支气管哮喘患儿诱导痰嗜酸粒细胞与肺功能及FeNO浓度的关系

吴守业 张余转

1海南省妇女儿童医学中心儿科,海口570206;2海口市第三人民医院儿科571100

支气管哮喘(哮喘)是儿科呼吸系统常见的疾病之一,其多是由于接触反应原导致的气道炎症反应[1]。哮喘的诊疗工作中了解气道炎症反应程度是指导用药、监测疾病的重要措施之一。诱导痰嗜酸粒细胞(eosinophil count,EOS)和呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)都是临床上目前用于评估气道炎症程度的无创措施之一;而肺功能检测则是评估气道阻塞的重要检查[2-4]。既往在成年哮喘患者的研究中指出诱导痰EOS和FeNO、肺功能检查结果存在一定相关性,但在儿童哮喘中的研究较为缺乏。因此,本次研究旨在探讨儿童哮喘患儿中,诱导痰EOS和Fe NO、肺功能检查的关系。现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 回顾分析了2016年10月至2018年12月在海南省妇女儿童医学中心儿科就诊的哮喘患儿共113例的病例资料,纳入观察组,其中男61例,女52例,年龄(9.87±3.21)岁,年龄范围为4～14岁。本研究符合 《赫尔辛基宣言》的原则。纳入标准:(1)患儿符合中华医学会儿科学分会呼吸学组发布的 《儿童支气管哮喘诊断与防治指南(2016年版)》中的诊断标准[4];(2)患儿处于急性发作期。排除标准:(1)合并有严重心脏或其他脏器疾病;(2)近4周内有上呼吸道感染史;(3)合并有肺结核、支气管肺发育不良等严重呼吸系统疾病;(4)有发热等感染症状;(5)无法配合进行肺功能及Fe NO浓度等检测者。另选取在海南省妇女儿童医学中心体检中心体检的健康儿童共50例纳入对照组,其中男27例,女23例,年龄(10.02±3.29)岁,年龄范围为5～14岁。2组受试者的一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。见表1。

表1 2组受试者一般资料比较

1.2 方法

1.2.1 肺功能检测 采用日本福田ST75肺功能检测仪对受试者进行肺功能测定,每人重复3次,选择3次中的最佳值,记录第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)及第1秒用力呼气容积占预计值百分比(forced expiratory volume in one second as a percentage of expected value,FEV1%pred)。

1.2.2 诱导痰检测 若诱导前受试者测定的FEV1%pred＜80%,则予以400μg沙丁胺醇吸入,10 min后再行诱导检测。清水漱口后,超声雾化吸入3%氯化钠溶液15 min进行痰诱导。用力咳出痰至培养皿;若痰量不足或无痰咳出,可逐步改用4%、5%的氯化钠溶液雾化7 min。将诱导痰中的痰栓取3～5 ml称重后加入4倍体积的0.1%二硫苏糖醇溶液,涡旋震荡1 min后,置于37℃水浴箱内孵育10 min至标本液化。采用300目尼龙滤网过滤标本,滤液以3 000 r/min的速度离心10 min,离心半径10 cm,将细胞沉淀制成细胞涂片,置于55℃烤箱内烤干,10%甲醛固定。将细胞涂片进行瑞氏姬姆萨染色15～20 min,在显微镜下进行细胞分类计数,计算400个非鳞状上皮细胞中EOS的数量,再计算EOS百分比。

1.2.3 FeNO测定 检测前4 h内禁止剧烈运动,并禁止进食含氮量较高的食物及饮料。采用瑞典尼尔斯公司的Fe NO测定系统检测Fe NO。嘱受试者先排空肺内气体,用嘴含住过滤器,深吸气,平稳呼气持续10 s,记录检测结果。

1.3 观察指标 比较2组受试者诱导痰EOS、FeNO以及FEV1%pred;分析哮喘患儿中诱导痰EOS水平与Fe NO、肺功能的相关性。

1.4 统计学分析 采取SPSS 22.0软件进行数据统计和分析。计量资料经正态分布检验后采用的形式表示,组间采用独立样本t检验进行比较;计数资料采用频数(率)的形式表示,组间采用χ2检验进行比较。相关性比较采用Pearson相关性分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组受试者诱导痰EOS、FeNO及肺功能比较 观察组患儿诱导痰EOS和FeNO水平显著高于对照组(t=11.921、17.081,P值均＜0.05),而其FEV1%pred较对照组差,差异有统计学意义(t=18.673,P＜0.05)。见表2。

