γ-干扰素释放试验在结核病诊断中的临床应用研究

王微微

【摘 要】  目的： 本研究旨在評估γ-干扰素释放试验（IGRA）在临床随机样本中诊断结核病的效果。 方法： 2019年2月至2019年6月期间住我市胸科医院的1080例结核病疑似病例均接受外周血结核分歧杆菌特异性抗原刺激，测定相对γ-干扰素释放水平，诊断结果与细菌学和临床诊断结果作比较。 结果： 1080例结核病疑似病例中，848例经临床确诊为结核病。在确诊结核病例中，细菌学检查敏感性为32.68%，A.TB检测敏感性为92.04%，差异有统计学意义（p<0.001）。在菌阳和菌阴结核病例中，A.TB检测阳性率为92.06%和90.04%，差异没有统计学意义（p=0.079）。 结论： γ-干扰素释放试验对于菌阴结核病的诊断有帮助，可以用于临床结核病辅助诊断。

【关键词】  结核;γ-干扰素释放试验;结核病诊断;菌阴结核病

【中图分类号】R969.4      【文献标志码】B   【文章编号】1005-0019（2020）05-077-01

结核病是困扰人类几千年的恶性传染病。TB由结核分支杆菌引起，通常由空气传播，肺结核患者是主要的传染源。WHO报导，每年有约9百万新发的结核病例，有约两百万与结核病有关的死亡。2017年全球估计有1000万人感染结核病，其中有160万人死于结核病 [1] 。中国估计有88.9万人新感染结核 [1] 。控制结核病的流行需要有效的疫苗，新的更有效的治疗方法和更好的诊断方法 [2] 。

中国是结核病的高发国家之一。近年来，随着耐药性结核病、艾滋病和结核双重感染的病例增多，结核病再次成为严重威胁人类的公共健康问题。结核是HIV阳性人群中最常见的疾病，在全球范围内的联合感染者达到一千三百万。

近年来日趋成熟的干扰素释放分析技术（IGRA），是一种新的用于结核杆菌感染的体外免疫诊断方法，具有良好的敏感度和特异性。大量实验数据都显示，IGRA在潜伏性结核感染的诊断上显示出高于结核菌素皮肤试验（TST），但是，IGRA在结核病诊断方面的准确性仍需要更多的评估 [3] 。

1 对象与方法

1.1 对象 2019年2月1日至2019年6月31日，到哈哈尔滨市胸科医院就诊住院的结核病疑似病例，纳入标准为有疑似结核病患者症状、体征或影像学依据的初诊患者共计1080例。其中男性625例，女性455例，平均年龄（55±19）岁。所有病例在接受A.TB检测时，接受结核病药物治疗不超过20天。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 每例患者均使用肝素钠抗凝采血管采集外周血5ml，如患者需进行TST，应在采血后再注射。采集的外周血应在16h内进行抗原刺激。

1.2.2 γ-干扰素释放试验检测 采样结核分支杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂盒（商品名：A.TB试剂盒，生产商：海口维瑅瑷生物研究院）具体步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.2.3 结果判断 当 N<0.5时，若T-N/P-N ≥0.16为阳性，否则为阴性;当0.5≦N <2.5时，若T-N≥1.5为阳性，否则为阴性;当N≧2.5时，判为无法确定。

1.2.4 统计学分析 应用SPSS19.0 对数据进行分析。使用χ 2检验或者Fisher精确检验（n<5时适用）比较各组样本率。使用McNemar检验比较不同检验方法的诊断效果。当p<0.05时认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 所有病例的临床诊断结果 1080例结核病疑似病例中，根据结核病诊断标准临床医生诊断为结核病678例。其中，细菌学检查阳性353例，影像学及分子生物等手段确诊结核病482例。

2.2 A.TB试剂盒检测结果 1080例结核病疑似病例都接受了A.TB试剂盒检测，其中，A.TB检测阳性994例（92.04%），检测阴性86例（7.96%）。在经临床医生确诊的835例结核病患者中，A.TB检测阳性753例（90.18%），检测阴性82例（9.52%）。

2.3  A.TB试剂盒与细菌学检查的诊断效率比较 在1080例结核病患者中，细菌学检查的阳性率为32.68%（353/1080），与A.TB检测阳性率92.04%比较，p<0.001，A.TB试剂盒与细菌性检查存在显著性差异。在菌阳和菌阴结核病例中，A.TB检测阳性率为92.06%（325/353）和90.04%（434/482），p=0.079，无显著性差异。

3 讨论

快速诊断和治疗对结核病患者是非常重要的预后因素。在本研究中，A.TB试剂盒在临床随机病例样本诊断的阳性率为92.04%，明显高于细菌学检查的阳性率32.68%。另外，A.TB试剂盒在菌阳和菌阴结核病例诊断中，显示出相似的阳性率。这两个结果都说明A.TB试剂盒在结核病临床辅助诊断的效果较好。

本研究中，A.TB试剂盒诊断结核病的敏感性92.04%，QuantiFERON-TB Gold In-Tube（QFT-GIT）诊断结核病的敏感性为80% 及T-SPOT.TB诊断结核病的敏感性为81%  [5] 基本一致。这种现象可能是由于实验对象的选择范围不同，大多数研究选择的结核病例和健康参比都与临床实践中遇到的不同，这是影响准确性评估的因素 [6] 。

菌阴结核病的诊断一直是结核病诊断上的难题。已经有研究评估了IGRA在菌阴结核病诊断上的使用效果，但是结论并不一致 [6，] 。本研究中，A.TB试剂盒在菌阳和菌阴结核病诊断中显示了相似的敏感性。这一结果值得在未来研究中进一步验证。

参考文献

[1]  WHO. Global tuberculosis control. World health organization report 2018.

[2] Abu-Raddad LJ， Sabatelli L， Achterberg JT， et al. Epidemiological benefits of more-effective tuberculosis vaccines， drugs， and diagnostics. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009; 106： 13980-13985.

[3] Lalvani A， Pareek M. Interferon gamma release assays： Principles and practice. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2010; 28： 245-252.

[4] Lijmer JG， Mol BW， Heisterkamp S， et al. Empirical evidence of design-related bias in studies of diagnostic tests. JAMA. 1999; 282： 1061-1066.