胃癌患者血清膜联蛋白A1、糖类抗原72-4、胃蛋白酶原Ⅰ及胃泌素-17 水平变化及意义分析

夏永欣，田春阳，郭洁，张萌

南阳市中心医院消化科二病区，河南 南阳4730000

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其病死 率仅次于肺癌，位居第二[1]。胃癌的发生较为隐匿，早期诊断和治疗对提高患者的疗效和降低病死率具有重要意义。肿瘤标志物检测方法由于具有获取方便、检测速度快、满足定性和定量检测需求的优点而被广泛应用于临床实践[2]。血清中的糖类抗原72-4（carbohydrate antigen 72-4，CA72-4）、胃蛋白酶原Ⅰ（pepsinogen Ⅰ，PGⅠ）和胃泌素-17（gastrin-17，G-17）可以作为胃癌诊断的生物学指标[3]。肿瘤相关抗原引起的自身抗体可在肿瘤患者的血清中检测到，并可用于检测肿瘤进展。尽管恶性肿瘤中自身抗体水平升高的原因尚不清楚，但自身抗体被认为是可以识别肿瘤发生的潜在生物标志物[4]。此外，由于在正常人和非肿瘤患者中抗原抗体反应不明显，因此自身抗体作为用于肿瘤检测的血清学标志物是可行的。最近的报道表明，膜联蛋白A1（Annexin A1，ANXA1）的异常水平可能与多种肿瘤有关，可用作潜在的标志物和治疗靶标[5]。本研究探讨胃癌患者血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ及G-17 的水平及意义，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2017 年1 月至2020 年4 月在南阳市中心医院治疗的85 例胃癌患者（胃癌组）。纳入标准：①均经病理学检查确诊；②年龄＞18 岁；③入组前无放化疗史。排除标准：①合并其他恶性肿瘤、肝肾功能障碍、免疫系统疾病、血液系统疾病等；②复治患者。同时选取60 例慢性胃炎患者（慢性胃炎组）。纳入标准：符合《慢性胃炎诊断标准与治疗方案》[6]诊断标准；年龄＞18 岁；入院前1 个月未进行药物治疗。排除标准：合并甲状腺疾病、血液系统疾病等。另选取60 例体检健康者作为对照（健康组）。3 组受试者各基线特征比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）（表1），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，所有患者及家属知情同意并签署知情同意书。

1.2 检测方法

取3组受试者的空腹静脉血4 ml，以3000 r/min的速度离心6 min，分离血清，采用酶联免疫吸附法检测患者的血清G-17、CA72-4 水平，乳胶免疫比浊法检测血清PGⅠ水平。全自动电化学发光免疫分析仪和试剂盒均购自上海酶联科技有限公司，并严格按照试剂盒说明书进行操作。

表1 3 组受试者的基线特征

ANXA1 检测：使用ANXA1 自身抗体半定量检测试剂盒，将纯化的ANXA1 用磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）稀释至0.5 mg/ml，每孔200 μl 加到96 孔板中，并用2.5%的胎牛血清封闭。用PBS 以1∶100 的比例稀释制备的血清样品，然后将稀释的血清样品添加到每孔中。使用辣根过氧化物酶标记的抗人免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）检测ANXA1 自身抗体水平，加入四甲基联苯胺底物溶液，每孔100 μl，并在室温下孵育15 min，每孔中添加50 μl 2 mol/L 的硫酸终止反应，用550 型酶标仪在450 nm 波长处测量每个孔的吸光度（A），A值代表ANXA1自身抗体水平。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，两组比较采用t 检验，多组比较采用方差分析；计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用χ2检验；灵敏度=真阳性例数/（真阳性+假阴性）例数×100%，特异度=真阴性例数/（真阴性+假阳性）例数×100%，阳性预测值=真阳性例数/（真阳性+假阳性）例数×100%，阴性预测值=真阴性例数/（真阴性+假阴性）例数×100%；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ、G-17水平的比较

胃癌患者血清ANXA1、CA72-4 和G-17 水平均高于慢性胃炎和健康者，而PGⅠ水平均低于慢性胃炎和健康者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表2）

2.2 不同临床特征的胃癌患者血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ、G-17 水平的比较

TNM 分期为Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤大小＞5 cm 的胃癌患者血清ANXA1 水平分别高于TNM 分期为Ⅰ+Ⅱ期、肿瘤大小≤5 cm 的患者（t=-2.490、-2.190，P＜0.05）。低分化、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤大小＞5 cm、有淋巴结转移患者血清CA72-4 水平分别高于中高分化、TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、肿瘤大小≤5 cm、无淋巴结转移的患者（t=-2.415、-4.412、-4.053、-3.412，P＜0.05）。TNM 分期为Ⅲ+Ⅳ期患者血清PGⅠ水平明显低于TNM 分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者（t=5.144，P＜0.01），而G-17 水平明显高于TNM 分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者（t=-3.288，P＜0.01）。（表3）

表2 3 组受试者血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ、G-17 水平的比较（±s）

表2 3 组受试者血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ、G-17 水平的比较（±s）

注：a与健康组比较，P＜0.05；b与慢性胃炎组比较，P＜0.05

组别胃癌组（n=85）慢性胃炎组（n=60）健康组（n=60）F值P值ANXA1（g/L）6.05±1.53a b 4.40±1.02a 1.50±0.44 7.393 0.000 CA72-4（U/ml）40.20±9.88a b 8.92±2.10a 3.49±1.00 9.221 0.000 PGⅠ（ng/ml）45.04±13.32a b 110.32±34.45a 160.50±41.12 10.322 0.000 G-17（pmol/L）19.29±5.59a b 14.59±4.33a 9.89±2.10 8.221 0.000

