半夏及其伪品的鉴定方法简论
2020-03-03孟姗姗
孟姗姗
作为传统中药材,半夏以干燥块茎入药,因其降逆止呕、燥湿化痰、消痞散结等功效,在我国中医药两千余年的历史中,备受推崇[1]。近代以来,对半夏药理药性的研究更加深入,结果显示,针对冠心病、高血脂、肿瘤、肝病等多种威胁现代人身体健康的疾病,其有重要的治疗作用[2]。因此,我国半夏市场的需求量一直居高不下,同滞后的半夏栽培技术、减少的野生半夏资源等形成激烈矛盾,导致药材市场中,大量半夏伪品混入其中,不仅影响了药材市场的稳定,而且对半夏的用药安全也有负面影响[3]。有鉴于此,近十年来,相关从业人员针对此种情况,不断进行半夏及其伪品的鉴定研究。本文对此展开综述,总结不同的半夏及其伪品的鉴定方法,以期为准确、快速地进行半夏鉴定提供参考。
1 鉴定半夏及其伪品的传统方法
1.1 原植物形态鉴别半夏及伪品在原植物形态上,无论是叶片形状还是佛焰苞片上,都有所不同。具体来说,半夏的植物叶片呈现出“卵圆形”或“披针形”。半夏伪品中,水半夏的植物叶片呈现出“戟状长圆形”;而虎掌南星不仅叶柄比其余两者都要长,最主要的植物叶片呈现“掌状”。在佛焰苞片的形态上,半夏呈现“鼠尾状”;水半夏呈现“长鞭状”;虎掌南星呈现“线状”[4]。因此,如果单从原植物形态上,半夏及其伪品是可以做到直观区分的。
1.2 性状鉴别在完整药材中鉴定半夏及其伪品相对还是比较困难的。具体来说,半夏药材形状为“类球形”,表面白色且密布点状根痕,顶端中央浅黄色有凹痕;水半夏药材形状为“长椭圆形”,表面根痕不明显,芽痕凹陷似菊核;虎掌南星药材形状为“扁球形”,主块茎周围有虎类脚掌的小块茎;犁头尖药材形状为“圆锥形”,个体较小,表面有圆点状根痕,顶端芽痕较大;山珠半夏药材为“扁椭圆形”,表面白色有皱纹,顶端茎痕凹陷,周围有小侧芽[5]。总之,通过外观性状上鉴定半夏及其伪品十分依赖鉴定者的个人经验,且鉴定结果只能作为初步参考,不能作为最终鉴定结果的主要依据。特别是现在市面上多为饮片,这就加深了半夏及其伪品鉴定的难度。
1.3 理化鉴定传统半夏及其伪品的鉴定方法中,利用显微镜和色谱法的“理化鉴定”是相对较为科学的、具备标准的鉴定方法。杨俊宝等[6]论述了具体的物理鉴定方法,主要是通过显微镜观察样本的物理性质,针对鉴定样本的草酸钙针晶束和木栓细胞两方面。其中,拥有整齐无散乱的、较长的草酸钙针晶束的可以鉴定为半夏;草酸钙针晶束呈现一半整齐、一半散乱,且相对较短的可以鉴定为虎掌南星;拥有散乱叠放的草酸钙针晶束,且相对较粗的可以鉴定为水半夏。此外,“木栓细胞”是水半夏外皮所独有的,无论是半夏还是虎掌南星的外皮中,均不会有残存。马伟光等[7]认为利用薄层色谱法可以从化学性质上区分半夏及其伪品。由于化学法所检测的主要是样本中的精氨酸,而在半夏与虎掌南星之间,精氨酸成分一致,无法区别。因此,仅能针对水半夏和山珠半夏。总的来说,尽管“理化鉴定”相对来说有明确的标准,减少了对鉴定者的个人经验的依赖。但是,“理化鉴定”依然存在不小的缺点,对于半夏中掺杂伪品的鉴定较为困难。
