干燥综合征合并原发性胆汁性肝硬化患者的外周血Th17/Treg细胞百分比及临床特征

郇稳 史丽璞

干燥综合征(SS)属于自身免疫性疾病的一种，其发病机制尚不清楚[1-3]。SS患者靶器官唇腺中主要浸润CD4+T淋巴细胞，研究表明Th17、Treg影响SS的临床表达[4]。原发性胆汁性肝硬化(PBC)早期，患者门静脉区域伴有大量的T细胞浸润。尽管PBC患者的抗心肌抗体呈阴性，但外周血单核细胞中存在一定量的、具备抗原特异性的CD4+T淋巴细胞，可产生干扰素-γ，影响PBC疾病过程[5-9]。研究显示，PBC患者静脉血中单核细胞Th17细胞比例增加，同时受损胆管周围聚集有Th17细胞[10]。本研究分析SS合并PBC患者的临床特征，探明Th17、Treg细胞对SS合并PBC患者的影响。

资料和方法

一、研究对象

选择2012年3月至2018年2月郑州人民医院收治的SS合并PBC患者22例，男性7例，女性15例，平均年龄(54.1±9.6)岁。SS患者48例，男性10例，女性38例，平均年龄(56.7±10.2)岁。选取健康志愿者68名，排除标准包括已知原因引起的外部结节病、淋巴瘤、艾滋病、角膜干燥症或腮腺炎等。本研究经医院伦理委员会批准。

二、研究方法

采集患者静脉血，分离获取单个核细胞(Ficoll密度梯度离心法)，采用酶联免疫吸附法收集血浆。应用流式细胞仪检测外周血Th17和Treg细胞百分比；采用美国Beckman Coulter公司生产的AU5800型自动生化分析仪检验ALT、AST、ALP、γ-GT和TBil等肝功能指标。同时统计并记录患者临床表现。

三、统计方法

结 果

一、临床表现

SS合并PBC患者出现黄疸、皮肤瘙痒、腹水、消化道出血、口干、食管静脉曲张、发热及眼部干涩等主要临床表现为20例(90.9%)，SS患者出现上述症状者为37例(77.1%)，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。而体质量减轻的患者SS组(46例，95.8%)明显多于SS合并PBC组(17例，77.3%)，差异有统计学意义(P=0.018)。

二、 肝功能指标

3组患者ALT、AST、ALP、γ-GT和TBil比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

三、 Th17、Treg和Th17/Treg细胞百分比结果

SS合并PBC患者Th17细胞[16.6(10.1，22.5)%]高于SS组[9.4(7.0，13.0)%]及健康组[4.9(4.3，9.8)%]；SS合并PBC组Th17/Treg细胞比值[0.52(0.42，0.62)]高于SS组[0.25(0.14，0.37)]及健康组[0.22(0.13，0.26)，均P<0.05]。

表1 3组患者肝功能指标比较(±s)

讨 论

临床中，SS合并PBC的情况并不少见。本研究结果发现，SS组患者黄疸、皮肤瘙痒、腹水等主要临床症状发生率明显低于SS合并PBC组，两组患者肝功能指标也存在着显著差异。在稳态或非炎症状态下，人体的Th17和Treg细胞保持平衡[11]。由于大多数SS合并PBC患者的胆管和腺体都伴有CD4+T淋巴细胞浸润，使得肝脏和其他外分泌腺具有共同的抗原性。在本研究中，SS合并PBC组外周血Th17/Treg明显高于SS组及健康组，这些结果表明了促炎细胞的相对增加与SS、PBC的病理基础有关。

Th17细胞可在免疫表达过程中分泌促炎因子白介素-17，诱导基质金属蛋白酶，并调节破骨细胞，进一步损伤肝功能[12]。同时，Treg可通过释放抑制性细胞因子白介素-10和TGF-β发挥免疫调节作用，抑制炎症引起的免疫反应[13]。受到TGF-β的影响，初始T淋巴细胞可以诱导形成Treg，在TGT-β和IL-6共同影响下，促使初始T淋巴细胞诱导形成Th17细胞[14]。而在特定细胞因子环境下Th17和Treg细胞能够相互转化[15]。尽管SS与PBC的发病机制尚不清楚，本研究结果显示SS合并PBC患者Th17细胞比例的增加，而Treg细胞相较于SS患者及健康人群并无明显差异，这些结果说明了SS合并PBC患者中Th17细胞功能状态占主导地位，由其引起Th17/Treg比例的失衡，Th17细胞分泌的白介素-17将进一步加速炎症反应，导致肝功能指标升高，使这些患者的临床症状表现得更加突出。

本研究发现，外周血Th17细胞比例升高可作为SS合并PBC诊断和疾病严重程度的指标，甚至作为潜在的治疗靶点。SS合并PBC患者外周血Th17/Treg细胞水平及其比值明显失衡，提示Th17细胞在很大程度上参与了致病过程。此外，Th17/Treg比值与某些肝功能指标有一定的相关性，在今后的研究中可根据病情的严重程度进一步分层分析。