表2 2组受试者诱导痰EOS、FeNO及肺功能比较()

表2 2组受试者诱导痰EOS、FeNO及肺功能比较()

注:EOS为嗜酸粒细胞;FeNO为呼出气一氧化氮;FEV 1%pred为第1秒用力呼气容积占预计值百分比

组别 例数 诱导痰EOS(%)FeNO(ppb)FEV1%pred(%)观察组 113 13.48±7.58 54.85±16.42 56.49±10.16对照组 50 0.67±0.42 13.47±7.22 92.18±13.42 t值 11.921 17.081 18.673 P值 0.000 0.000 0.000

2.2 诱导痰EOS和FeNO的相关性 针对观察组患儿诱导痰EOS和FeNO数据分析,发现FeNO与痰EOS水平呈正相关(r=0.265,P=0.005)。见图1。

图1 支气管哮喘患儿急性发作期诱导痰EOS和FeNO的相关性

2.3 诱导痰EOS与肺功能的相关性 针对观察组患儿诱导痰EOS和FEV1%pred的数据分析,发现肺功能FEV1%pred与痰EOS水平无明显相关性(r=0.158,P=0.093),见图2。

图2 支气管哮喘患儿急性发作期诱导痰EOS和FEV 1%pred的相关性

3 讨论

哮喘是一种慢性的呼吸道变态反应症所致的气道高反应,其在儿童中的发病率较高。部分患儿可能是上呼吸道感染后诱发,但大部分患儿是由于吸入过敏原发病[5]。检测呼吸道炎症情况是临床上哮喘诊疗中的一大难题,支气管肺泡灌洗以及支气管内膜活检能够较为准确地评估呼吸道的炎症情况,但上述两项检查均为有创检查,对于部分患者,特别是儿童患者,耐受性和配合度较差,很难完成检查[6-7]。因此,寻找无创性的检查方式评估气道炎症情况,是非常重要的。

诱导痰EOS是目前临床上应用较多的一项临床检查。气道炎症反应多由EOS参与,因此检测气道分泌物中EOS的浓度,能够在一定程度上帮助评估气道炎症反应[8]。目前对于诱导痰EOS的研究多集中于成人哮喘,这可能是由于儿童患者配合度较差,标本获取不易有关。金芬华等[9]、古丽班努等[10]的研究均发现,成人哮喘患者的诱导痰EOS水平明显升高。张志海等[11]的研究则进一步指出诱导痰EOS与哮喘的急性发作有密切关系。我们的研究结果发现,儿童哮喘患者的诱导痰EOS水平也有明显上升,这与上述[9-11]的研究结果相似。

FeNO是由呼吸道上皮细胞及炎症细胞等产生的一种分子物质,其能够在患者呼出的气体中检测,被认为是一种无创地评估气道炎症程度的标志物之一,也是指导哮喘治疗方案调整以及检测患者依从性的重要指标[12-13]。丁静等[14]的研究结果显示,不同病情阶段的哮喘患儿其FeNO水平有明显差距,急性发作期FeNO最高,缓解期较低,提示FeNO是评估气道当前炎症程度的可靠指标。本次研究仅将急性发作期的患儿纳为研究对象,结果显示,观察组患儿的FeNO水平显著高于对照组,与既往的研究结果相似[15]。哮喘患者由于气道高反应导致肺功能损伤。我们的研究和既往的研究结果均提示哮喘患者的FEV1%pred水平明显降低。

既往在成年哮喘患者中的研究指出患者诱导痰EOS水平与Fe NO呈正相关[16]。我们的研究证实在儿童患者中这一现象仍然存在,但相关性系数略低,这可能是由于不同研究之间样本量的不同有关,也可能与儿童自身免疫系统的相对不稳定性有一定的关系。吴淑红等[16]的研究结果显示除了诱导痰EOS,哮喘外周血EOS水平与FeNO呈正相关。临床上,外周血EOS的检测样本更容易获得,且更利于随访监控。但我们的研究结果提示,哮喘患儿诱导痰EOS水平与肺功能的相关性不大,这可能与研究样本较少有关。此外,肺功能检测更能反映气道阻塞的情况,而非炎症水平,提示在哮喘患儿中气道阻塞程度与炎症程度并不直接相关,这在既往研究EOS与肺功能的相关性研究中也得到证实。

综上所述,哮喘患儿诱导痰EOS水平与FeNO呈正相关,但与肺功能无明显相关性。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突