脱毒马鞭草对蛋鸡产蛋性能、蛋黄脂质及肠道菌群的影响

易先国

（信阳农林学院，河南信阳 464000）

从植物中提取的生物活性物质对改善家禽生产性能和免疫状态具有重要作用。植物提取物对家禽的有益作用包括刺激采食量、改善生长和产蛋性能、激活免疫系统、抗菌和抗氧化作用。马鞭草是一种多年生草本植物，在东北亚国家广泛生长，传统上，它作为一种中草药被用于保护文物和治疗胃炎和动脉粥样硬化。马鞭草汁由漆酚（60% ～65%）、胶状底物（4% ～8%）、糖蛋白（2% ～5%）、漆酶（1%）和水（20% ～25%）组成，漆酚是具有抗菌、抗氧化活性的一种油性有机成分（陈兴丽等，2010）。由于上述作用，马鞭草可以作为饲料添加剂以提高猪和肉鸡的健康状况和生产性能（Cho 等，2012 ；Lohakare 等，2006）。但有报道称，漆酚作为马鞭草的主要抗原，在动物中表现出较强的抗原性，可能具有毒性作用（Cheong 等，2010）。因此，建议在实际使用前进行脱毒，如采用聚合工艺或通过简单的加热。但在动物试验中使用的马鞭草并没有被脱毒，尽管鲜有研究报道指出未脱毒的马鞭草具有有害影响（刘珈伲等，2015 ；Lohakare 等，2006）。因此，本试验以蛋鸡为研究动物，评估日粮脱毒马鞭草添加水平对其产蛋性能、蛋品质、血清、肝脏脂质组成及盲肠微生物菌群的影响。

1 材料与方法

1.1 试验设计 试验将200 只52 周的海兰褐壳蛋鸡，随机分为4 组，每组50 只（10 只/ 重复）。对照组日粮采用玉米- 小麦- 豆粕型，其他3 组日粮分别在对照组日粮中添加0.05%、0.1% 和0.2% 的脱毒马鞭草。试验共进行6 周，蛋鸡基础日粮配方及营养成分见表1。试验期间鸡只自由采食和饮水，鸡舍环境维持在（20±3）℃，光周期16 h 光照、8 h 黑暗。每天均添加新鲜饲料，每周记录饲料摄入量。

1.2 生产性能及蛋品质 每天记录鸡蛋数量和称量蛋重。计算产蛋量和平均蛋重时剔除异常鸡蛋（即不包括软壳、无壳或破蛋）。分别在试验第2、4 和6 周，从每个重复体中分别收集5 枚鸡蛋，称重后，在室温下保存过夜，以便后续分析。用蛋壳强度仪测定完整鸡蛋的蛋壳强度，采用千分尺测定蛋壳厚度，全自动蛋品质仪测定蛋壳颜色、蛋白高度和哈夫单位，用罗氏比色扇测定蛋黄颜色。

表1 蛋鸡基础日粮配方及营养成分

1.3 样品采集与分析 在试验结束时，每个重复随机选择2 只鸡称重后，翅下静脉采血，血液样本收集在促凝真空管中，4℃下2000×g 离心15 min，置于-80℃保存至分析。采用试剂盒比色法测定谷草转氨酶（GOT）和谷转氨酶（GPT）活性和总胆固醇的含量。收集肝脏和腹脂后称重，-80℃保存。用氯仿/ 甲醇（2 ∶1 体积比）从蛋黄和肝脏中提取总脂，以正己烷：二乙醚：甲酸（85 ∶15 ∶0.1 体积比）为显色溶剂，在硅胶柱上用薄层色谱法分离肝脏和蛋黄中各脂质组分的含量。

无菌取盲肠内容物进行微生物检测。在无菌、冰冷的PBS 溶液中，将盲肠内容物匀浆，稀释后涂于选择性琼脂上进行目标菌株的计数。分别用总平板计数琼脂培育基、麦康凯琼脂培养基和乳酸细菌培养基对总细菌、大肠菌和乳酸菌进行计数。每片37℃孵育24 ～72 h，计数菌落。

1.4 数据统计 所得数据采用SAS 软件一般线性模型程序进行分析。采用正交多项式对比法测定日粮脱毒马鞭草不同添加水平对各指标的线性和二次曲线效应。如果P ＜0.05 为差异显著。

2 结果与分析

2.1 脱毒马鞭草对产蛋性能、组织器官相对重量的影响 由表2 可知，日产蛋量随日粮脱毒马鞭草添加水平的增加表现为显著线性和二次曲线增加（P ＜0.05），各处理对蛋鸡日采食量和蛋重的影响无显著差异（P ＞0.05）。此外，平均蛋重随日粮脱毒马鞭草添加水平的增加表现为显著线性和二次增加（P ＜0.05）。日粮脱毒马鞭草添加水平对肝脏和腹脂相对重量的影响无显著差异（P＞0.05）。

