哮喘及COPD患者血清触珠蛋白、血红素结合蛋白的表达及相关性

杨旭 宋磊 张海燕 李丹

(吉林大学白求恩第一医院呼吸内科，吉林 长春 130021)

支气管哮喘(哮喘)和慢性阻塞性肺疾病(COPD)均为常见的呼吸系统疾病，临床表现以喘息、咳嗽、呼吸困难为主。哮喘是多种细胞及细胞组分参与的气道慢性炎症，常伴有气道高反应性，且气流受限多为可逆性。CODP与吸入有害气体及有害颗粒的异常炎症反应有关，其特征是持续性、进行性发展的气流受限。复杂的发病机制及相似的临床表现导致二者的鉴别十分困难。作为急性期反应蛋白血清触珠蛋白(Hp)、血红素结合蛋白(Hpx)含量在感染应激时显著升高〔1〕，研究表明Hp、Hpx可能参与机体的炎症反应，其血清含量在哮喘及COPD患者中均有不同程度的改变〔2〕。本研究通过检测血清Hp、Hpx浓度，探索其对哮喘和COPD的诊断价值及与临床指标的相关性。

1 对象与方法

1.1研究对象 选取吉林大学白求恩第一医院呼吸内科住院哮喘患者47例(哮喘组)及COPD患者52例(COPD组)。哮喘组及COPD组均符合中华医学会制定的哮喘及COPD诊断标准〔3，4〕。健康对照组选取门诊体检健康志愿者45例；受试者均排除严重心、肝、肾疾病，自身免疫性疾病，精神疾病等引起气流受限的疾病。3组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组一般资料比较

1.2Hp、Hpx测定方法 抽取所有研究对象空腹肘静脉血5 ml，室温下静置15～30 min至血液凝固，3 000 r/min离心15 min，收集上清液保存于-80℃冰箱。测定时将样品放于冰上解冻，检验步骤严格按照试剂盒说明操作。主要试剂和仪器有Hp、Hpx酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(Abcam 英国)、多功能酶标仪 SynergH1 Hybrid Reader(Bio-Tek公司美国)、BNⅡ全自动蛋白分析仪(Sismens Healthcare 德国)。

1.3统计学方法 采用SPSS21.0软件进行独立样本t检验、Logistic回归分析，根据受试者工作特征(ROC)曲线评价Hp、Hpx对哮喘及COPD的诊断意义。

2 结 果

2.1各组血清Hp、Hpx表达水平比较 血清Hp、Hpx含量哮喘组显著高于COPD组及健康对照组(P<0.001)，COPD组显著高于健康对照组(P<0.05)。见表2。

表2 3组Hp、Hpx表达水平比较

与健康对照组比较：1)P<0.05;与COPD组比较：2)P<0.05

2.2单项生物标志物检测对疾病诊断意义 血清Hp、Hpx单项及联合检测的特异性、灵敏度及ROC曲线下面积(AUC)及临界值见表3。(1)Hp：在诊断哮喘时比Hpx表现出更高的灵敏度；在诊断COPD时表现出更好的诊断价值；但在鉴别CODP与哮喘时没有表现出最佳的诊断意义、特异性和灵敏度。(2) Hpx：在诊断哮喘时比Hp更具有诊断价值及特异性；在诊断COPD时，其特异性与Hp相似；在鉴别COPD与哮喘方面，Hpx的诊断意义、特异性及灵敏度均较Hp高。

表3 各组间单项及组合标志物诊断价值

2.3多项生物标志物检测对疾病诊断意义 血清Hp、Hpx联合检测的特异性、灵敏度及AUC见表3，表中两种标志物联合检测其诊断意义均优于单项标志物。(1)哮喘组与健康对照组：Hp、Hpx联合检测在哮喘与健康对照组鉴别时较单项标志物具有最大的AUC、更高的灵敏度及特异性。(2) COPD组与健康对照组：Hp、Hpx联合检测在COPD与健康对照组鉴别时更具诊断意义及灵敏度，但没有表现出突出的特异性。(3) 哮喘组与COPD组：Hp、Hpx联合检测在哮喘组与COPD组表现出最佳的诊断价值及更高的特异性。

3 讨 论

生物标志物被定义为细胞内的生物化学组分、结构或功能，能够客观测量和评估的指标。因其具有较高的敏感性、较强的特异性和较好的稳定性被广泛研究。通过对生物标志物的检测，能够判断疾病的病理生理过程、发生发展、治疗及预后等〔5〕。本研究通过检测血清Hp和Hpx在各研究组中的浓度含量不同，探讨其对哮喘及COPD的诊断价值。

Hp又称结合珠蛋白，其主要作用是与游离血红蛋白(Hb)结合形成 Hp-Hb复合物，Hb通过释放游离铁和亚铁血红素参与氧化反应导致机体损伤。研究表明在肺损伤中几乎都存在红细胞外渗到肺组织引起氧化损伤，Hp与Hb结合能够减少这一损伤〔6，7〕。Hp作为一种急性期蛋白，在感染、炎症、应激时，血清浓度及合成水平明显升高，表明其具有重要的生理作用〔8〕。叶青等〔9〕研究发现COPD患者合并肺部感染时Hp含量较正常个体升高，差异具有统计学意义，说明其作为生物标志物对疾病的诊断有着良好的检测意义。本研究结果说明Hp在哮喘及COPD尤其是COPD诊断时具有可参考的诊断价值。

Hpx是由肝脏合成的急性期反应蛋白，其主要生理功能是清除有害的游离血红素，证据表明游离血红素与溶血性疾病、败血症、肺部炎症等疾病有关，Hpx与其结合后能够减少游离血红素对机体造成的氧化损伤〔10〕。Verrills等〔11〕研究发现慢性铍尘病导致的肺部炎症患者肺泡灌洗液中Hpx水平升高。本研究结果提示Hpx是本研究标志物中诊断价值最高的。

研究表明多种生物标志物的联合检验比单一标志物具有更好的临床价值〔11〕。对Hp及Hpx联合检测诊断哮喘及COPD的价值进行研究发现，两种联合检验比单项标志物的特异性和灵敏度更高，且其AUC也是最大，这说明两种标志物联合检测最具有诊断价值。

本研究从生物标志物检测及联合检测的角度，对哮喘和COPD的诊断及两者的鉴别进行了有益的探讨，由于收集的样本量较少，所获得的结果有一定局限性，有待于进一步实验证实；Hp、Hpx为何在哮喘及COPD表达不同、稳定期表达水平是否与急性期一致均有待于深入的研究探讨，得到的结果有望应用于哮喘或COPD的治疗的帮助。