血清MAO、5′-NT、GGT检测在诊断原发性肝癌中的价值

刘少平 余 卉

原发性肝癌为我国常见恶性肿瘤之一，以肝区疼痛、消化道及全身症状、肝大为主要症状，具有恶性程度高、预后差、病情进展快等特点，因此尽早诊治是改善患者生存质量的关键[1]。目前甲胎蛋白是临床上诊治原发性肝癌的最常用肿瘤标志物，但其假阴性及假阳性结果较高，诊断及筛查价值并不高。近年来的研究表明[2]，单胺氧化酶(MAO)的活力改变和肝细胞受损后再生与原发性肝癌细胞增殖浸润有关。5′-核苷酸酶(5′-NT)为最新发现的肝癌标志物，可作用于多种核苷酸，其浓度增加主要见于肝胆系统疾病[3]。γ-谷氨酰基转移酶(GGT)主要存在于肝细胞膜及微粒体上，参与谷胱甘肽的代谢，已有研究报道[4]，GGT对肝癌有一定预测价值。但目前临床上缺乏以上指标联合检测的报道，本研究旨在分析血清MAO、5-NT、GGT检测在诊断原发性肝癌中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择天门市第一人民医院2015年2月至2018年6月收治的43例原发性肝癌患者，入选标准[5]：均根据临床病史、症状、实验室指标及影像学检查确诊为原发性肝癌；心、脑、肾等脏器严重不全。排除标准：妊娠或者哺乳阶段；活动性肝病、转移性肝癌；严重创伤。43例原发性肝癌患者中男性24例，女性19例；年龄29～71岁，平均(55.49±8.17)岁。同期选择我院收治的52例良性肝病患者，包括肝硬化患者20例、慢性乙型肝炎患者18例、病毒性肝炎患者14例；男性30例，女性22例；年龄26～74岁，平均(57.01±6.42)岁。并选择本院健康体检者35例作为健康对照组，男性20例，女性15例；年龄25～73岁，平均(56.38±8.59)。3组年龄、性别等资料比较无统计学差异(P>0.05)。

1.2 方法

采集所有受试者空腹外周静脉血，用血液分离机按3 000 r/min分离15 min，将上清液保存在-20 ℃低温箱中待检。采用贝克曼AU5821生化分析仪检测血清MAO、5′-HT、GGT水平，MAO试剂盒来自浙江伊利康生物技术有限公司，5'-HT试剂盒来自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，GGT试剂盒来自北京利德曼生化股份有限公司。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 各组血清MAO、5′-HT、GGT水平比较

原发性肝癌组血清MAO、5′-HT、GGT水平高于良性肝病组，良性肝病组血清MAO、5′-HT及GGT水平高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 各组血清MAO、5′-HT、GGT水平比较

2.2 血清MAO、5′-NT、GGT单独和联合检测原发性肝癌的ROC曲线

血清MAO曲线下面积为0.718(95%CI为0.613～0.822，P<0.001)，敏感度和特异度分别为0.571和0.418；5′-NT曲线下面积为 0.717(95%CI为0.616～0.819，P<0.001)，敏感度和特异度分别为0.558和0.476；GGT曲线下面积为0.714(95%CI为0.611～0.818，P<0.001)，敏感度和特异度分别为0.738和0.334；联合检测曲线下面积为0.884(95%CI为0.817～0.952，P<0.001)，敏感度和特异度分别为0.401和0.881，见表2及图1。

表2 血清MAO、5′-NT、GGT单独和联合检测原发性肝癌的ROC曲线

3 讨论

原发性肝癌的发病率及病死率较高，其发病隐匿，容易通过淋巴、血液系统转移，是严重威胁机体健康的恶性肿瘤之一。目前临床对恶性肿瘤筛查的重视程度不高，患者就诊时多为中晚期，已错过最佳诊疗时机。因此非介入性、重复性高、操作简便的检查方法备受临床关注。近年来有研究发现[6]，多种血液标志物对恶性肿瘤的诊断有良好的预测价值。