2.3 血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ、G-17 单独及联合检测对胃癌的诊断价值

血清ANXA1 诊断胃癌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为65.88%（56/85）、65.00%（78/120）、57.14%（56/98）和72.90%（78/107）。

血清CA72-4 诊断胃癌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为58.82%（50/85）、58.33（70/120）、50.00%（50/100）、66.67%（70/105）。

血清PGⅠ诊断胃癌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为63.53%（54/85）、64.17%（77/120）、55.67%（54/97）和71.30%（77/108）。

血清G-17 诊断胃癌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为78.82%（67/85）、62.50%（75/120）、59.82%（67/112）和80.65%（75/93）。

血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ、G-17 联合诊断胃癌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为84.71%（72/85）、81.67%（98/120）、76.60%（72/94）和88.29%（98/111）。

3 讨论

萎缩性胃炎为常见的慢性胃病，如果患者未得到有效治疗，则可能发展为胃癌[7]。因此，萎缩性胃炎的早期诊断同等重要，因此本研究也将其纳入研究范围。血清肿瘤标志物是一种与肿瘤相关的抗原，可以在一定程度上反映肿瘤的性质和分化特征。因此，检测其血清水平可有助于肿瘤的诊断、预后判断和治疗[8-10]。

肿瘤标志物可在肿瘤组织、血液甚至排泄物中被发现，正常组织中却含量很小。肿瘤标志物的检测方法简单、可行、可重复性高[11]。因为胃癌的发展是通过健康人、慢性胃炎患者和胃癌患者的过程进行的，因此，本研究建立了胃癌组、健康组和慢性胃炎组进行研究。CA72-4是一种高分子量的糖蛋白，也是近年来临床实践中开发的新型肿瘤标志物，其检测特异度较高，在胃肠道肿瘤的检测中具有很高的价值[12]。胃蛋白酶由胃的主要细胞合成和分泌，属于天冬氨酸蛋白酶家族，包括PGⅠ和PGⅡ。研究发现胃黏膜腺体可影响PGⅠ的分泌，当胃黏膜腺体萎缩时，会抑制PGⅠ的分泌。同样，胃黏膜的功能和形态也会影响患者的血清PG 水平[13]。G-17 是胃肠道G 细胞分泌的一种多肽激素，可与胆囊收缩素受体结合，刺激胃酸分泌并通过信号转导滋养胃肠黏膜，不仅可以维持消化道的结构完整性，还可以调节消化道的功能[14]。血清G-17 水平的变化可以反映胃黏膜病变的状况，因此可以作为胃癌和癌前疾病的筛查指标。研究发现，G-17与胃癌的发生和发展有关，可以直接影响胃癌细胞从良性向恶性转化[15]。膜联蛋白A 家族在胃癌中过表达，可作为早期胃癌诊断的潜在标志物和治疗靶标[16]。膜联蛋白A 家族成员包括A1～A11 和A13，参与细胞信号转导、离子转运、细胞分化和凋亡等过程[17]。目前，已经发现ANXA1的异常表达与多种肿瘤的癌变有关[18]。

表3 不同临床特征的胃癌患者的血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ、G-17 水平（n=85）

本研究结果显示，胃癌患者血清ANXA1、CA72-4 和G-17 水平均高于慢性胃炎患者和健康者，而PGⅠ水平均低于慢性胃炎患者和健康者。这表明这4 种肿瘤标志物对胃癌患者的变化敏感，具有一定的诊断价值。由于胃黏膜萎缩、胃功能障碍和胃黏膜腺上皮化生，导致PGⅠ水平升高。尽管尚不清楚恶性肿瘤中自身抗体水平上升的原因，但认为ANXA1 水平上升导致机体的免疫反应，ANXA1 自身抗体水平的升高可能与肿瘤细胞的迁移和转移有关。为了研究ANXA1 水平对胃癌的影响，本研究进一步分析了其与胃癌临床特征的关系。TNM 分期为Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤大小＞5 cm的胃癌患者血清ANXA1 水平分别高于TNM 分期为Ⅰ+Ⅱ期、肿瘤大小≤5 cm 的患者，以上表明ANXA1 水平与肿瘤负荷有关，肿瘤负荷越大，肿瘤细胞释放的ANXA1 越多，这直接导致人体对自身抗体的反应越强，其在胃癌的发生和发展中发挥重要作用。通过进一步比较发现，不同TNM 分期的胃癌患者血清PGⅠ、G-17 和CA72-4 水平存在差异。随着TNM 分期的增加，血清PGⅠ水平呈下降趋势，而血清G-17 和CA72-4 水平升高，表明上述血清指标与胃癌的TNM 分期密切相关，可用于评估胃癌患者的严重程度。因此，在临床工作中可检测上述指标水平，以有效地诊断胃癌并确定胃癌患者的严重程度，有助于制定临床治疗方案。

目前临床研究中对胃癌患者的早期诊断研究主要是针对多种标志物联合检测，提高其阳性检出率和灵敏度[19-20]。血清标志物水平变化与胃癌临床特征的关系研究较少，本研究主要选择血清ANXA1、CA72-4、PGⅠ和G-17 水平变化与胃癌临床特征的关系进行研究。但是，本研究中选择病例的数量是有限的，这可能会影响数据的结果。在后期阶段将加大样本量，并将不同分化程度、胃癌预后和复发胃癌肿瘤标志物水平的变化纳入研究。

综上所述，胃癌患者血清ANXA1、CA72-4 和G-17 水平升高，PGⅠ水平降低，与患者TNM 分期、肿瘤大小、分化程度及淋巴结转移有一定联系，值得进一步研究。