赤、白两种， 《本草纲目》载此药能“ 健脾胃、强筋骨、祛风湿、利关节、治拘挛骨痛、恶疮痈肿， 解汞粉、银朱毒”。土茯苓化学成分多， 有糖类包括己糖和淀粉、有机酸类机酸类主要有琥珀酸 、棕榈酸、阿魏酸、莽草酸、油酸、亚油酸等、苯丙素类、黄酮和黄酮苷类、甾醇类、皂苷类有赤土茯苓苷、异黄杞苷、落新妇苷、新落新妇苷、异落新妇苷、新异落新妇苷、土茯苓苷、槲皮素、（-）表儿茶精;及挥发油等 [3-5] 。其药理作用广泛，主要有痛风性关节炎 [6、7] 、抗心肌缺血和对心脏缺血-再灌注损伤的保护作用 [8] 、抗动脉粥样硬化和抗血栓作用 [9] 等。

1 实验材料

土茯苓粉末（过二号筛）。

1.1 实验仪器 Aglient高效液相色谱仪、101-1-S-Ⅱ型电热恒温鼓风干燥箱、称量瓶、BS/BT系列电子天平

1.2 试剂 落新妇苷、甲醇（色普纯）、醋酸（分析纯）

2 实验方法

2.1 水分测定

土茯苓水分测定用2015年版《中国药典》0832水分测定法第二法（烘干法） [10] ，取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，开启瓶盖在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）。

2.2 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为C18 （250 mm×4.6 mm，5μm），甲醇-0.1%冰醋酸溶液（39∶61），流速为1.0 mL/min，检测波长为291nm。

对照品溶液的制备：取落新妇苷对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取2份土茯苓粉末（过二号筛）约0.8g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入60%甲醇100ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定。

3 实验结果

3.1 水分测定结果

3.2 落新妇苷对照品色谱图、土茯苓样品色谱图（图1、2）

3.3 含量结果 测量对照品溶液和供试品溶液中待测物质的峰面积，按下式计算含量：（CX）=CR× AX AR ，见表1、表2。

4 结论

本次实验对中药饮片厂采购土茯苓对照2015年版《中国药典》，用HPLC法對其进行含量测定，按干燥品计算，含落新妇苷（C21 H22 O11 ）不得少于0.45%。收购土茯苓符合药典规定含量，控制该药材的含量，保证饮片的质量。

参考文献

[1]  国家药典委员会.中国药典，一部[M].北京：化学工业出版社，2015.

[2] 王建平，张海燕，傅旭春.土茯苓的化学成分和药理作用研究进展[J].海峡药学，2013，25（1）：42-44.

[3] 霍昕，高玉琼，刘建华，等.土茯苓挥发性成分的研究[J].生物技术，2006 ，16（3）：60-62.

[4] 张颖，张立木，齐永秀，等.土茯苓中部分无机元素含量的测定[J].泰山医学院学报，2003，24（4）：376-377.

[5] Ng TB，Yi YI.Isolation of a novel heteodimeric agglutinin from rhi-zomes of Smilax glabra， the Chinese medicinal tufuling[J].The Inter-national Journal of Biochemistry & Cell Biology，2001，33：269-277.

[6] 陈红明.通痹土茯苓汤治疗急性痛风性关节炎 80 例观察[J].实用医药杂志，2010，26（8）：528-829.

[7] 张白嘉，刘亚欧，刘榴，等.土茯苓及落新妇苷抗炎、镇痛、利尿作用研究[J].中药药理与临床杂志， 2004，20（1）：11-12.

[8] 艾尼瓦尔·那比，周承明，等.赤土茯苓苷对血小板聚集及实验性血栓形成的影响[J].中草药，1997， 28（supp1）：97-98.

[9] 孙晓龙，王宽字，张丹琦.土茯苓注射液对大鼠血栓形成影响的实验研究[J].中国中医药科技，1994， 11（4）：2290-231.

[10]  国家药典委员会.中国药典，四部[M].北京：化学工业出版社，2015.