MAO是作用于不同单胺类化合物的水溶性酶，广泛分布于肝肾等器官细胞线粒体、结缔组织内，能够参与胶原成熟最后阶段的架桥形成。纤维形成后MAO脱离，增加血清中MAO浓度，肝病患者因肝内慢性炎症性刺激导致纤维结缔组织增生，导致肝脏纤维化[7]。原发性肝癌发生后可慢性损伤肝细胞，促进线粒体破坏，导致MAO释放入血，明显增加MAO活性[8]。本研究结果显示，原发性肝癌患者血清MAO水平显著高于良性肝病组，说明血清MAO水平可能是原发性肝癌病情进展的有效监测指标，对原发性肝癌的筛查及良性肝脏疾病的诊断有重要价值。ROC曲线描述了诊断试验区分患者及非患者的能力，不受到发病率的影响，综合了特异度及敏感度指标，并考虑了所有可能的诊断界值影响，更能全面评估诊断试验准确性[9]。进一步ROC曲线分析发现，MAO曲线下面积高于0.5，证实血清MAO水平对原发性肝癌的诊断有一定意义。

图1 血清MAO、5-NT、GGT联合诊断原发性肝癌的ROC曲线

5′-NT作为一种糖蛋白，在机体运动、纤维蛋白合成、细胞生长发育及内皮屏障功能等方面有重要作用，因此其和多种疾病发生发展有良好关系[10]。5′-NT在机体主要分布于肝脏胆小管及窦状隙膜内，肝内外梗阻或者肝细胞受损时可释放入血，血清中5′-NT浓度改变较少受到肝外疾病影响，释放的5′-NT只有在胆汁酸作用下可进入血液，因此5′-NT在肝胆疾病诊断中有重要作用[11]。肝癌患者肝脏损伤明显，肝细胞内质网膜结构显著破坏，线粒体出现退行性改变甚至消失，导致肝细胞损伤，明显增加血清中5′-NT浓度[12]。既往研究发现[13]，定期检测肝癌患者血清5′-NT浓度改变，有利于病情进展、疗效及预后转归的观察。本研究发现，血清5′-NT在良性肝病及原发性肝癌组中均上升，尤以原发性肝癌组上升最为明显，血清5′-NT的ROC曲线下面积为0.717，说明其对原发性肝癌诊断的准确度较高，可能是其诊断的灵敏指标。

GGT为微粒体酶，在肝脏、肾脏及胰腺中含量丰富，正常状态下，血清中GGT多来自于肝脏，肝内GGT主要分布于肝内胆管上皮及肝细胞浆内，是生成半胱氨酰甘氨酸及γ-谷氨酰残余物。肝脏发生炎症肝内合成亢进或者胆汁排除受阻时其浓度增加，此浓度上升能够提示发生以胆汁淤积为主的病变。有研究发现[14]，血清中GGT不仅来源于损伤肝细胞所释放酶，还可能是胆汁酸作用于细胞膜，导致GGT在细胞表层释放并进入循环，推测GGT在肿瘤形成中的作用可能受到细胞应答中氧化应激途径调节。癌变肝组织中，GGT重新大量表达，出现胎肝特点，在外周血中出现特异性同工酶带，癌组织自身或周围炎症刺激作用，增加肝细胞膜通透性，引起肝癌患者血清GGT大幅增加，但其在癌变过程中的异常表达机制仍有待进一步研究[15]。相关研究报道[16]，肝脏癌变组织中，GGT催化的谷胱甘代谢可能有待氧化损伤，从而参与癌变组织的恶性转化。本研究发现，原发性肝癌组、良性肝病组血清GGT浓度均有程度不一的增加，但原发性肝癌组浓度相对较高，说明血清GGT浓度能较好反映肝脏病情进展及肝脏损伤程度。但GGT测定结果容易和其他肝胆疾病重叠，加上GGT在机体分布广泛，多种酶诱导剂可诱导其合成，因此单独检测GGT对原发性肝癌的诊断价值有待提高。临床诊断指标需满足高特异度及敏感度的条件，但临床实践中大部分非创伤性诊断试验的完善度不高，特异度及敏感度较低，需联合多个指标联合诊断。多个指标联合诊断可明显提高疾病的诊断准确率，本研究结果发现，血清MAO、5′-NT及GGT联合诊断的曲线下面积明显高于单个指标。

综上所述，血清MAO、5′-NT及GGT是反映肝功能损伤程度的敏感指标，联合检测可为原发性肝癌的诊断提高可靠依据。但本研究存在样本量有限、观察指标不够全面等不足，因此本研究结果有待更多大规模、大样本的长期研究进一步证实。