长沙地区血清不饱和铁结合力、总铁结合力和转铁蛋白饱和度参考区间的建立

庄建云，庄思琪，胡敏，陈若虹(中南大学湘雅二医院检验科,长沙410011)

血清铁(serum iron, SI)及血清不饱和铁结合力(unsaturated iron binding capacity，UIBC)、总铁结合力(total iron binding capacity，TIBC)、转铁蛋白饱和度(transferrin saturation，TSAT)都是监测铁代谢状态的常用指标。联合检测SI、TIBC、UIBC和TSAT可以为临床诊断铁代谢异常提供依据[1-2]。行业标准[3]中仅包含了SI的参考区间，暂未发现有适合中国人群的UIBC和TIBC参考区间的相应标准，而作为计算值的TAST的参考区间几乎没有报道。为了更好地指导临床相关疾病的诊断和治疗，本研究根据CLSI文件EP28-A3c的要求[4]，通过检测长沙地区健康成年人SI及血清UIBC水平，并计算得到血清TIBC及TSAT水平， 建立本实验室血清UIBC、TIBC、TSAT的参考区间。

1 对象与方法

1.1研究对象 2018年9月至2019年5月在中南大学湘雅二医院健康管理中心体检的成年人。根据EP28-A3c 要求制定入选标准：无心脑血管疾病，无肝胆脾胰肾等重要器官功能障碍，近期无大量饮酒(>30 g/d)行为、手术、住院、输血或用药，所有体检项目结果均正常。根据问卷调查表及体检结果，最终得到符合标准的参考个体387例，年龄20～69岁。其中，男性167例，按年龄段分为5个组：20～29岁组30例，30～39岁组40例，40～49岁组30例，50～59岁组33例，60～69岁组34例；女性220例，按年龄段分为5个组：20～29岁组48例，30～39岁组69例，40～49岁组33例，50～59岁组34例，60～69岁组36例。

1.2主要仪器与试剂 7600型全自动生化分析仪(日本日立公司)，SI、UIBC测定试剂盒(红菲绕啉直接法)及配套校准品、质控品(日本和光纯药株式会社)。

1.3标本采集与检测 研究对象采血前一天无饮酒、无剧烈运动，并保持清淡饮食，在静息和空腹状态下采集静脉血，采集后2 h内离心(2 980×g，5 min)分离血清，-20 ℃保存。在7600型全自动生化分析仪上用两点终点法检测SI及UIBC水平。检测前确保仪器性能正常，使用试剂盒配套的校准品校准仪器(两点法定标)并检测配套的双水平质控品，质控结果均在控后检测SI及UIBC水平。根据SI及UIBC结果，用公式：TIBC=SI+UIBC，TSAT=SI/TIBC，计算TIBC、TSAT。冷冻样品在检测前室温复溶并充分混匀。

2 结果

2.1正态性检验 采用Dixon法判断离群值，UIBC、TIBC及TSAT的D/R值均小于1/3，见表1，故无离群值。根据UIBC、TIBC、TSAT检测结果分别进行Kolmogorov-Smirnov正态性检验，以P>0.05作为正态分布判断标准，UIBC符合正态分布(P>0.05)，TIBC及TSAT不符合正态分布(P均<0.05)；绘制频数分布直方图，TIBC和TSAT均为近似正态分布趋势。

表1 UIBC、TIBC、TSAT离群值检验

注：D1表示高值侧D值；D2表示低值侧D值。

2.2不同性别组各指标的比较 见表2。用T检验分析男性组与女性组的结果差异是否有统计学意义，结果UIBC及TSAT在男女性别组之间差异有统计学意义，因此需分组建立参考区间；TIBC在男女性别组之间差异无统计学意义，因此无需按照性别分组建立参考区间。

表2 不同性别组血清UIBC、TIBC和TSAT的比较

2.3不同年龄组TIBC的比较 TIBC无需按照性别分组，按年龄分为5组，采用单因素方差分析判断血清TIBC是否需要根据年龄分组，结果显示各年龄组之间的差异有统计学意义(F=2.636，P=0.034)，各组结果见表3。为了发现5组中是否有相近的组合，同时由于各组样本数不等，所以采用scheffe事后检验分析5组样本，结果显示5个年龄组之间两两比较，P均>0.05，且只有一个同类子集，故无需按照年龄分组建立TIBC的参考区间。