1.4 光谱鉴定随着“电化学指纹图谱”的问世,一种更加直观、简便的半夏及其伪品的鉴定方法被研究出来。具体来说,王朋展等[8]认为可以通过“电子鼻”,以“气味指纹”来进行半夏及其伪品的鉴定分析。这一研究为快速鉴别半夏及其伪品提供了一条新的途径,甚至可以应用在不同产地的半夏药材鉴定上。孟祥松[9]论述了另外一种半夏及其伪品的鉴定方法——“高效液相色谱法”。通过对半夏及其伪品中多类核苷类成分含量的检测,可以有效鉴别半夏及其伪品。结果显示,由于对比吸收峰的不同,通过高效液相色谱,能够直观看出是否掺伪。
2 鉴定半夏及其伪品的现代方法
2.1 蛋白质技术鉴定吴成丽[10]采用高效毛细管电泳 (HPCE) 鉴别半夏及水半夏,其中性提取液和碱性提取液蛋白的 HPCE 吸收峰有明显的差异,且重复性良好,可有效鉴别两者。对不同产地半夏进行蛋白质圆盘 IEF 电泳和薄层等电聚焦(IEF) 电泳比较,发现可将半夏与几种近缘植物明显区别开。
2.2 DNA 分子鉴定卢道会[11]认为DNA 条形码ITS、rps16 序列可用于半夏及其易混品的 DNA 条形码鉴别,mat K、trm L-trn F 序列可作为天南星科不同属间 DNA 条形码条形码组合候选序列鉴别半夏及其邻近属植物,rpl32-trn L 序列可作为鉴别半夏及其易混品的DNA 条形码候选序列。张雅琴[12]针对半夏与其伪品掌叶半夏RAPD 鉴别,发现利用引物 S10 和 S17 进行 RAPD-PCR 能将二者有效鉴别; 且进一步将 RAPD 分子标记片段 T350 转化为 SCAR分子标记,亦可对二者进行快速有效鉴定。陈永兰[3]详细论述了其所设计的引物能够特异性地扩增出半夏的目的 DNA,且适用于全国 9 个主要不同产地的半夏药材的检测及真伪鉴别。构建了 5 种半夏的 DNA 指纹图谱,可独自将 5 种材料分开,从而实现对半夏种质资源分子水平的鉴定。
3 小结
卢道会[14]认为,现代分子技术诞生以前,对半夏及其伪品的鉴定方法,主要采取了性状鉴定、理化鉴定与光谱色相鉴定。为了加强鉴定效果,提升鉴定准确率,通常会采用联合鉴定的方式。但是,这些传统鉴定方法或多或少都存在一些弊端。例如,在性状鉴定中,对鉴定样本的完整性要求较高,且鉴定标准依赖鉴定者的个人经验,鉴定结果受鉴定者主观能动性影响,因此,“人为因素”对鉴定结果的干扰较大,鉴定结果准确率较低;在理化鉴定中,需要鉴定者能够熟练操作显微镜,或者样品的预处理过程相对复杂,费时费力。于此同时,化学检测方法对一些半夏伪品并不适用,因此,理化鉴定范围较小,同时检测不够便捷;光谱色相鉴定在传统鉴定方法中探索出了一条新的路径,但是光谱色相在鉴定过程中,样品前处理、展开剂等都有可能干扰最终的鉴定结果。敬勇[15]认为,相比传统鉴定方法,现代分子技术对于半夏及其伪品的鉴定具有独特优势。其中,蛋白质鉴定技术是现代半夏鉴定的重要指标之一;DNA分子鉴定应用DNA 条形码技术,不仅效果好、准确率高,而且操作简便、通用性高,可重复鉴定,在半夏及其伪品的鉴定中,发挥出积极的作用。
综上所述,现代分子鉴定具有受干扰较小、有明确统一的鉴定标准、可实现鉴定结果的数据化等优点,且操作简便,对掺伪品及掺伪量的量化研究有重要作用,值得进一步的推广和研究。