2.2 脱毒马鞭草对蛋品质的影响 由表3 可知，随着日粮脱毒马鞭草浓度的升高，蛋壳厚度显著线性增加（P ＜0.05），但各处理对蛋壳颜色、蛋黄颜色、蛋壳强度和哈弗单位均无显著影响（P ＞0.05）。

2.3 脱毒马鞭草对血清生化指标以及肝脏和蛋黄脂肪组成的影响 由表4 可知，日粮添加不同水平的脱毒马鞭草对蛋鸡血清胆固醇含量、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性均无显著影响（P ＞0.05），同时对肝脏胆固醇、甘油三酯、磷脂和蛋黄磷脂含量也无显著影响（P ＞0.05）。蛋黄胆固醇含量随脱毒马鞭草浓度的升高表现为显著线性降低（P ＜0.05），而蛋黄甘油三酯含量有显著线性降低趋势（P=0.06）。

表2 脱毒马鞭草添加水平对产蛋性能、组织器官相对重量的影响

2.4 脱毒马鞭草对蛋鸡盲肠微生物组成的影响 由表5 可知，脱毒马鞭草对盲肠细菌总量和大肠杆菌含量均无显著影响（P ＞0.05），但盲肠乳酸菌含量随日粮脱毒马鞭草添加水平的升高表现为显著线性升高（P ＜0.05）。

3 讨论

马鞭草提取物作为中草药可以用于治疗胃炎和动脉粥样硬化，对动物具有潜在的应用价值。Song 等（2010）、Lohakare 等（2006）研究发现，在不影响肉鸡生长性能的前提下，饲料中添加马鞭草提取物可以提高肉鸡脂肪消化率，改善猪肉的氧化稳定性。本研究评估了不同脱毒马鞭草添加水平对蛋鸡产蛋性能、蛋品质、脂代谢和盲肠菌群的影响。值得注意的是，与对照组相比，饲粮中添加脱毒马鞭草可提高产蛋性能和鸡蛋质量。Kang等（2008）报道，在饮水中添加马鞭草提取物可显著提高蛋鸡产蛋量和蛋品质，同时也显著改善粗蛋白质和粗灰分的消化率。作者推测，产蛋性能和蛋品质的提高可能与马鞭草介导的营养物质利用增强有关。

表3 脱毒马鞭草添加水平对蛋品质的影响

表4 脱毒马鞭草添加水平对蛋鸡血清生化指标、肝脏和蛋黄脂肪组成的影响

表5 脱毒马鞭草添加水平对蛋鸡盲肠微生物组成的影响 lgcfu/g

在本研究中，饲粮处理对GOT、GPT 和总胆固醇水平无显著影响。测定血清GOT 和GPT 活性可以用于评估家禽肝脏和组织损伤。马鞭草中主要的抗原成分是漆酚，其可引起过敏性皮疹及诱导接触性皮炎（Ma 等，2012）。因此，尽管目前还没有关于马鞭草对家畜生产性能和生理反应负面影响的报道，但对含有漆酚的马鞭草进行解毒是有益的。无论如何，本研究使用的脱毒马鞭草对血清GOT 和GPT 活性无显著影响，表明其作为蛋鸡饲料添加剂是安全的。有研究报道，在马鞭草具有降胆固醇作用，如从马鞭草提取得到的糖蛋白降低了小鼠中三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇的水平。Golzadeh 等（2012）发现，饲粮中添加马鞭草降低了肉鸡超低密度脂蛋白胆固醇水平，这可能与3 - 羟基-3 甲基戊二酰辅酶A 还原酶活性降低有关，后者是一种合成胆固醇的限时酶。在本研究中，蛋黄胆固醇随日粮脱毒马鞭草添加水平的升高表现为显著线性降低，但对血液和肝脏胆固醇均无显著影响。肝脏是鸡蛋胆固醇合成位点，胆固醇以低密度脂蛋白的形式转运到血液，通过细胞介导的内吞作用在蛋黄中沉积（Kim 等，2004）。因此，本研究中脱毒马鞭草降低蛋黄胆固醇可能是胆固醇代谢改变的结果，即胆固醇合成、降解及组织再分布或内源性脂蛋白的合成和分泌。值得注意的是，鸡蛋胆固醇含量的降低并不伴随着产蛋量的降低。

Kang 等（2008）研究表明，在饮水中添加马鞭草提取物对盲肠大肠杆菌和沙门氏菌数量无显著影响，这与本研究发现的脱毒马鞭草对细菌总数和大肠杆菌数无显著影响的结果一致。因此，作者认为，脱毒马鞭草诱导盲肠乳酸菌数量增加具有广阔的应用前景，因为乳酸菌可以产生乳酸来维持鸡胃肠道低pH，从而抑制病原菌的过度生长。

4 结论

综上所述，日粮添加脱毒马鞭草对蛋鸡产蛋率和蛋壳品质有显著改善作用。蛋鸡饲料添加脱毒后的马鞭草可以增加盲肠乳酸菌的数量，降低蛋黄中胆固醇的含量。