表3 不同年龄组血清TIBC比较

2.4不同年龄组UIBC和TSAT的比较 UIBC及TSAT均需按照性别分组，首先将男性按年龄分为5组，采用单因素方差分析判断不同年龄组间是否有差异，结果显示两指标在各年龄组之间的差异均无统计学意义(见表4)，因此无需按照年龄分组建立男性UIBC及TSAT的参考区间。

将女性按年龄分为5组，结果显示TSAT在各年龄组之间差异无统计学意义，而UIBC各年龄组之间差异均有统计学意义(见表4)。scheffe事后检验结果显示UIBC 5个年龄组之间两两比较的P值均>0.05，且只有一个同类子集，故无需按照年龄分组建立女性UIBC及TSAT的参考区间。

表4 不同年龄组血清UIBC、TSAT的比较

2.5参考区间 TIBC无需按性别及年龄建立参考区间，UIBC和TAST需要按性别但无需按年龄建立参考区间，最终采用EP28-A3c建议的非参数法计算得到长沙地区健康成年人血清TIBC、UIBC及TSAT的95%参考区间，见表5。长沙地区健康成人TIBC、UIBC和TSAT的95%参考区间分别为：TIBC：45.2～73.4 μmol/L；UIBC：男性，16.0～54.4 μmol/L，女性，23.4～58.2 μmol/L；TSAT：男性，20.9%～67.1%，女性，16.6%～54.4%。

表5长沙地区20～69岁健康成人血清TIBC、UIBC及TSAT参考区间

项目性别P2.5(95%CI)MP97.5(95%CI)TIBC(μmol/L)—45.2(42.9～46.3)57.073.4(71.0～77.1)UIBC(μmol/L)男16.0(12.0～19.4)34.254.4(47.8～62.1)女23.4(20.7～24.8)36.558.2(52.8～62.7)TSAT(%)男20.9(15.4～22.80)39.767.1(62.3～75.8)女16.6(12.35～18.68)33.954.4(51.4～61.3)

3 讨论

除了熟知的原发性和继发性铁代谢相关疾病外，研究表明，铁代谢紊乱可能与多种疾病相关，如心血管疾病、肿瘤、2型糖尿病、肾脏疾病等[5-8]，监测铁代谢指标在临床诊疗中的作用越来越重要。建立参考区间可以更好地为相应疾病的临床诊疗提供指导，但参考区间受到检验方法、人种、地域、生活习惯、性别、年龄等因素的影响，建议每个临床实验室都应建立符合当地人群特征的参考区间[4]。

本研究统计分析了长沙地区387名20～69岁体检健康成年人的血清TIBC、UIBC及TSAT水平，并初步建立了适合本地区成年人的血清TIBC、UIBC、TSAT的参考区间。试剂说明书提供的UIBC参考区间为34.2～48.1 μmol/L，来源于日本人群，与我国存在人种、地域、生活习惯及饮食结构的差异。本研究参考区间更宽一些，并且按照性别分组，更适合于临床。本研究建立的TIBC和UIBC的参考区间与文献[9]存在一定的差异，特别是在性别分组方面，可能存在研究对象的地域差异，也有可能是因为这些参考区间均为上世纪末建立，随着社会的发展，当前的生活水平有了很大程度的提高，饮食结构、生活方式发生改变导致这些指标的水平发生了变化。同时文献[9]中成人TSAT的参考值为男性约40%，女性约35%，参考区间较粗略，不适用于临床，而我们建立的TSAT参考区间更精确，能更好地为临床服务。

本研究结果显示，TIBC在男性组和女性组中水平差异无统计学意义，UIBC、TSAT在男性组和女性组中水平差异有统计学意义，可能与男女性别之间血红蛋白水平、肌肉水平、激素分泌水平及种类的不同有关，具体原因还需进一步研究。

由于自愿接受健康调查并符合入选标准的人数不多，本研究虽符合EP28-A3c要求的最低样本量要求，但仍然存在样本数量偏少的问题。此参考区间初步建立后，我们将继续扩大样本量进行验证，同时，本研究结果也有待得到本地区其他相关机构的验证。