银耳多糖提取纯化技术及功能性质探究
2020-04-07薛蔚
薛蔚
摘 要 银耳是我国传统真菌食药,营养价值高。银耳多糖为银耳主要营养成分,生理活性高,有清除自由基,抗肿瘤、提高机体免疫力、降血脂、降血糖等多重作用,在医药保健领域应用广泛。但银耳多糖存在于细胞基质中,性质是溶于水,但在高浓度有机溶剂内难溶,为获得较高多糖需进行提取纯化处理。本文主要结合银耳多糖功能性质对银耳多糖提取纯化技术进行了阐述,并对银耳多糖在医药保健领域的具体应用进行了分析。
关键词 银耳;多糖提取纯化;功能性质
中图分类号:TQ461 文献标志码:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.21.069
银耳又名白木耳,是我国传统真菌食药,有“菌中之冠”的美称。《本草从新》指出,银耳有润肺滋阴之效;《本草诗解药性注》中记载,银耳治口干肺痿,痰郁咳逆;中医认为,银耳能养肺阴、清肺热、济肾燥。现代药理研究证明,银耳内银耳多糖含量为60%~70%,尤其是酸性多糖含量高。银耳多糖生理活力高,能诱导机体产生抗体,清除自由基,抗肿瘤、提高机体免疫力等,对高血压、糖尿病等多种疑难杂症都有辅助治疗作用[1]。本次研究主要就银耳多糖提取纯化技术及功能性质进行简单分析。
1 银耳多糖提取纯化的技术原理
1.1 银耳多糖的提取
银耳多糖主要存在于细胞基质中,溶于水,但在高浓度有机溶剂内难溶。基于此性质,学者们尝试了多种方法提取银耳多糖,当前常用的有如下4种。
1.1.1 湿法打浆法
陈丽娟等[2]以银耳子实体为原料对取银耳多糖湿法打浆快速提工艺条件进行了研究,通过正交试验得出湿法打浆法的最佳提取条件为:料液比1∶50,打浆时间7 min,加水温度80 ℃。此条件下,银耳粗多糖的提取率为40.57%,是传统热水浸提法的2.2倍,而提取时间仅为其的1/60。
1.1.2 超声提取法
李颖等[3]以银耳干品为材料对银耳多糖超声提取法的提取效率进行了研究,通过研究得出银耳多糖超声提取的最佳条件是:料液比1∶40,温度60 ℃,提取时间30 min,并通过模型试验证实此条件下银耳多糖具有明显抗氧化能力。
1.1.3 复合酶浸提法
孙晨雨等[4]对银耳多糖复合酶浸提法的提取工艺进行了研究,结果显示复合酶添加量1.5%时,银耳多糖的最佳提取条件是:80倍加水量,浸提温度60 ℃,浸提时间1 h,此条件下银耳多糖的含量最高。
1.1.4 微波辅助提取法
杨嘉丹等[5]对银耳多糖微波辅助提取法的优化工艺进行了研究,在单因素实验及正交试验下确定微波辅助提取法的最佳提取条件为:液料比50∶1、粒度120目、微波功率400 W、微波时间2.0 h。在此工艺条件下,银耳多糖提取率能够达到33.25%±0.14%,且具备良好凝胶特性及流变特性。
1.2 银耳多糖的分离纯化
银耳多糖制备后,多同蛋白质、无机盐等杂质混合,要得到纯净银耳多糖需通过提取纯化去除杂质。邬雨季等[6]研究提出银耳多糖提取后分离纯化工艺流程为:低分子有机溶剂沉淀→脱蛋白→脱色→分离纯化。
1.2.1 低分子有机溶剂沉淀
通过低分子有机溶剂(甲醇、乙醇、丙酮等)可对高浓度有机溶液中的多糖通过多次水溶、醇沉淀方法对多糖中可溶杂质分离,得到较高含量多糖。
1.2.2 脱蛋白
银耳多糖提取中存在的主要杂质为蛋白质,要去除可通过鞣酸、三氯乙酸等有机溶剂进行脱蛋白处理,这样处理下不仅可除去杂质,对多糖的活性也无较大影响。
1.2.3 脱色
银耳多糖在提取中还会夹带些色素,这些色素会对多糖结构及生物活性产生影响,需进行脱色处理。脱色处理多采取离子交换树脂法,因为此方法下以水位溶媒,脱色中不影响多糖的得率及活性,脱色能力强,同吸附法及过氧化氢法对比来说,吸附量更大、吸附的速度也更快,且實验中物理化学性质比较稳定。
1.2.4 分离纯化
银耳多糖是一种包含5种多糖的混合物,为获得均一多糖,需进行分离纯化处理。常用的方法有有机溶剂分级沉淀法、盐析法、金属络合物法、离子交换柱层析法、超滤法等,其中离子交换柱层析法应用最为广泛,此方法固定相用葡聚糖凝胶火纤维素,阴离子吸附剂用氨基充当,阳离子吸附剂用酸基充当。这样分离纯化处理下不仅能确保多糖活性,还能对多糖进行浓缩、脱盐,节能环保,为此在银耳多糖提取中应用非常广泛。
2 银耳多糖在保健医药领域的功能性质
2.1 清除自由基,抗肿瘤、提高机体免疫力等作用
银耳多糖在免疫应答调剂中也发挥重要作用,有学者发现小鼠因免疫功能障碍引起了脓毒症之后,喂食银耳多糖会减少小鼠因感染脓毒症死亡例数。侯建明等[7]研究了从银耳中提取的全价银耳多糖对免疫系统的影响,发现小鼠灌服2.0 g·kg-1银耳多糖后,脾脏/体重比值明显增加,碳廓清能力增高,证实了银耳多糖能增强动物免疫力作用。张磊等[8]对银耳多糖羟自由基的清除作用进行了研究,结果证实银耳多糖可清除羟自由基,浓度为3 mg·mL-1时银耳多糖对羟自由基清除率最高为35.74%。徐灿等[9]对银耳多糖对荷H22肝癌小鼠的抑瘤作用进行研究,研究显示灌服银耳多糖后小鼠共有表达上调基因185个,表达下调基因139个,证实银耳多糖对肿瘤有较好的抑制作用,且银耳多糖抗肿瘤作用是多靶点,多因素共同作用的结果,与癌症相关基因、免疫调节、信号传导基因有关。
2.2 降血脂、降血糖作用
银耳多糖有一定降血脂、降血糖作用。学者研究表明银耳多糖降糖是通过调控糖代谢酶,抗自由基氧化,加速血糖转化、减缓葡萄糖吸收等机制实现的。银耳多糖能促进大鼠胆汁酸排泄,改变其肠道生理,从而降低胆固醇。银耳多糖同胆酸结合,促进胆酸代谢,让胆固醇单向顺利代谢,从而降血脂、预防高胆固醇血脂。
2.3 其他作用
马素好等[10]研究发现银耳多糖对反复脑缺血再灌注小鼠学习记忆具有一定的改善作用。王淑媛[11]证实银耳多糖能促进肠道产生有益菌,有利于动物肠道健康。王靖雅等[12]研究发现银耳多糖有良好的辐射防护作用,能缓解肿瘤放射治疗时的治疗副作用。
3 结语
银耳多糖功能广泛,未来应做好银耳多糖的提取纯化,加强对银耳多糖高级结构、临床药理的研究,为银耳多糖在食品、药品等领域的研发提供更多理论指导。
参考文献:
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[10] 马素好,赵建华.银耳多糖对反复脑缺血再灌注小鼠学习记忆的影响[J].河南职工医学院学报,2016,28(2):65-67.
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(责任编辑:赵中正)